CA-1500全自动血凝仪两种方法测定纤维蛋白原的结果比较

2015-03-28 02:11欧阳贵平谢香萍李小花刘石长江萍
实验与检验医学 2015年1期
关键词:血凝法测定精密度

欧阳贵平,谢香萍,李小花,刘石长,江萍

(赣州市南康区第一人民医院检验科,江西 赣州341400)

纤维蛋白原(Fg)是血浆中含量最多的一种凝血蛋白,其含量降低或功能异常均可致凝血功能障碍;作为一种与凝血相关的急性时相蛋白,在血栓性疾病的发生和发展中也有重要意义。近年来Fg定量已作为出血与血栓性疾病诊治中最常用的检查项目,因此对其测定的准确性也直接影响到临床诊断和治疗。目前,无论进口和国产全自动血凝仪对Fg测定多数都涵盖 Clauss法和PT-der法两种方法,本文就用Sysmex公司CA-1500全自动血凝仪Clauss法和PT-der法两种方法测定Fg的结果进行比较分析,现报道如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集本院2014年5月份门诊及住院病人凝血功能检查血浆255例,年龄2至69岁,男性150例,女性105例。

1.2 仪器 日本Sysmex公司CA-1500全自动血凝仪。

1.3 试剂 采用西门子公司生产的CA-1500全自动血凝仪配套试剂,PT-der法采用PT试剂盒,批号为:545546,ISI值为:0.96;Clauss法采用 Fg 测定试剂盒,批号为:538075,缓冲液批号为:547038。采用西门子公司生产的CA-1500全自动血凝仪配套凝血质控品:Dade CI-Trol Coagulation Control Level 1, 批 号 为 :528147;Dade CI-Trol Coagulation Control Level 2,批号为:548239B。以上试剂和质控品均在有效期内使用。

1.4 方法 临床样本采集空腹静脉血 (所有样本均无溶血、黄疸和脂血)1.8ml于真空抗凝管(含0.2m l 109mmol/L枸椽酸钠抗凝剂)中,颠倒混匀,3000r/min离心10min,在2h内同时用Clauss法和PT-der法测定Fg含量,CA-1500全自动血凝仪检测临床样本时室内质控在控。依据Clauss法测定结果进行低值(Fg<2.0g/L)、 中值(Fg2.0~4.0g/L)、高值(Fg>4.0g/L)分组。

1.5 统计学方法 采用SPSS11.5软件进行统计学处理,计数资料用(x±s)表示,组间比较用t检验,P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1精密度 批内精密度同时用两种方法连续检测质控血浆Fg浓度20次,天间精密度同时用两种方法连续检测质控血浆Fg浓度20d,计算平均值、标准差(s)和变异系数(CV),结果见表 1。

2.2 两种方法检测结果一致性分析 同时用Clauss法和PT-der法检测病人血浆Fg浓度,以Clauss法为标准,将结果分为低值(Fg<2.0g/L)、中值(Fg2.0~4.0g/L)、高值(Fg>4.0g/L)三组,PT-der法检测结果与Clauss法结果进行配对t检验和相关回归分析,Fg 含量在低值(Fg<2.0g/L)、 中值(Fg2.0~4.0g/L)、高值(Fg>4.0g/L)时,Clauss法和 PT-der法测定 Fg 的结果都有显著差异(P<0.01),显示出PT-der法测定值明显高于Clauss法测定值。结果见表2。

表1 Clauss法和PT-der法测定FIB的批内和天间精密度比较(n=20)

表2 Clauss法和PT-der法测定病人血浆纤维蛋白原含量结果比较及相关分析

3 讨论

Fg含量检测原理和方法包括蛋白质比色测定、浊度或光散射法测定、盐析测定、免疫法测定抗原等[1]。Clauss法和PT-de法测定的Fg均属于浊度或光散射法的一种,也是目前全自动血凝仪较普及的方法。Clauss法操作简单、实用精确、结果可靠,被WHO和CLSI推荐为参考方法,但试剂成本较高。其原理是在被检血浆中加入凝血酶,血浆即凝固,从国际标准品Fg参比血浆测定的标准曲线中获得被检血浆的Fg实际含量。凝血酶原导出法(PT-der法)是根据全自动血凝仪在测定凝血酶原时间(PT)的过程中,依据PT凝固曲线中光散射强度的改变程度,推导出Fg的浓度,因此不需要消耗试剂和消耗品,尽管该方法节约试剂、操作简单、快速,但只能对纤维蛋白原含量作出大致估计,当Fg含量明显异常时,不能准确判断[2]。

精密度评价是方法学评价的基础,本次研究用两种方法对厂家质控品进行批内精密度、天间精密度进行分析,结果显示Clauss法的批号528147的批内CV值为2.46%、天间CV值为6.86%,批号548239B的批内CV值为3.40%、天间CV值为6.25%;PT-der法批号528147的批内CV值为3.98%、天间CV值 7.14%,批号 548239B的批内CV值为5.00%、天间CV值7.51%,均在仪器允许的范围 (批内CV值<5%、总的CV值<10%)。CA-1500血凝仪PT-der法测定Fg结果精密度比Clauss法低,但在仪器的允许范围之内。

本实验室使用两种方法对255例不同浓度的临床样本进行检测,并对检测结果进行统计分析,Clauss法和PT-der法两种方法测定三组Fg结果有显著统计学差异 (P<0.01)。在三组临床样本中,PT-der法测定Fg结果比Clauss法高,Fg浓度在中值(Fg2.0~4.0g/L)Clauss法与PT-der法测定结果相关系数(r值为0.8717)较高,在高值和低值的相关系数(r值分别为0.7943,0.6648)均较低,另外从本次试验两种方法测定的两个批号质控品的数据Clauss法测定548239B和528147的均值分别为2.06g/L和2.03g/L而PT-der法测定548239B和528147的均值分别为3.4g/L和2.76g/L,差异明显。由于测定方法的原理不同,PT-der法测定结果受到很大的影响。目前,国内外对PT-der法测定Fg方法可靠性研究主要有两种观点:一种是在Fg低值时与Clauss法结果无显著差异,在高值时有显著差异,PT-der法结果比Clauss法高[3-5],另一种观点认为PT-der法结果与 Clauss法结果差异显著,PT-der法结果比Clauss法高,建议不使用PT-der法[6-8]。出现这种情况的原因可能与仪器、病人和试剂等因素有关[9,10]。综上,本实验室CA-1500血凝仪PT-der法不适合代替Clauss法测定血浆纤维蛋白原含量进行临床筛查、诊断和治疗。随着自动化血凝仪的普及以及测定方法的规范化和标准化,保证检验结果的准确性和可靠性,实现实验室数据互认,综合其它作者报道的PT-der法测定Fg的评价,使用Clauss法淘汰PT-der法测的组成(包括病人的年龄)定 Fg是一种必然趋势。在没有条件用Clauss法而用PT-der法的测定血浆Fg浓度的实验室应建立本实验室的生物参考区间,并对PT-der法测定结果与Clauss法测定结果进行比对,了解其检测性能,最大可能保证检验质量。

[1]熊立凡,刘成玉.临床检验基础[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2007:75-76.

[2]丛玉隆.血栓与止血试验诊断的现状及发展[J].中华检验医学杂志,2001,24(1):5-7.

[3]张健媛,田明照,黄松音,等.全自动血凝仪二种纤维蛋白原测定方法的评价[J].中国医药导刊,2003,5(4):257-258.

[4]曾文坦,周宇丹,肖永辉.PT衍生的纤维蛋白浓度测定及临床应用[J].实验与检验医学,2011,29(3):265-266.

[5]徐承来,周彦,刘小林.ELITE PRO血凝仪2种测定纤维蛋白原方法的比较[J].重庆医科大学学报,2012,37(9):814-816.

[6]周林华,冯倩,邓德耀,等.凝血酶原时间衍算法测定纤维蛋白原的差异性分析[J].军医进修学院学报,2011,32(2):149-150.

[7]戴庆忠,孙昌君,秦素娟.某全自动血凝仪对两种纤维蛋白原测定方法评价[J].国际检验医学杂志,2012,33(2):211-212.

[8]李黎.两种常用方法测定血浆纤维蛋白原的临床评价[J].检验医学与临床,2013,10(1):64-65.

[9]Lawrie AS,McDonald SJ,Purdy G,et al.Prothrombin time derived fibrinogen determinationon Sysmex CA-6000[J].J CLin Pathol,1998,51(6):462-466.

[10]袁慧茹.两种纤维蛋白原测定方法比较 [J].中国误诊学杂志,2005,5(13):2472-2473.

猜你喜欢
血凝法测定精密度
奥美拉唑、血凝酶联合生长抑素治疗上消化道出血的效果
Phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate dependent Rac exchange factor 1 is a diagnostic and prognostic biomarker for hepatocellular carcinoma
ICP-OES法测定钢和铁中微量元素
副波长对免疫比浊法检测尿微量清蛋白精密度的影响
HPLC法测定桂皮中的cinnamtannin D-1和cinnamtannin B-1
UPLC法测定萹蓄中3种成分
HPLC法测定炎热清片中4种成分
全自动血凝分析仪采用2种测定血浆纤维蛋白原方法的评价
尖吻腹蛇血凝酶在鼻中隔偏曲矫正术中止血疗效及安全性观察
海水U、Th长寿命核素的高精密度MC-ICP-MS测定方法