Graves病患者Th1/Th2细胞因子的变化及临床意义

黄敏　张红梅　张静　段微

Graves病患者Th1/Th2细胞因子的变化及临床意义

黄敏张红梅张静段微

【摘要】目的测定Graves病患者干扰素γ( IFN-γ)、白细胞介素-2( IL-2)、IL-4和IL-10的水平，探讨Th1/Th2细胞平衡在Graves病发病中的作用。方法对照组、Graves病组各80例，共160例。采用化学发光免疫法测定甲状腺功能。采用酶联免疫吸附法检测血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平。结果Graves病组血清IL-4和IL-10水平分别为( 22．64±10．25) ng/ml和( 26．51±11．08) ng/ml，显著高于对照组( P＜0．05) ; Graves病组血清IFN-γ水平为( 83．44±11．17) ng/ml，显著低于对照组( P＜0．05) ;但Graves病组IL-2水平为( 79．38±10．54) ng/ml，与对照组比较差异无统计学意义( P＞0．05)。Graves病组患者IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10、IL-2/IL-4和IL-2/IL-10分别为( 3．74± 0．13)、( 3．19±0．10)、( 3．44±0．15)、( 2．82±0．09)，比值均显著低于对照组( P＜0．05)。结论Graves病患者Th1/Th2免疫平衡以Th2细胞的体液免疫占优势为主，IL-4/IL-10可作为Graves病患者治疗中新型的药物靶点。

【关键词】Graves病; Th1/Th2;细胞因子

项目来源:湖北省卫生厅科研基金一般性项目(编号: JX6B88)

作者单位: 430015武汉市，湖北省新华医院内分泌科

Graves病即毒性弥漫性甲状腺肿，是一种器官特异性自身免疫紊乱性疾病，典型的临床表现主要包括高代谢症群、甲状腺肿大和眼病三个方面［1］，尽管其病因和病机尚未完全阐明，目前认为与遗传因素、环境因素及自身免疫因素有关［2］。有研究表明，Th1/Th2失衡在Graves病发病机制中起着重要作用［3］，但是Graves病中有关Th1和Th2的研究结果报道并不一致，即细胞因子在系统循环中的作用以及他们在Graves病发病机制中的作用尚存在异议。本文主要分析Graves病患者Th1型细胞因子( IFN-γ、IL-2)和Th2型细胞因子( IL-4、IL-10)的水平，探讨Th1/Th2细胞平衡在Graves病发病中的作用，为Graves病临床诊治提供参考借鉴。

1　资料与方法

1．1一般资料选择2011年3月至2013年6月我院内分泌科就诊患者，按Graves病诊断标准进行筛选［1］，并除外常见炎症及免疫性疾病后共纳入Graves病患者(均为初发未治) 80例为GD组，男34例，女46 例;平均年龄( 36±10)岁;选择同期体检健康者80例为对照组，男38例，女42例;平均年龄( 35±12)岁。2组性别比、年龄比较差异无统计学意义( P＞0．05)。

1．2方法清晨空腹取血5 ml，其中3 ml检测甲状腺功能，包括游离三碘甲状腺原氨酸( FT3)、游离甲状腺素( FT4)、促甲状腺激素( TSH)、甲状腺球蛋白抗体( TGAb)和甲状腺过氧化物酶抗体( TPOAb)，检测采用德国西门子ADVIA Centaur XP全自动化学发光免疫分析仪，试剂为西门子公司提供。2 ml离心后血清置于－80℃保存，采用酶联免疫吸附测定( ELISA)法成批检测血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平，试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司公司，按照产品说明书进行操作。

1．3统计学分析应用SPSS 11．0统计软件，计量资料以珋x±s表示，采用t检验，P＜0．05为差异有统计学意义。

2　结果

2．12组甲状腺功能水平比较GD组FT3、FT4水平较对照组显著升高( P＜0．01)，TSH水平较对照组显著降低( P＜0．01) ;且GD组患者TGAb和TPOAb水平较对照组显著升高( P＜0．05)。见表1。

表1　2组甲状腺功能水平比较　n =80，珋x±s

2．22组细胞因子水平比较GD组血清IL-4和IL-10水平显著高于对照组( P＜0．05)，IFN-γ水平显著低于对照组( P＜0．05)，但IL-2水平差异无统计学意义( P＞0．05)。见表2。

表2　2组细胞因子水平比较　n =80，ng/ml，珋x±s

2．32组Th1/Th2比较GD组患者IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10、IL-2/IL-4和IL-2/IL-10显著低于对照组( P＜0．05)。见表3。

表3　2组Th1/Th2的比较　n =80，珋x±s

3　讨论

Graves病是甲亢最常见的类型，其病因和发病机制尚未完全阐明，目前认为是在遗传易感的基础上，由于感染、精神创伤等应激因素而诱发的一种自身免疫性甲状腺疾病。

多个研究表明T细胞激活和异常细胞因子生成与Graves病相关［4，5］。细胞因子在体内通过旁分泌、自分泌或内分泌等方式发挥作用，形成了十分复杂的细胞因子调节网络，参与人体多种重要的生理功能包括调控免疫应答。辅助性T细胞( helper T cell)简称Th细胞，能分泌多种细胞因子。Th细胞主要分为Th1细胞与Th2细胞两种。其中，Th1细胞主要分泌IL-2、IFN-γ、IFN-α、TNF等，辅助抗体生成，可激发迟发型超敏反应，介导细胞免疫应答。Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10等，主要刺激B细胞增殖并产生免疫球蛋白G( IgG)和免疫球蛋白E( IgE)抗体，介导体液免疫。Th1/Th2代表机体复杂的细胞因子调节网络，可以从整体上评估机体免疫功能［6］。

迄今Th1/Th2细胞平衡在Graves病中的作用仍然存在异议。多数研究报道，在Graves病中Th1/Th2细胞平衡失衡偏向以Th2占优势的免疫应答［7］。然而也有不同观点，Okumura等［8］发现Graves病患者甲状腺内淋巴细胞既有Th1型细胞因子也有Th2型细胞因子的分泌，未见明显的Th1/Th2细胞因子平衡的偏移。

且在Graves病中研究Th1/Th2细胞平衡失衡时，多选择检测血清TNF-α、IFN-γ、IL-2及IL-6、IL-4的含量的变化。而2013年Esfahanian等［9］报道在Graves病眼病中Th1/Th2细胞平衡失衡偏向以Th2占优势的免疫应答，且IL-10与Graves病的中度和重度眼病相关。

IL-10于1989年首次报道，当时认为其仅由Th2细胞亚群分泌并能专一抑制Th1亚群特异细胞因子，如IFN-γ的分泌是一种细胞因子合成抑制因子，多年来有关IL-10的负向调节作用及其应用研究不断取得进展。近年IL-10免疫刺激的作用及免疫生物学意义的研究也正逐渐深入，其双向免疫调节活性受到愈来愈多的关注，并由此猜测IL-10可能是一种多能细胞因子［10］。

本研究结果显示，Graves病患者血清IL-4和IL-10水平显著高于正常对照组，IFN-γ水平显著低于正常对照组，虽然IL-2水平水平无显著性差异，但Graves病患者IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10、IL-2/IL-4和IL-2/IL-10均显著低于正常对照组，表明Graves病患者甲状腺内Th2体液免疫应答强度增加，相应的细胞因子分泌增多，导致Th1/Th2细胞平衡向Th2偏离。

分析其原因可能是: Th2细胞占优势时体液免疫加强，可诱导B淋巴细胞大量分泌自身抗体-TGAb和TPOAb，使细胞分泌大量甲状腺激素，引起甲状腺滤泡上皮细胞增生肥大、甲状腺内淋巴细胞浸润并出现功能亢进，导致Graves病［11，12］。

鉴于此次研究结果，后期我们将对IL-4和IL-10 在Graves病中的活化机制以及对TGAb和TPOAb调控的具体过程进行进一步研究，从分子水平对Graves病的发生发展做出根源性解释，以指导临床药物的开发与应用，从而寻找出IL-4/IL-10特异性的阻断剂，以便有效治疗Graves病。

参考文献

1Menconi F，Marcocci C，Marinò M．Diagnosis and classification of Graves’disease．Autoimmun Rev，2014，13: 398-402．

2Tomer Y．Mechanisms of autoimmune thyroid diseases: from genetics to epigenetics．Annu Rev Pathol，2014，9: 147-156．

3Kocjan T，Wraber B，Repnik U，et al．Changes in Th1/Th2 cytokine balance in Graves’disease．Pflugers Arch，2000，440( 5 Suppl) : R94-95．

4Al-Humaidi MA．Serum cytokines levels in Graves’disease．Saudi Med J，2000，21: 639-644．

5Hidaka Y，Amino N．Organ-specific autoimmune diseases and cytokines．Rinsho Byori，1999，47: 335-339．

6Striz I，Brabcova E，Kolesar L，et al．Cytokine networking of innate immunity cells: a potential target of therapy．Clin Sci( Lond)，2014，126: 593-612．

7Phenekos C，Vryonidou A，Gritzapis AD，et al．Th1 and Th2 serum cytokine profiles characterize patients with Hashimotops thyroiditis( Th1) and Graves disease( Th2)．Neuroimmunomodulation，2004，11: 209-213．

8Okumura M，Hidaka Y，Matsuzuka F，et al．CD30 expression and interleukin-4 and interferon-gamma production of intrathyroidal lymphocytes in Graves disease．Thyroid，1999，9: 333-339．

9Esfahanian F，Naimi E，Doroodgar F，et al．Th1/Th2 cytokines in patients with Graves’disease with or without ophthalmopathy．Iran J Allergy Asthma Immunol，2013，12: 168-175．

10Wilke CM，Wei S，Wang L，et al．Dual biological effects of the cytokines interleukin-10 and interferon-gamma．Cancer Immunol Immunother，2011，60: 1529-1541．

11Guo J，Rapoport B，McLachlan SM．Balance of Th1/Th2 cytokines in thyroid autoantibody synthesis in vitro．Autoimmunity，1999，30: 1-9．

12Li H，Wang T．The autoimmunity in Graves’s disease．Front Biosci ( Landmark Ed)，2013，18: 782-787．

·论著·

收稿日期:( 2014－05－10)

doi:10．3969/j．issn．1002－7386．2015．04．012

【中图分类号】R 581．1

【文献标识码】A

【文章编号】1002－7386( 2015) 04－0517－02