徐晶
(南昌市血站输血研究室,江西 南昌330025)
我站输血研究室血型血清学实验室自2003-2013年来参加上海血液中心主办的全国血型血清学室间质量评价活动以来,通过11年的不断学习和实验经验的积累,掌握了一定的血型鉴定技能,对特殊血型和抗体鉴定能够在最短的时间内设计出行之有效的实验思路,达到预期的实验目的。通过外部质量评价活动,大大验证了实验室血型血清学检验技术水平和理论分析判断能力。
1.1 检测标本 每次质控样品共9份,3份受血者红细胞悬液和3份对应的血清,3份献血者红细胞悬液,常温航空运输。
1.2 试剂 抗-A、抗-B、 抗-AB(单克隆抗体)、抗-A1、抗H等定型试剂均为上海血液生物医药有限公司提供。Rh(D)血型定型试剂 抗-D(IgM/IgG)、抗-D(IgG)、抗-D(IgM)均为上海血液生物医药有限责任公司提供。抗人球蛋白试剂(单抗、多抗)、抗体筛选细胞和谱细胞、ABO反定型标准红细胞均为上海血液生物医药有限责任公司提供。凝聚胺试剂盒为安徽晨光天一生物技术研究所提供。
1.3 实验方法 ABO血型和Rh(D)血型定型使用试管法,抗体筛选和交叉配血实验采用盐水、聚凝胺、间接抗人球蛋白3种介质实验方法。必要时,可用酶处理红细胞或使用卡(抗人球蛋白卡由广州血液中心输血研究所提供)。将检测样品带入日常工作中进行检测,在接收标本核对后10天内完成实验,双人核对填写实验原始记录,并在规定的时间内上报实验结果。
1.4 质控品及评价标准 上海血液中心主办的全国血型血清学室间质量评价活动是与美国AABB室间质量评价活动的判分标准一致,均为获得性给分。血型鉴定错误得150分;抗体鉴定错误得100分;交叉配血试验错误得100分。因此,成绩为0分是最好的。考评频次为每年2次。试验共分6大项23小项,包括:ABO血型鉴定、RhD血型鉴定、不规则抗体筛选、抗体鉴定、直接抗人球蛋白试验以及交叉配血试验。
23个检测项目均为定性实验,其中2008年及2010年分别有一例A亚型及A亚型B。检测结果与标准结果对比连续11年未见血型、抗体筛选及鉴定、配血实验错判现象。实验室|Z|值≤2(满意),举办方根据每次参加实验室的数量及检测情况计算出Z值,用以判断实验室的检测水平。我实验室连续11年成绩均为0分(无罚分), 见表1。
表1 2003年至2013年室间质评结果汇总
血型血清学室间质量评价是我站质量控制体系的一个重要组成部分,室间质评既是对日常工作的考核,也是一种促进[1]。通过对外部质控品的测定,对实验室在试验前、中、后全过程进行监控,发现可能影响检测质量的问题,如:样品、试剂、仪器设备、检测方法、操作过程及结果判断等。应注意:(1)建立实验室样品接收程序,对送检的样品先确认符合标本质量要求再进行实验。在11年的室间质评检测工作中,我们发现5次红细胞溶血现象,3次样品封装不严密出现的渗漏现象,经协商,由主办方更换标本后再行检测。因此,符合质量要求的标本才是获得可靠实验结果的保障[2]。(2)反定型用标准红细胞,抗体筛选细胞和谱细胞[3],有效期短,在快接近有效期时,有些弱反应往往不好判断或漏检,需用酶处理细胞后,再进行判读[4]。因此,本实验严格按照试剂管理要求,定期对试剂做质控,以杜绝抗原减弱的细胞投入使用。(3)血型血清学主要采用冰箱、水浴箱、台式离心机、显微镜等实验仪器,仪器设备相对简单,我实验室将仪器列入关键设备进行质量管理,定期检查和校准,保证其在良好的状态下工作。(4)血型血清学实验基本为手工人眼判读结果,我实验室的4名工作人员,均接受过超过3个月的血型血清学操作技能与理论的培训,且都具有临床检验技能。对实验结果的判读,特别是一些弱反应结果有一定的实验室操作经验和理论水平,不轻易忽视可疑的阳性结果。
实验应注意的问题:(1)血清标本仅够2次实验用,所以要合理设计检测思路,节省血清,特别是用于抗体鉴定的的血清,往往只够1次实验用,因此,在做到抗体筛选阳性时,就应从筛选细胞谱中判断出大致的抗体类型及相应的抗体。(2)日常鉴定ABO血型时[5,6],需正反定型结果确认一致才可判断血型,而质控品中献血者标本只有红细胞,所以鉴定血型不确切。特别有些亚型的确认,无法通过唾液等其他实验方法加以验证。(3)在实际工作中对质控品我们会采取双人双核对重复检测,对可疑标本甚至会进行反复检测,而日常工作则不会如此操作。(4)交叉配血实验结果的准确性,会直接关系到输血安全,应给予高度重视,提高专业人员的技术水平,完善仪器和试剂配备,以保证临床输血安全有效。(5)为避免人为的实验误差,应采用先进的自动化检验设备与方法来提高检测的准确性,如采用分子生物学方法和实验技术,对疑难血型开展室内质控和复核检测[7]。对实验室的错误行为进行调查并追踪改正结果,做好评估。
综上所述,积极参加血型参比实验室室间质量评价活动,有助于发现在临床输血前的检验中容易忽视的问题,使工作规范化和标准化,使临床输血更加安全、有效。
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