乳宁口服液治疗乳腺增生大鼠的药效学研究

王林丽，杨巧虹，李卓恒，卢来春，吕金胜

（1.中国人民解放军第三军医大学大坪医院药学部，重庆 400042； 2.重庆医疗器械质量检验中心，重庆 401147）

乳宁口服液治疗乳腺增生大鼠的药效学研究

王林丽1，杨巧虹2，李卓恒1，卢来春1，吕金胜1

（1.中国人民解放军第三军医大学大坪医院药学部，重庆 400042； 2.重庆医疗器械质量检验中心，重庆 401147）

目的 研究乳宁口服液对大鼠乳腺增生的治疗作用。方法 建立乳腺增生大鼠模型，灌胃给药乳宁口服液，观察低、中、高剂量[0.5，2.5，5.0 mL/(kg·d)]组大鼠的行为学改变、乳房情况，以及血液中激素水平的变化。结果 低、中、高剂量乳宁口服液均能显著改善乳腺增生大鼠模型行为学异常、乳房情况，以及血液中雌二醇（E2)、孕酮（P)、催乳素（PRL)水平（P＜0.01），且呈一定的量效关系。结论 乳宁口服液对乳腺增生有一定治疗作用。

乳宁口服液；乳腺增生；大鼠模型；性激素

乳宁口服液为治疗乳腺增生症的医院复方制剂，主要由香附、川芎、夏枯草、王不留行、麦芽、白芍、当归、丹参 、延胡索、橘核、柴胡、瓜蒌、甘草等药材组方[1]。本研究中考察了乳宁口服液对乳腺增生模型大鼠的治疗作用，旨在为临床用药提供进一步的药理学试验依据。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 仪器、试药与动物

DU650型紫外分光光度计。乳宁口服液(第三军医大学大坪医院自制，批号为101206)。SD大鼠，体重（200±20）g，由第三军医大学大坪医院实验动物中心提供；动物受试环境为第三军医大学大坪医院实验动物中心，实验设施使用合格证号为 SYXK-(军)2010-032，动物质量合格证号为SCXK-(军)2010-008；饲料、饮水和垫料均符合实验动物质量控制标准。

1.2 方法

乳腺增生大鼠模型的建立[2-4]：取健康雌性未孕SD大鼠，后腿肌肉交替注射苯甲酸雌二醇 0.5 mg/kg，每日1次，连续25 d后改用黄体酮4 mg/kg肌肉注射，每日1次，连续5 d，建立乳腺增生病模型，造模期间每天观察各组大鼠乳头变化情况。造模第30天肉眼观察可见模型组大鼠乳头较空白组大鼠明显增大，同时随机处死模型组大鼠10只，取第2对乳头制作病理切片。结果高倍镜下可见腺泡和导管上皮明显增生，乳腺腺泡直径增大，乳腺腺泡数量增加，乳腺小叶平均直径增大，乳腺小叶数增加，证明造模成功。于造模第21天开始给予相应药物。

分组与给药：取造模成功雌性大鼠60只，随机分为5组，每组12只，即乳宁口服液高、中、低剂量组（R1，R2，R3组），给药剂量分别为0.5，2.5，5.0 mL/（kg·d），相当于临床日用量的1，5，10倍；三苯氧胺阳性对照组（S组），给药剂量为2.5 mL/(kg·d)；模型对照组（M组）。另取健康雌性未孕大鼠12只，作为空白对照组（K组）。各给药组采取等容不等浓度法灌胃给药，M组和K组给予等量生理盐水，每日给药1次，连续给药30 d后处死动物。

取材处理[5-7]：造模结束后，大鼠禁食24 h，称重、脱毛，用游标卡尺测量大鼠左侧腋窝下第2对乳头的直径，随后摘取眼球并取血5～6 mL，放置15 min后，用低温离心机离心15 min，分离出血清，置冰箱内保存，用放射免疫法测定生殖激素3项。再用脱颈椎法处死所有大鼠，用打孔器取下左侧第二对完整乳房，直径约8 mm，测量乳头的直径、高度。

2 结果

2.1 对大鼠行为学的影响

K组大鼠皮毛光泽，形态活泼，反应敏捷，食量、粪便均正常，体重增长正常，无死亡。M组大鼠竖毛，皮毛欠光泽，精神不振或烦躁不安、易激惹，反应迟钝，食量减少或亢进，粪便时稀软，身体严重消瘦或体重增长迅速，进食、排便、活动减少或增加，死亡2只。乳宁口服液给药组（R1，R2，R3组）及阳性对照组（S组）大鼠皮毛尚可，大鼠体形均接近K组，饮食较正常，粪便正常，无动物死亡。

2.2 对大鼠乳房情况的影响

结果见表1。造模后，M组大鼠的乳头高度及直径明显增大，各用药组大鼠的乳头高度同M组相比有不同程度的变化，乳宁口服液给药组（R1，R2，R3组）乳头高度明显降低(P＜0.01)，乳头直径均缩小(P＜0.01)，3个剂量组呈一定的量效关系。

表1 乳宁口服液对乳腺增生大鼠乳头高度及直径的影响（±s，mm，n=12）

表1 乳宁口服液对乳腺增生大鼠乳头高度及直径的影响（±s，mm，n=12）

注:与M组比较， P＜0.01。下表同。

组别K组M组R1组R2组R3组S组剂量[mL/(kg·d)] 0.25 5.0 2.5 0.5 2.5乳头高度0.79±0.03 1.24±0.02 0.86±0.03 0.99±0.05 1.12±0.04 0.95±0.03乳头直径1.17±0.05 1.91±0.08 1.45±0.04 1.52±0.09 1.59±0.05 1.50±0.03

2.3 对大鼠血清性激素水平的影响

结果见表2。造模后大鼠血清雌二醇（E2）、催乳素（PRL）含量显著高于K组，孕酮（P）则显著低于K组，高、中、低剂量乳宁口服液均能显著降低大鼠的E2及PRL水平，升高孕激素水平(P＜0.01)，并呈一定的量效关系。

表2 乳宁口服液对大鼠血清性激素水平的影响±s，n=12）

表2 乳宁口服液对大鼠血清性激素水平的影响±s，n=12）

组别K组M组R1组R2组R3组S组剂量[mL/(kg·d)] 0.25 5.0 2.5 0.5 2.5 E2（pg/mL）67.80±2.55 106.01±2.90 78.34±2.13 88.68±1.99 96.07±1.16 77.01±1.72 P（ng/mL）38.32±1.07 26.06±0.85 35.75±1.14 31.06±0.77 29.22±1.17 34.35±1.41 PRL（ng/mL）12.59±0.96 21.26±0.86 14.75±0.84 17.66±0.69 19.40±0.59 15.55±0.73

3 讨论

乳腺增生症是女性常见的乳房疾病，2%～4%的患者可发生囊性增生而引起癌变[7-8]，临床多用雄性激素或雌激素拮抗剂治疗，疗效虽好，但不良反应较大。对于乳腺增生症，中医药以疏肝解郁、活血通络、补肾壮阳、消炎散结为治疗原则[9]。

乳宁口服液处方为医院临床长期使用的治疗乳腺增生的中医验方。本研究中通过建立乳腺增生大鼠模型，观察乳宁口服液对模型大鼠的行为学状况、乳房情况（包括乳头的高度和直径），以及血清E2，P，PRL水平的影响。研究结果显示，低、中、高剂量乳宁口服液均能显著改善模型大鼠的行为学异常、乳房情况以及血清E2，P，PRL水平的异常。这表明了乳宁口服液对乳腺增生模型大鼠具有显著的治疗作用，而是否还能改善其他乳腺增生相关指标的异常，有待进一步研究。

[1]陈彦清，康启仁，崔金楠，等.乳宁口服液的制备及质量控制[J].中华医药荟萃杂志，2003，2(4)：30-31.

[2]陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社，1993：541-649.

[3]黄月玲，文端成，韦永芳，等.大鼠乳腺增生模型的建立[J].广东医学，2002，22(4)：362-363.

[4]陈志春，段晓波，胡芝华.大鼠乳腺增生实验方法及药物作用观察[J].中国药理学通报，1991，7(2)：156.

[5]朱萱萱，张忠华，邱召娟.桂枝茯苓胶囊治疗乳腺增生大鼠的实验研究[J].现代中西医结合杂志，2006，15(5)：571-576.

[6]林成仁，马雪瑛，王 敏，等.青香丸(浓缩丸)对家兔乳腺增生的影响及机理研究[J].中国实验方剂学杂志，2003，9(5)：35-38.

[7]丁喜贵.自拟安癖汤合玉乳散治疗乳腺增生223例临床观察[J].山西中医，1993，9(5)：19.

[8]倪依东，梁海清，田少鹏，等.乳核散结片对乳腺增生大鼠治疗作用的研究[J].中药药理与临床，2004，20(4)：35-36.

[9]林至君.乳腺增生症的辨治思路[J].中医杂志，1995，36(8)：494-495.

Pharmacodynamic Study of Runing Oral Liquid in Treating Hyperplasia of Mammary Glands in Rats

Wang Linli1,Yang Qiaohong2,Li Zhuoheng1,Lu Laichun1,Lyu Jinsheng1
(1.Department of Pharmacy,Daping Hospital,Third Military Medical University,Chongqing,China 400042; 2.Chongqing Quality Testing and Inspection Center for Medical Devices,Chongqing,China 401147)

Objective To study the effect of Runing Oral Liquid in treating hyperplasia of mammary glands in rats.M ethods The rat model of hyperplasia of mammary glands s was established.The behavioral changes,mammary tissue and levels of serum hormones in rats were observed after administration of Runing Oral Liquid[0.5,2.5,5.0 mL/(kg·d)]by gavage.Results The low-,medium-, high-dose of Runing Oral Liquid could remarkably improve the behavioral abnormality,breast status and levels of serum estradiol(E2), progesterone(P)and prolactin(PRL)in rats with hyperplasia of mammary glands(P＜0.01).Conclusion Runing Oral Liquid has certain therapeutic effect on hyperplasia of mammary glands.

Runing Oral Liquid；hyperplasia of mammary glands;rat model;sex hormone

王林丽，女，大学本科，副主任药师，研究方向为中药制剂的研究与开发，（电子信箱）wll20126＠163.com；杨巧虹，女，大学本科，主要从事医疗器械质量检验工作，本文通讯作者，（电子信箱）87831702＠q.com。

2014-05-14；

2014-09-10)

R285.5；R286

A

1006-4931(2015)13-0016-02