枸橼酸钾缓释片的制备及其释放度的方法研究

郑 娣，刘宇婧，张自强，钱伟刚，王 柏*中国药科大学药学院，南京 98；南京泽恒医药技术开发有限公司，南京 0046；上海朝晖药业有限公司，上海 0908

枸橼酸钾缓释片的制备及其释放度的方法研究

郑 娣1，刘宇婧2，张自强2，钱伟刚3，王 柏1*
1中国药科大学药学院，南京 211198；2南京泽恒医药技术开发有限公司，南京 210046；3上海朝晖药业有限公司，上海 201908

目的：制备枸橼酸钾缓释片并对其体外释放度进行研究。方法：采用正交设计法对枸橼酸钾缓释片处方进行优化，并采用相似因子对其体外释放行为进行评价；以高效液相色谱法检测枸橼酸钾缓释片的释放度。结果：正交设计结果表明，硬脂酸对枸橼酸钾的释放影响较为明显，通过Higuchi方程及Peppas方程拟合，确定枸橼酸钾缓释片的释药机制为扩散与溶蚀双重作用。结论：应用硬脂酸为骨架材料即可制备具有理想释药行为的枸橼酸钾缓释片，其释放度符合《中华人民共和国药典》2010年版标准且与参比缓释片（UROCIT-K）相似。

枸橼酸钾；缓释片；HPLC法；累积释放度

枸橼酸钾（potassium citrate）具有补充钾离子和碱化尿液的作用，临床用于防治各种原因引起的低血钾症及防治尿结石复发。常规的枸橼酸钾制剂难以确保尿液在一天持续碱化，故将其制成缓释制剂，达到全天抑制尿液中草酸钙结晶形成的良好疗效[1]。

美国枸橼酸钾蜡质缓释片（UROCIT-K）在欧美及港台地区都有销售，疗效显著，能有效地提高低枸橼酸尿症患者的尿中枸橼酸盐和尿钾水平，降低尿钙水平，提高尿液pH值。但目前枸橼酸钾剂量大，其缓释片可重达2 g，不利于服用。

本文通过制备枸橼酸钾缓释片以求达到持续释药，减少服药量，提高患者顺应性目的。通过3因素3水平的正交设计法对枸橼酸钾缓释片的处方进行优化，同时建立了HPLC法对其释放度进行分析；根据Higuchi方程及Peppas方程拟合，研制的枸橼酸钾缓释片的释放可能为扩散与溶蚀双重作用。

1 仪器与试药

Agilent 1100系列高效液相色谱仪 （美国Agi-lent公司）；DP-30A单冲式压片机 （北京国药龙立科技有限公司）；RC-806智能溶出仪 （天津市天大天发科技有限公司）；pH计（Sartorius PB-10）。

枸橼酸钾缓释片（由制剂室制备，批号：20140901）；枸橼酸钾（湖南华日制药有限公司）；枸橼酸钾缓释片（规格1080 mg，商品名UROCIT-K誖，美国Mission Pharmacal，批号：XP01111）；硬脂酸（湖州展望药业有限公司）；聚乙二醇4000（广东汕头市西陇化工厂）；乳糖（德国美剂乐公司）；硬脂酸镁（湖州展望药业有限公司）；所用试剂为分析纯；水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 枸橼酸钾缓释片的制备

将枸橼酸钾、硬脂酸、聚乙二醇、乳糖分别粉碎，过80目筛，按处方量混匀，以5%聚维酮K30水溶液为粘合剂，湿法制粒，过16目筛，制粒，50℃烘燥2 h，过16目筛，整粒，加入处方量硬脂酸镁，混合，压片，片重约为1290 mg。压力控制在8～10 kg。

2.2 正交设计

通过预实验，初步确定以硬脂酸为枸橼酸钾缓释片的缓释材料[1]，聚乙二醇和乳糖为致孔剂。分别以硬脂酸（A）、聚乙二醇（B）和乳糖（C）为3因素，考察各自用量对枸橼酸钾的释放度的影响。

采用综合评分法[2]，即测定缓释片在0．5、1、3 h的累积释放量（Q），分别以35%～55%、50%～70%、80%为标准进行评分，以Q0．5h和Q1h越接近中间值越佳，公式：[（Q0．5h-45%）2+（Q1h-60%）2]1/2此反映了0．5 h、1 h时释放度的偏差，此偏差值越小越佳；3 h时应释放80%以上，Q3h值越大越佳。故以Q为基础，设计综合评分Y，公式：[Y=Q3h-[（Q0．5h-45%）2+（Q1h-60%）2]1/2]，对以上3个因素进行考察，每因素分设3水平，以正交表L9（34）安排试验，以体外释放度为指标，分别对结果进行分析，试验因素水平及结果见表1。从初试结果看，因素A的极差最大，表明枸橼酸钾缓释片的释放受硬脂酸用量影响较大，而受致孔剂聚乙二醇（B）和乳糖用量（C）的影响较小。根据以上结果确定A2B1C2为最优处方。

表1 正交试验设计及结果

2.3 高效液相色谱分析方法

2.3.1 色谱条件 采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱：Sepax-HP C18（4．6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0．5%NH4H2PO4水溶液（用磷酸调节pH至2．5）95∶5；流速：1．0 mL·min-1；检测波长：210 nm；柱温：25℃；进样量：20 μL。

2.3.2 专属性考察 取空白溶剂、枸橼酸钾缓释片空白辅料、对照品溶液及缓释片溶液，分别按上述方法制备成相应的供试品溶液，依“2．3．1”色谱条件检测，结果表明，空白溶剂和空白辅料对枸橼酸钾的检测无干扰，本方法的专属性良好。见图1。

图1 HPLC色谱图

2.3.3 线性关系考察 取枸橼酸钾对照品适量，精密称定，用水溶解并稀释制成每毫升中约含0．21、0．42、0．64、0．85、1．06、1．27 mg系列浓度的溶液。精密量取上述溶液各20 μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。结果表明，枸橼酸钾浓度在0．21～1．27 mg· mL-1范围内与吸收度呈良好线性关系，其回归方程为A=801．4555c+1．9867，r2=0．9998（n=6）。

2.3.4 重复性试验 取本品，按照含量测定分析方法配制6份供试品溶液，分别进样测定含量，进行重复性试验。试验结果：均值为100．6%；RSD为0．65%，小于2．0%。表明该方法的重复性较好。

2.3.5 加样回收率试验 按处方比例制备空白辅料混合物，分别加入标示量80%、100%、120%的枸橼酸钾，混合均匀，按照含量测定方法配制供试品溶液，精密量取20 μL进样，记录图谱，按照外标法计算得枸橼酸钾回收率为100．2%，RSD=0．74%（n=9）。

2.4 释放度的研究

按《中国药典》2010年版二部附录XC第二法，取6片枸橼酸钾缓释片，以蒸馏水900 mL为溶出介质，温度为37℃±0．5℃，转速50 r·min-1，在0．5、1、3 h时分别取溶液2 mL，滤过，并及时补液2 mL。精密量取续滤液20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，计算每片在各个时间点的累积释放量[3]。

2.4.1 释放介质对枸橼酸钾释放的影响 取枸橼酸钾缓释片（批号：20140901）6片，照《中国药典》2010年版二部附录X C第二法，分别以水、0．1 mol· L-1盐酸，pH 4．5、pH 6．8的磷酸缓冲液为释放介质，溶出体积为900 mL，转速为50 r·min-1，依法操作，分别于0．5、1、3 h取样，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取对照品适量，精密称定，以水溶解并定量稀释制成每毫升中约含枸橼酸钾1 mg的溶液，作为对照品溶液。依“2．3．1”色谱条件检测，并计算各个时间点的累积释放量，绘制释放曲线，见图2A。

由结果看出，以水和pH 6．8磷酸缓冲液为溶出介质时，枸橼酸钾的释放曲线无明显差异，0．5 h释放达到40%。pH 4．5磷酸缓冲液和0．1 mol·L-1盐酸为溶出介质时，释放较缓慢，3 h释放未达到85%。同时参考USP的溶出条件，确定以水为溶出介质。

2.4.2 转速对枸橼酸钾释放的影响 照《中国药典》2010年版二部附录X C第二法，以水为释放介质，溶出体积为900 mL，温度37℃±5℃，分别考察转速为50、75、100 r·min-1时枸橼酸钾的释放情况，见图2B。

图2 溶出介质（A）和转速（B）对释放度的影响

由结果看出，转速为50 r·min-1时，满足枸橼酸钾对释放度的限度要求，确定转速为50 r·min-1。

2.5 f2因子的评价

取市售UROCIT-K和自制枸橼酸钾缓释片（批号20140901），照《中国药典》2010年版二部附录X C第二法，以900 mL水为溶出介质，温度37℃±0．5℃，转速50 r·min-1，依法操作，分别于0．5、1、3 h取样，滤过，精密量取续滤液20 μL进样，计算每片在各个时间点的累积释放量，并用相似因子法对溶出试验数据进行统计分析，释放曲线见图3。

图3 自制与进口缓释片释放度比较

相似因子法计算的基本假设是试验制剂与对照制剂的累积溶出度的差的平方和Q最小。相似因子f2=50×log[（1+Q/n）-0．5×100]，如果50≤f2≤100，则表示两制剂的溶出度相似。

本试验中f2=76，可以判断，自制枸橼酸缓释片与国外市售片UROCIT-K释放行为完全相似。

2.6 释药机制

枸橼酸钾在片剂中的释药机制可能存在药物的扩散和骨架溶蚀的共同作用。

取按处方A2B1C2制备的枸橼酸钾缓释片，照释放度方法测定，分别于0．25、0．5、1、1．5、2、2．5、3 h时取样，应用零级、一级、Higuchi方程及Peppas方程分别对Q和时间（t）进行拟合[9]，得到线性方程分别为：

Peppas方程中的n是表示释放机制的特征参数，参数与制剂骨架的形状有关，对于圆柱形制剂，当n＜0．45时，药物的释放机制为Fick扩散：当n＞0．89时，为骨架溶蚀机制；当0．45＜n＜0．89时，为非Fick扩散（即药物扩散和骨架溶蚀协同作用）。从释放拟合结果看，本品n=0．5182，枸橼酸钾的释放可能为扩散与溶蚀的共同作用[5]。

3 讨 论

对枸橼酸钾缓释片的释放介质以及转速进行研究，最终以水为释放介质，转速为50 r·min-1。

枸橼酸钾为小分子水溶性药物，其制成缓释制剂要比脂溶性药物更困难。枸橼酸钾缓释片中药物释放机制可能由药物扩散和骨架溶蚀两种途径进行。硬脂酸为水不溶性骨架，药物释放是通过骨架中许多弯弯曲曲的孔道扩散进行的，同时骨架本身也可能慢慢溶蚀，从而释放药物，达到缓释作用。

[1]闫 明，邹梅娟，齐 翔，等．极易溶药物枸橼酸钾缓释片的研制[J]．中国医药导报，2011，8（1）：66-8．

[2]向军涛，蒋琳兰．硝苯地平缓释片的制备及其体外释放度考察[J]．中国药房，2007，18（7）：526-7．

[3] 国家药典委员会．中华人民共和国药典 [S]．二部．北京：化学工业出版社，2010：1014．

[4]陈龙浩，邹江冰，孟 静，等．枸橼酸钾缓释片的制备[J]．广东药学院学报，2010，26（5）：449-51

[5]Veiga F,Salsa T,Pina ME．Oral controlled release dosage forms．II．Glassy polymers in hydrophilic matri-ces[J]．Drug Dev Ind Pharm,1998,24(1):1-9．

Preparation and Release of Potassium Citrate Sustained-Release Tablets

ZHENG Di1,LIU Yu-jing2,ZHANG Zi-qiang2,QIAN Wei-gang3,WANG Bo1
1School of Pharmacy,China Pharmaceutical University,Nanjing 211198;2Nanjing Zeheng Pharmaceutical Technology Co.,Ltd.,Nanjing 210046;3Shanghai Zhaohui Pharmaceutical Co.,Ltd.,Shanghai 201908

Objective:To prepare the potassium citrate sustained-release tablets and to investigate the release profile in vitro of the sustained-release tablets．Methods:HPLC was used as the analytical method,an orthogonal design method was used to optimize the formulation and a similarity factor method was used to evaluate the in vitro release behavior．Results:Stearic acid affected the release more obviously．Determined by Higuchi equation and Peppas equation fitting,the release of potassium citrate sustained-release tablets included dual mechanisms of diffusion and erosion．Conclusion:Applying stearic acid as the backbone,potassium citrate extended release tablets have the desired release behavior,in line with the release standard of"Chinese Pharmacopoeia"2010 version,and is similar to the reference sustained-release tablets(UROCIT-K)．

Potassium Citrate;Sustained-release tablet;HPLC;Release profile

R943

A

1673-7806（2015）03-256-03

郑娣，女，硕士 E-mail:zhengdi_cpu@163.com

*通讯作者王柏，男，硕士生导师，副教授 E-mail:bwangcpu@hotmail.com

2015-03-12

2015-05-08