西方近代食用菌菌种知识在我国的传播及影响（三）

贾身茂 王瑞霞



西方近代食用菌菌种知识在我国的传播及影响（三）

贾身茂1王瑞霞2

（1.河南省科学院生物研究所，郑州 450008；2.《食用菌学报》编辑部，上海市农业科学院食用菌研究所，国家食用菌工程技术研究中心，上海 201106）

3 民国时期西方近代食用菌菌种知识在我国全面传播

民国时期西方近代食用菌菌种知识在我国的传播载体，主要分散在有关国人自编的食用菌栽培图书与撰写的论文中。其中菌种专论3篇，即《人工种菇之菌种问题》（1937）、《西洋菌种的培养法》（1937）、《蕈种之制造法》（1937），栽培论文约8篇，即《种蕈新法》（1916）、《蕈之栽培》（1922）、《中国食用蕈种类与西洋蕈培养法》（1927）、《洋蕈之栽培》（1931）、《食用菌之栽培法》（1932）、《洋菰实际栽培法》（1936）、《香菰朴蕈平茸等之室内栽培法》（1936）、《食菌栽培之原理及实际》（1941）等。其中黄范孝的《香菰朴蕈平茸等之室内栽培法》是介绍“日本宇野昌一氏关于食用菌之室内栽培法”编译的锯屑室内栽培食用菌的文章。图书有11部，即《蕈之栽培》（初版尚未查到，本文作者仅对1933年再版）、《最新实验人工种菰问答》（1932年初版及1934年再版尚未查到，本文作者仅依1937年3版与1947年4版）、《四季栽培人工种菰大全》（1933）、《种蕈实验谈》（1933）、《最新香菰冬蕈及白木耳之栽培法》（1934）、《食用菌栽培法》（1935）、《西洋菌栽培法》（1935）、《人工蘑菇栽培法》（1936年初版）、《菰农秘传改良种菰术》（1939）、《银耳香菰繁殖律》（1940）、《科学的种菇法》（1941）等进行介绍。

与晚清时期的食用菌文献相比，民国时期这些文献多是国内一些专家撰写，翻译的较少，大多也引进了拉丁学名，对英语术语，大多数也翻译出了对应的汉语名称，科学内容也更深入了一步。主要内容如下。

3.1 “纯种法（pure culture method）”与菌丝体菌种制法

民国时期第一篇蘑菇栽培的论文是邹秉文撰写的《种蕈新法》（1916），第二篇是胡竟良撰写的《蕈之栽培》（1922），两篇论文相隔6年，但对于“纯种法（pure culture method）”的技术记述是同样的，唯后者撰写的较详细，文字较多。现就邹秉文论文中的有关内容摘要如下：“特格耳博士于1905年发明一种纯种法（pure culture method），其法以一长玻璃管盛以厩粪，以蒸汽杀灭其中之微生物（micro organism），然后再取合意之蕈种，取其幼小者，以洁净小刀取菌肉（菌丝体）少许，置之于玻璃管中，三四星期内，管中之粪尽为菌丝体所侵入矣。于是取少许置之于粪砖中，以成菌丝砖（brick spawn），如英人之治法；或置之散粪中以成菌丝粉（flake spawn），如法人之治法皆可。惟菌丝粉不耐久，菌丝砖则能之，可藏为后用，此为较优。藏处须干燥而冷，万不可热足以伤之也。”[12]

以此法制成的厩粪玻璃管菌种，为纯菌丝体菌种；以玻璃管菌种繁殖的“菌丝砖”或“菌丝粉”菌种，不能属于纯种。正如《蕈之栽培》一文中描述的那样：特格尔“……发表其纯种栽培蕈法一文，美农部首采其法试验，至1914年纯种法制成之菌砖，其纯洁为百分之八十至九十”[13]。尽管如此，厩粪试管纯菌丝体菌种在食用菌菌种技术上仍是一大创新，他开辟了纯菌丝体菌种的新纪元，为走向用完全纯菌丝体菌种栽培食用菌奠定了科学基础。

特格耳博士发明的纯种法（pure culture method），尽管只停留在试管阶段，在使用上，仅以“玻璃管菌种”为种源繁殖“菌丝砖”或“菌丝粉”，虽然“菌丝砖”或“菌丝粉”不能属于纯菌种，但在食用菌制种技术的发展历史中“不可谓非一大进步也[12]”。其价值有二，一是美B.M. Duggar玻璃管厩肥纯菌种的研制成功，开创了组织分离培养法，使蘑菇制种技术进入了一个崭新的科学发展阶段。栽培者使用由“玻璃管纯菌种”繁殖的“菌丝砖”或“菌丝粉”菌种，其纯度比用野生菌丝体繁殖的“菌丝砖”“菌丝粉”高得多，栽培产量增加，那种用野生菌丝体繁殖的“菌丝砖”或“菌丝粉”很快被淘汰。由此美国成立了纯种菌丝公司（Pure culture Spawn Company，Columbia，Missouri，U.S.A）专卖此项菌丝砖。二是由于“Duggar氏用蘑菇的组织培育纯菌种成功后，这种蘑菇才正式成为栽培的品种，种菇事业也就从此有了飞跃的发展”[14]。这是两个划时代的贡献，标志着食用菌制种技术开始进入了科学的新阶段，开辟了食用菌栽培的菌种使用纯菌丝体菌种的道路。

3.2 “生活史”的概念

1922年胡竟良在《蕈之栽培》一文中，在民国食用菌文献中首次提出了菌之“生活史”的概念，这一概念叙述的蕈一生的生长发育过程及图示，为认知食用菌的个体发育提出了新的科学观念，给食用菌制种奠定了理论依据：“上文所述之胞子，为一单细胞。成熟后，脱落，若温度湿度适宜，即涨大而发芽。由胞膜吸收水分养液，乃分裂为两个细胞。每一新细胞，继续分裂，成长丝形，名菌丝（hypha）。多数菌丝错杂，名菌丝体。菌丝体在土中吸收有机物而生长。发达至一定限度时，数菌丝团结呈小球形。渐长大成纽形露出土外。渐长大始稍稍能分别菌盖与菌干。若为有菌围之种，其菌围在未成熟之先，不露出，而为一层薄膜所包裹，名菌围膜（veil）。至成熟时，由菌褶发生胞子。胞子脱落，又生菌丝体。此其无性生殖也。至有性生殖，迄今未发现。故其生活史，可上图表之（书中插图为圆形，即：胞体→胞子→菌丝体→胞体）。蕈虽由胞子发生。但吾人欲栽培之，则并非直接用胞子。当于另节详之”（指“C菌丝砖”部分）。[13]该文认为食用菌个体发育从胞子到胞子的生活史是无性生殖，还不了解胞子的性及有性生殖，这反映了当时传入我国的真菌知识的科学水平。

1935年《食用菌栽培法》一书在“第二章菌之生理及其成分”之“第三节菌之生殖过程”[13]最后总结段也使用了生活史的概念：“这种无性生殖体我们称之曰‘菌’，在植物学上则曰‘胞体’。胞体发育到了极度，便于菌褶内产生芽孢。芽孢成熟，脱离胞体，落于生活适宜地点，又开始其新生命的活动，发育而复为菌丝体。所以菌的生殖，是由芽孢而菌丝体而胞体，循环交替，生殖不息的。牠的生活史，虽仅短短的数月，然其变化却是这样多的。由此可知，菌之发生是靠种子的，并不是靠湿气所生，也不是蛇毒所生，更不是什么瑞气能生的。”[15]这一段的叙述，阐明了菌的繁殖是靠“种子”，不为“湿气所生，也不是蛇毒所生，更不是什么瑞气能生的”的科学道理。但对孢子的性也还没有认知，把子实体称之为“胞体”或“无性生殖体”。

1941年《科学的种菇法》一书的“第二章菇的生殖（一）生活史”中讲：“菇的生活史，简单说起来，就是从胞子发芽，变菌丝及菌丝体，再由菌丝体上生长菓体，就是菇的本身，生长褶裥，包含著无数胞子，成熟了以后，再分散开来。”[16]这样的认识与上述相同。

以上文献都讲了蕈的生活史，说明蕈的个体发育是从孢子萌发开始，到菌丝，再长出胞体（即子实体）。但还都认为胞子到胞子的生殖是无性生殖，这反映出当时还没有认识清楚真菌孢子的性及其有性繁殖。

3.3 “胞子培养”与“组织培养”

（1）接种、接种法及接种量的概念。胡昌炽在《中国食用蕈种类与西洋蕈培养法》一文的“二、西洋蕈培养法”中“（五）接种”[17]节内叙述：“蕈之繁殖，用蕈丝下种，以接种名之，英语spawning，其方法在填床以后，须用寒暑计湿度计检视室内及床中之温度湿度。床温降至七十五~八十五度（注：指华氏，下同）时，接种为最宜，倘温度在百度以上，对于菌丝有害，低温时发育缓慢，皆不宜。蕈种有砖状与块状两种，前者大，五又二分之一×八又二分之一×一又二分之一吋（英制），因此接种时宜分切九块，以此一块在蕈床占一方尺中，块状蕈种组织甚松，以堪久藏，前者英国为多，后者法国普遍用之，接种法前者以一小块竖于床面下一寸处，后者埋入床面下0.5吋处，上面须各覆以堆肥，且固压之，得水湿温度菌丝能够向外蔓延，倘干燥时接种于床面，宜暂覆筵蓆等，以御干燥。”以上是栽培时的接种的概念、接种方法及接种量。胡竟良还叙述了试管种一只的接种量：“每一大管中所有之菌丝，可制砖一块。”[13]蕈种的接种场所、方法，下面“胞子培养与组织培养”部分还有更详细的叙述。

（2）胞子培养与组织培养。胡昌炽在其《中国食用蕈种类与西洋蕈培养法》一文的“二、西洋蕈培养法”中“（七）蕈种制造”[17]节内叙述：“洋蕈繁殖普遍用菌丝，此菌丝为种，英语称之曰Spawn。即译之为蕈种或蕈丝皆可，蕈之人工培养其繁殖方法有胞子培养与组织培养二种。①胞子培养（Spore culture）蕈类胞子发芽之研究，十九世纪末Mr.Margarete 与Miss C.Ferguson两氏，关于蕈类胞子之发芽与营养关系有多种发见，一八九三年Costantin氏在消毒马粪中，以野生洋蕈胞子接种，得多数之发芽，Miss Ferguson氏用蒸馏水、菜豆、甜菜、洋菌、马铃薯、肉汁等煎汁与无机及有机盐类之碳水化合物及窒素化合物之培养基，举行胞子发芽试验，其结果：Monobasic Magnesium Phosphate，Magnesium Phosphate，Magnesium Potassium Ammonium Phosphate，Ammonium Molybdate，Magnesium Iaclophosphate，Dibasiccalcium Phosphate及他盐类以含磷酸盐适量时胞子发芽最良，且举行组织培养亦得良好结果。美国B.M.Duggar氏之研究杀菌新鲜马粪及牛粪均得胞子之发芽。著者洋蕈胞子培养之试验（1925年之经过）培养基新鲜马粪500瓦，水1000竰，在Kohe锅热之，乃榨取其煮汁，凡煮汁1000竰加洋菜（Agar）10%～20%。纳入Flask瓶中溶解之，乃注入试验管中，每管6竰（此试验管之准备与细菌培养同）在Kohe锅行间隔杀菌三回。然后接种试验胞子发芽。试验材十管中之发芽数：胞子培养六管。组织培养十管。胞子之采收以洋蕈之菌膜已破，而见菌褶，菌帽之径约二寸，移入经杀菌之壜中，壜底置以滤纸，经二日即收得多数胞子，注入杀菌水，取有胞子行接种。组织培养则与下述方法同。②组织培养（Tissue culture） Miss Ferguson氏在一八九九年研究胞子培养，同时亦举行组织培养。美国B.M.Duggar氏在一九零二年受农务省之嘱托，研究各种蕈类之培养，大部种类均得组织培养之成功，方法之要点，在培养基材料与杀菌之注意。据美国农务省一九零五年研究报告实例说明如次：①用器之消毒。组织培养须用直径三竰长二十六竰之玻璃管，或底径十二竰之三角瓶，此等用器先洗清，水滴干后，瓶口装棉絮塞，乃置入干热杀菌箱中，热高至摄氏一六0度行杀菌，次以已杀菌之玻璃管装入培养基，洋菌组织培养普通用新鲜马粪，填充玻璃管四分之三。密塞棉栓，乃置入蒸气锅或高压锅（Autoelave）中行杀菌，高压锅在十五磅压力（著者试验，在二十瓩压力，杀菌结果最良）经十五——三十分钟，即得完全杀菌。用Kohe氏蒸气锅（此锅温度最高百度），须连续三日，每日行杀菌一回，所谓连续杀菌法，始得完全杀菌也。②接种。培养基完成杀菌后乃行接种，其方法先选种用之蕈，以形状正，蕈脚大，蕈膜尚未破之幼蕈为最佳。种蕈以蒸馏水洗清，接种须用小刀及白金线针此等工具，亦须预先以水沸煮行杀菌，接种在清洁室内或专用杀菌箱（以木框张玻璃所构成之箱）。防御杂菌之侵入，更为安全。用杀菌箱时，须预先以2%石炭酸喷布箱中行杀菌，种蕈以杀菌之刀划开之。再以内部组织切成一分万之小片，置于杀菌之扁平皿中，接种时以白金针摄取之。

器具之杀菌及种蕈之准备已如上述。接种方法与细菌之注意相同。先以玻璃管之棉塞在火焰上灼焦，以防霉菌之侵入，然后移入杀菌箱中，同时白金针在火焰灼烧，待冷却，乃启所置种蕈之扁平皿。而以此针摄取种蕈小片。拔玻璃管棉塞，种蕈小片投入其中，仍以棉塞紧闭，摇玻璃管，使种蕈小片埋入马粪中，以令容易发生菌丝。接种毕，玻璃管须附以标签，注明种名及接种日月，乃安置摄氏十五度至十八度之定温箱中，一星期内即显然见菌丝蔓延，经一月菌丝能伸达管底，以此菌丝分殖，可制种蕈砖或种蕈块也。”

以上对组织培养和孢子培养的无菌操作技术叙述得已很详尽。还引入了用洋菜（Agar）作试管菌种的方法。所述胞子的英语对应词为Spore，组织的英语对应词为Tissue。但孢子培养实为多胞子培养，尚未引入“分离”及单孢子的概念。

（3）孢子与菌丝的生物学特性。胡竟良在《蕈之栽培》（1922年）一文中之“A、蕈之观察”节的“4、菌之生活史”[13]中记述：“至成熟时，由菌褶发生胞子，胞子脱落，又生菌丝体，此其无性生殖也。至有性生殖，迄未发现。”由于当时只知道胞子是蕈的“种子”，还不知道胞子的“性”，因此还只能认为：“由菌褶发生胞子，胞子脱落，又生菌丝体，此其无性生殖也。”[13]

魏新农著《最新香蕈冬菰及白木耳之栽培法》（1934）一书中“第八章胞子及菌丝之性质”里首次叙述了胞子和菌丝的生物学特性：“依着农学家的研究，胞子和菌丝的性质如左：一、胞子之性质（一）胞子接触摄氏五十度（华氏一百二十二度）以上的温度便要失去发芽力。（二）胞子在摄氏零度（华氏三十二度）的空气或水中，尚不失去发芽力。（三）胞子接触摄氏零下十八度（华氏零度）的空气，经过二小时，仍旧不失去它的发芽力。（四）收藏胞子，经过了三个月，便失去发芽力；收藏的方法不好的时候，经过了一个星期，便要失去它的发芽力。（五）胞子在摄氏十六度的温度中间，经过二十四小时，便要发芽。二、菌丝之性质（一）菌丝干燥之后，便要枯死。（二）菌丝在摄氏四十度（华氏一百零四度）的温度中间，就是不干燥，也要枯死。（三）菌丝在摄氏零度（华氏三十二度）的温度中间，便要冻死。”[18]

13年后史公山在《食用菌栽培法》（1935年）一书中“第二章菌之生理及其成分”的“第三节菌之生殖过程”里叙述的，还是尚未认识到有性胞子繁殖的本质特征：“我们已经知道，可供食用的菌，多属担子菌一系。担子菌为菌类中最高等的，这种高等菌类的生殖，都是行无性生殖（Aserual Reoroduction）的。一般高等植物，普通总是要经过开花的现象，遂能结子遂能生殖的；菌类是下等植物，牠们不必开花，而能结与高等植物同样有用的种子来。开花的作用，是便利雌雄两性器官之结合的，一定要经过这性的行为，然后能生殖。所谓无性生殖，便是无须举行这种性行为而仍能结子繁殖的。”[15]

1941年《科学的种菇法》在“第二章菇的生殖”之“（二）生殖”一节中，首次在我国提到菇类繁殖，是有“性”的崭新的科学概念：“……详细地研究菇类，它们虽是隐性，但性的生殖是存在的。……”[16]但这里仅仅提到性的生殖是存在的，还未进一步详细阐明。

以上对接种、接种法及接种量的概念，胞子培养与组织培养，胞子与菌丝的生物学特性三个问题进行的科学的介绍，不仅是对理论的阐述，也给菌种来源、菌种培养奠定了基础。但对于胞子的“性”还不十分清楚。《科学的种菇法》虽然提到菇类“性”的存在，但仍是语焉不详，缺乏进一步的科学阐述。（待续）