支气管哮喘患者外周血T细胞亚群Th1、Th2及其相关细胞因子水平变化及意义

黄伟强，李惠，袁梅，陈小丹(深圳市坪山新区妇幼保健院，广东深圳58;深圳市龙岗区人民医院)

支气管哮喘患者外周血T细胞亚群Th1、Th2及其相关细胞因子水平变化及意义

黄伟强1，李惠2，袁梅2，陈小丹2
(1深圳市坪山新区妇幼保健院，广东深圳518122;2深圳市龙岗区人民医院)

摘要:目的观察支气管哮喘患者外周血辅助性T细胞(Th)亚群Th1、Th2及其相关细胞因子水平，探讨其在支气管哮喘发生、发展中的作用。方法支气管哮喘患者(支气管哮喘组) 80例，均处于急性发作期，治疗后均处于临床缓解期;健康体检者40例作为对照组。检测两组外周血Th1、Th2、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ;以支气管哮喘病情为因变量，以IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ为自变量，进行多因素Logistic回归分析。结果与对照组比较，支气管哮喘组外周血Th1/Th2降低，血清IL-2、IFN-γ降低，血清IL-6、TNF-α升高，P均＜0.01;急性发作期患者较临床缓解期患者上述指标改变更为显著，P均＜0.01。多因素Logistic回归分析结果显示，血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均是影响支气管哮喘病情的危险因素(P均＜0.05)。结论Th1/Th2平衡失调及其介导的细胞因子IL-2、IFN-γ分泌减少，IL-6、TNF-α分泌增加，可能参与了支气管哮喘的发生、发展。

关键词:支气管哮喘; CD+4辅助性T细胞;细胞因子;白细胞介素;肿瘤坏死因子α;γ干扰素

研究证实，细胞因子IL-6、IL-10、TGF-β表达增加或异常表达与支气管哮喘发生发展关系密切［1～3］。CD+4辅助性T细胞(Th)亚群包括Th1、Th2、Th3亚群，各亚群功能及分泌的主要细胞因子不同。其中Th1亚群主要分泌IL-2、IFN-α、IFN-γ等，Th2亚群主要分泌IL-6、TNF-α等［4，5］。本研究观察支气管哮喘患者外周血Th1、Th2及其相关细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平变化，并探讨其意义。

1　资料与方法

1.1临床资料纳入标准:①符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组和中华医学会全科医学分会制定的《中国支气管哮喘防治指南(基层版)》支气管哮喘的诊断标准［4］;②年龄15～80岁;③研究前1个月内未使用免疫抑制剂，未口服或静脉应用糖皮质激素。排除标准:①合并其他脏器急性感染或严重脏器器质性病变者;②合并其他自身免疫系统疾病或结缔组织疾病者;③妊娠期妇女。选择2012年9月～2014年4月在深圳市坪山新区妇幼保健院和深圳市龙岗区人民医院明确诊断为支气管哮喘患者(支气管哮喘组) 80例。其中，男43例、女37例，年龄15～72(50.1±15.1)岁;均处于急性发作期，治疗后均处于临床缓解期。选择同时期健康体检者40例作为对照组，男21例、女19例，年龄16～79(49.7±15.8)岁。两组年龄、性别具有可比性。

1.2外周血Th1、Th2及其相关细胞因子水平检测 分别取支气管哮喘组急性发作期、临床缓解期及对照组空腹静脉血6 mL，分为2份，每份3 mL。一份采用流式细胞术检测Th1、Th2，计算Th1/Th2，步骤参照陶国华等［6］方法。另一份以3 000 r/min离心15 min，取上清液，采用ELISA法检测血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ;试剂盒均购于上海恒远生物科技有限公司，操作严格按照说明书进行。

1.3统计学方法采用SPSS13.0统计软件。计量资料以珋x±s表示，组间比较采用t检验。以支气管哮喘病情为因变量，以IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ为自变量，进行多因素Logistic回归分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

与对照组比较，支气管哮喘组外周血Th1亚群比例、Th1/Th2降低，而Th2亚群比例升高，血清IL-2、IFN-γ降低，血清IL-6、TNF-α升高，P均＜0.01;急性发作期患者较临床缓解期患者上述指标改变更为显著，P均＜0.01。见表1。多因素Logistic回归分析结果显示，血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均是影响支气管哮喘病情的危险因素(P均＜0.05)。见表2。

表1　两组外周血Th1、Th2、Th1/Th2、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ比较(±s)

注:与对照组比较，*P＜0.01;与临床缓解期比较，△P＜0.01。

组别　n　Th1(%)　Th2(%)　Th1/Th2　IL-2(pg/mL)　IL-6(mg/L)　TNF-α(μg/L)　IFN-γ(pg/mL)支气管哮喘组急性发作期　80　6.54±1.57＊△8.18±1.86＊△0.72±0.05＊△15.34±1.29＊△79.43±4.54＊△1.83±0.43＊△112.23±10.21＊△临床缓解期　80　8.23±1.92*　9.94±2.06*　0.83±0.06*　29.34±1.38*63.43±4.21*　1.34±0.32*　154.32±13.21*对照组　40　10.24±2.15　10.39±2.23　0.99±0.07　38.52±1.32　56.31±3.54　0.56±0.23　183.41±14.21

3　讨论

正常机体内Th1、Th2亚群处于相对平衡状态，共同发挥免疫效应，同时互相调节亚群功能，保持免疫平衡，使机体免疫能力处于正常状态。但是，在外界刺激或体内不良因素诱导下，Th1、Th2比例失去平衡，进而影响免疫应答，诱发疾病［7，8］。本研究中支气管哮喘组患者急性发作期及临床缓解期外周血Th1亚群比例均低于对照组，而Th2亚群比例均高于对照组，说明哮喘的发作可能与Th1亚群功能低下、Th2亚群功能亢进有关。对照组Th1/Th2比例接近1，说明机体处于免疫平衡状态;支气管哮喘急性发作期及临床缓解期患者Th1/Th2均较对照组低，急性发作期患者比临床缓解期患者比值更低，提示Th1/Th2比例失调参与支气管哮喘的发生、发展过程。

研究表明，Th1亚群分泌IL-2、IFN-γ等细胞因子，Th2亚群分泌IL-6、TNF-α等［9～11］。IFN-γ是一种气道炎性介质，其免疫调节活性比较强，在哮喘发作时可引发气道上皮细胞脱落。唐玉红等［12］研究发现，Th1细胞可通过分泌IL-2、IFN-γ促进细胞免疫应答，对哮喘发生、发展有一定抑制作用。体内IFN-γ水平与白三烯水平呈正相关，即IFN-γ致敏可促进肥大细胞或嗜酸粒细胞释放白细胞三烯，促进IL-2分泌，共同参与哮喘发作［13］。TNF-α主要由活化的巨噬细胞产生，参与机体的免疫病理损伤; TNF-α分泌增加可引起局部炎性反应，严重时导致多器官受损［14］。IL-6是目前发现的生物学活性最广泛的细胞因子，可以调节免疫应答，促进B细胞的增殖和分化［15，16］。本研究结果表明，与对照组比较，支气管哮喘组血清IL-2、IFN-γ水平降低，血清IL-6、TNF-α水平升高;急性发作期患者较临床缓解期患者上述指标改变更为显著。多因素Logistic回归分析结果提示，血清IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ水平均是影响支气管哮喘病情的危险因素。综上所述，我们推测Th1/Th2平衡失调及其介导的细胞因子IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ异常分泌可能参与支气管哮喘的发生、发展。

参考文献:

［1］李玉秀，苗英慧.支气管哮喘患者血清IL-6、IL-10及TNF-α的表达水平及临床意义［J］.医学理论与实践，2014，27(13) :1695-1697.

［2］伏开新，姚加平，李静，等.支气管哮喘患儿血清TNF-α、VIP、MTL和GAS检测的临床意义［J］.放射免疫学杂志，2013，26(4) : 399-401.

［3］喻昌利，郭艳丽，刘和亮.细胞因子白细胞介素-10在哮喘发病机制中的作用及其治疗效应［J］.中国医学前沿杂志(电子版)，2012，4(11) : 45-50.

［4］林江涛，祝墡珠，王家骥，等.中国支气管哮喘防治指南(基层版)［J］.中国实用内科杂志，2013，(8) : 615-622.

［5］凌昊，赵霞.Th17及相关细胞因子在哮喘中的作用研究［J］.长春中医药大学学报，2014，30(5) : 930-933.

［6］陶国华，曹兴建.流式细胞术检测TH1/TH2的方法探讨［J］.临床检验杂志，2006，24(2) : 116-117.

［7］Fischer R，Tome D，McGhee JR，et al.Th1 and Th2 cells are required for bith eosinophil and neutrophil-associated airway inflammatory responses in mice［J］.Biochem Biophys Res Commun，2007，357(1) : 44-49.

［8］许珂玉，王艳杰，赵丹玉，等.补脾益气方药对哮喘大鼠Th1/Th2失衡的调节及机制［J］.山东医药，2012，52(20) : 16-18.

［9］初忠侠.支气管哮喘患儿血清IL-9 IFN-γ水平变化及意义［J］.山东医药，2014，54(20) : 100-101.

［10］梁晓君，胡志坚，荀春华.哮喘患儿外周血降钙素原、IL-17及CRP水平监测及应用［J］.实验与检验医学，2014，32(5) :575-576.

［11］陶国华，曹兴建.流式细胞术检测TH1/TH2的方法探讨［J］.临床检验杂志，2006，24(2) : 116-117.

［12］唐玉红，赵国斌，杨继雷，等.IFN-γ、IL-4、IL-17在小鼠哮喘模型不同阶段的变化及其意义［J］.河北北方学院学报(自然科学版)，2014，30(3) : 59-63.

［13］卢彩作.支气管哮喘的药物治疗进展［J］.中国实用医药，2013，27(2) : 242.

［14］龚臣，邓静敏.Th17/Treg在支气管哮喘发病机制中的作用及研究进展［J］.中华哮喘杂志，2013，33(1) : 34.

［15］李玉秀，苗英慧.支气管哮喘患者血清IL-6、IL-10及TNF-α的表达水平及临床意义［J］.医学理论与实践，2014，27(13) : 1695-1707.

［16］崔利萍，田明，吴丽娟，等.炎症因子TSLP、TNF-α和IL-8对不同气道炎症性疾病的影响及临床意义［J］.中国临床研究，2014，27(7) : 776-781.

(收稿日期:2014-10-19)

通信作者:李惠，E-mail: 280483807@ qq.com

基金项目:广东省深圳市龙岗区科技计划医疗卫生项目(YS2012087)。

文章编号:1002-266X(2015) 20-0040-02

文献标志码:B

中图分类号:R562.2

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.20.014