血浆LPA、Hcy联合检测在下肢深静脉血栓早期诊断中初步研究

李玉妹，张谨超，刘彦玲，谢春艳，多亚莉，李生君，董士民

(1.衡水市哈励逊国际和平医院 a.神经内Ⅱ科;b.重症监护室;c.发热门诊;d.检验科；e.科教科,河北 衡水053000；

2.河北医科大学第三医院 心内科)

血浆LPA、Hcy联合检测在下肢深静脉血栓早期诊断中初步研究

李玉妹1a，张谨超1b，刘彦玲1c，谢春艳1d，多亚莉1e，李生君1e，董士民2

(1.衡水市哈励逊国际和平医院 a.神经内Ⅱ科;b.重症监护室;c.发热门诊;d.检验科；e.科教科,河北 衡水053000；

2.河北医科大学第三医院 心内科)

摘要：目的探讨血浆溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)联合检测在下肢深静脉血栓(deep venous thrombosis,DVT)早期诊断的临床意义。方法根据《深静脉050051断和治疗指南》诊断标准，将30例DVT患者分为DVT组，另选60例健康者作为对照组。分别测定各组血浆LPA和Hcy水平。结果①治疗前DVT组血浆LPA和Hcy水平较健康对照组明显升高(P<0.001)；②治疗后DVT组血浆LPA和Hcy水平较健康对照组无显著性差异(P>0.05)。结论LPA和Hcy是深静脉血栓的敏感指标，两者结合对深静脉血栓的早期诊断及预后有着重要的临床价值。

关键词：下肢深静脉血栓；溶血磷脂酸；同型半胱氨酸；早期诊断

(ChinJLabDiagn,2015,19:2045)

下肢深静脉血栓(deep venous thrombosis,DVT) 在临床上是一种发生率较高的疾病，指的是由于各种原因导致的静脉管腔内形成的血凝块，其典型的症状包括局部深处触痛，下肢肿胀以及足背屈性疼痛等[1，2]。DVT发展最严重的临床特征即是肺栓塞(pulmonary embolism,PE)，死亡率高达9-50%[3]。目前，针对DVT重在预防，其早期诊断尤为重要，然而，由于DVT在形成的早期没有十分明显的临床症状，且仅有10-17%的DVT患者发生时伴有明显的特征，所以经常会导致DVT被忽略甚至发生漏诊[4，5]。因此，探寻敏感特异性的生物标记物，以实现下肢深静脉血栓早期诊断及预后监测有着重要的临床价值。

1资料与方法

1.1研究对象研究对象为2012年1月-2013年6月于我院进行治疗的DVT患者，患者因不同程度的患肢疼痛及肿胀进行就诊。所有的入选患者均符合2012年中华医学会制定的《深静脉血栓形成的诊断和治疗指南》中所述的诊断标准，DVT入组标准：①经静脉造影显示为深静脉内管腔阻塞或充盈缺损患者；②经彩色多普勒检查提示为DVT患者；③患者入院前无手术外伤史，所有病例资料完整，且获得随访；④既往未曾发生过下肢静脉血栓和肺栓塞。患者排除标准：①排除具有血栓家族史的患者；②排除近期服用或正在服用多种维生素及使用抗凝药物患者。根据以上原则，共收集下DVT患者30例(DVT组)，年龄为45-70岁，平均60.3岁。对照组为我院健康体检者60例(对照组)，年龄为40-75岁，平均58.4岁。两组均排除既往有明确诊断的心绞痛、心肌梗死、心力衰竭、脑血管事件、卒中、血栓栓塞、肺心病以及糖尿病合并严重脏器功能损害的患者。

1.2样本采集与保存患者与健康对照组均清晨采集空腹静脉血5 ml，其中4 ml加入肝素锂抗凝管，混匀，3 000转离心10 min分离血浆并测定相应LPA水平。1 ml加入K2EDTA抗凝管，混匀，3 000 转5 min离血浆测定相应Hcy水平。

1.3血浆LPA及Hcy水平检测血浆LPA的检测试剂自北京泰福仕科技开发公司购买，Hcy水平检测的试剂盒由山东博迈达公司购买，按试剂的说明书进行严格的操作。

2结果

2.1两组血浆LPA水平比较

治疗前DVT组血浆LPA水平明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.001)，而治疗后DVT组血浆LPA水平较对照组无显著性差异(P>0.05)，见表1。

表1　　治疗前后DVT组与对照组血浆LPA表达

2.2DVT组与对照组血浆Hcy水平比较

治疗前DVT组血浆Hcy水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.001)，而治疗后DVT组血浆LPA水平较对照组无显著性差异(P>0.05)，见表2。

表2　治疗前后DVT组与对照组血浆Hcy表达水平

2.3血浆LPA、Hcy检测结果的比较

治疗前DVT组与对照组比较，血浆LPA、Hcy水平均明显升高(P<0.001)，见表1，2。以血浆LPA水平高于2.5 μmol/L为LPA阳性(LPA+)，DVT组的阳性率为86.67%。以血浆Hcy水平高于12 μmol/L为Hcy阳性(Hcy+)，DVT组的阳性率为90.00%。LPA和Hcy检测结果比较见表3。在治疗前DVT组血浆LPA、Hcy两检测项目呈正相关(r=0.83，P<0.05)。

表3　治疗前DVT组血浆LPA、Hcy检测结果的比较

3讨论

临床上下肢深静脉血栓是一种多发性疾病，近年来其发病率及死亡率呈现逐渐上升的趋势。导致DVT发生的主要因素包含高龄、恶性肿瘤、手术之后长期的固定性的卧床、神经障碍、心肺功能衰竭、遗传及获得性血液疾病等[6]。但是，由于DVT在形成的早期没有十分明显的临床症状，且仅有10-17%的DVT患者发生时伴有明显的特征，所以经常会导致DVT被忽略甚至发生漏诊，这些均对于DVT患者的及时治疗起了很大的阻碍作用，导致了患者的长期病痛，对于患者的日常生活能力产生了严重的影响[4]。

目前，还没有能够彻底治愈下肢深静脉血栓的特效的治疗方法，且已证实，介入治疗与药物溶栓对于DVT后遗症无明显疗效，虽然传统的中医治疗取得了一定疗效，但是仍然缺少循证医学的进一步验证[7]。所以，对于DVT应该关注于其预防，所以对于早期的诊断显得尤为关键[8]。据报道[9]，LPA能够促进血管粥样硬化的发生、发展，并对于血小板聚集以及血管痉挛有极大的促进作用，近年来，LPA和静脉血栓栓塞症之间的关系越来越受到大家的关注。LPA是在磷脂合成时由细胞膜产生的小分子甘油磷脂，它为一种细胞膜的脂类衍生物，LPA经过和G蛋白耦联受体相互作用对靶细胞的生物功能产生影响，进而引起多种生物学效应的发生[10]。凝血酶激活的血小板是血液之中的LPA的主要来源，LPA发挥作用主要经过对血小板上的E始受体的激活而改变血小板的形态，聚集和活化血小板，而血小板的聚集和活化的又能够产生新的LPA[11]。这种经过放大的正反馈表明，在血栓的形成起始过程中LPA发挥着很关键的调节控制作用。国内张凯等[12]的研究表明，DVT患者的LPA浓度显著高于健康人，该结果提示LPA在血栓形成的早期就已经被释放，它标志着血小板的活化及凝血作用的开始。本研究结果显示，治疗前DVT组的血浆LPA浓度明显的高于健康对照组，随着治疗的进行其水平逐渐趋于正常值，该结果提示LPA是下肢深静脉血栓形成早期的独立风险预测因素，它的水平与DVT的发展程度密切相关，对于DVT的早期诊断、预防以及疗效的监测具有重要作用，适合作为DVT的生物标记物。

近年来研究表明，Hcy的水平的上升能够对血管内屏细胞功能产生直接或间接的损害，导致胆固醇以及脂蛋白在血管壁产生沉积，并能够灭活血管的舒张因子NO，进而发挥动脉粥样硬化以及血栓形成的促进作用[13]。因此，Hcy代谢异常导致的高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化及血栓形成的一个危险因素。最近，有研究发现，高同型半胱氨酸血症与静脉血栓栓塞症存在关联[14]。国内一项流行病学研究表明，大约25%的静脉血栓栓塞患者存在不同程度的同型半胱氨酸升高，而1/3的静脉血栓栓塞患者存在高同型半胱氨酸血症[15]。高莹，吕敏等[16]的研究显示，随着Hcy的水平增高，发生深静脉血栓的危险性逐渐增大。深静脉血栓的发生率的增加直接导致肺栓塞的发病率增高。Pickett CA等[17]的研究证实，高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化及血栓疾病的独立危险因素。

我们的研究结果显示，治疗前DVT组血浆LPA和Hcy水平显著高于正常对照组(P<0.001)，其中LPA阳性率为86.67%，而Hcy的阳性率为90.00%，且二者呈正相关(r=0.83，P<0.05)，该结果提示LPA和Hcy浓度可能与血栓的形成的早期事件密切相关，标志着体内血小板的激活状态。在通过治疗之后，病情逐渐缓解时，DVT组的LPA和Hcy浓度逐渐下降并逐渐接近正常值，表明LPA和Hcy可以作为DVT治疗的生物标记物。即当DVT患者出现血浆LPA或Hcy浓度上升时，则提示病情可能发生了进展，需尽快实施积极的治疗方案。此外，对于可能发生DVT的高危人群的进行定期检查，若发现LPA或Hcy浓度出现上升的现象，立刻进行对症治疗，在临床上就会有足够的治疗时间，根据血管性检查的结果进行及时有效的干预，就可以大大地降低深静脉栓塞事件的发生，对于DVT的早期诊断以及预后监测有着重要的作用。

总之， LPA和Hcy在DVT患者的血浆中显著增高，经治疗后二者水平趋于正常，提示血浆LPA和Hcy是DVT形成早期的敏感指标，两者结合对深静脉血栓的早期诊断及预后有着重要的临床价值。

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Combined Detection of Serum Lysophosphatidic Acid and Homocysteine in the Early Diagnosis of Deep Venous ThrombosisLIYu-mei，ZHANGJin-chao,LIUYan-ling,etal.(HarrisonInternationalPeaceHospital,Hengshui053000,China)

Abstract:ObjectiveTo investigate the expression of serum levels of lysophosphatidic acid (LPA) and homocysteine (Hcy) in the early diagnosis of patients with deep venous thrombosis (DVT).MethodsAccording to the Standard of “deep vein thrombosis diagnosis and treatment guidelines”，30 patients with DVT were grouped as DVT group.Additionally,60 healthy individuals were included as control group.The serum level of LPA and Hcy were measured,respectively.Results① Before treatment,the serum level of LPA and Hcy were significantly higher in DVT patients than that of the control group (P<0.001);② After treatment,the serum level of LPA and Hcy in DVT patients showed no significant difference than that of the control group(P>0.05).ConclusionThe serum level of LPA and Hcy in DVT patients was significantly increased,suggesting that Combined Detection may have potential clinical value for early diagnosis and prognosis of DVT.

Key words:Deep Venous Thrombosis;Lysophosphatidic Acid;Homocysteine;Early Diagnosis

(收稿日期：2014-10-09)

作者简介：李玉妹(1977-)，女，主管检验师，研究方向：神经内科。

文献标识码：A

中图分类号：R543.6

文章编号：1007-4287(2015)12-2045-04

基金项目：衡水市科学技术与研究发展计划(项目编号：13022A)