尼美舒利联合顺铂对肺腺癌的影响



·短篇论著·

尼美舒利联合顺铂对肺腺癌的影响

朱天吉张卿季晓磊吕秀云

(NYFY ZD2012001)

作者单位： 010050 内蒙古医科大学附属医院呼吸内科

【关键词】尼美舒利；顺铂；非小细胞肺癌；模型

当前选择性COX-2抑制剂尼美舒利对各种肿瘤的治疗研究报道不断涌现，且取得了比较理想的结果。COX-2是转化为前列腺素过程当中的限速酶，COX-2过量表达可导致前列腺素合成增多，从而降低细胞介导的免疫反应而发挥作用。目前化疗联合COX-2抑制剂等综合治疗逐渐成为研究热点。周崧雯等[1]用COX-2抑制剂联合化疗治疗晚期NSCLC，结果显示联合方案组较单独用药组抑制肿瘤生长优先，但差异无统计学意义。也有研究显示COX -2抑制剂联合传统化疗药物对肺癌有抑制作用[2]。梁娜等[3]在抑制乳腺癌裸鼠移植瘤生长的药物试验中证实，COX-2抑制剂治疗优于单一用药组和放疗联合化疗组。

本试验以尼美舒利联合顺铂干预A549细胞接种的裸鼠移植瘤为研究对象，观察体内尼美舒利联合顺铂对裸鼠移植瘤生长的影响。

材料与方法

一、选择实验对象

肺腺癌A549细胞株购自博尔迪生物科技公司，于内蒙古医科大学临床研究中心传代培养；无特定病原体(SPF)级BALB/C裸鼠32只，购于中国医学科学院试验动物研究所，鼠龄4周，体量18g～20 g，雄性。【试验裸鼠许可证号SCXK(北京)-2012-0001】。

二、主要试剂及仪器设备

尼美舒利(海南康芝制药厂)，顺铂(山东齐鲁制药厂)，胰蛋白酶(Gibco公司)，PBS缓冲液(HyClone公司)，RPIM-1640培养基及胎牛血清(美国Gibco公司)，恒温CO2培养箱(上海精宏试验设备公司)，裸鼠用游标卡尺(北京精益恒源量具公司)，分析天平(日本BW320)。

三、细胞培养

于37 ℃、5% CO2及饱和湿度恒温培养箱中，用RPIM-1640培养基(10%胎牛血清)，细胞状态为贴壁生长，1～2 d换液1次，2～3 d传代1次。

四、裸鼠移植瘤实验

32只试验用裸鼠随机分成4组，每8只，分别为对照组，尼美舒利组，顺铂组，尼美舒利联合顺铂组。取A549细胞分别接种于裸鼠背部皮下组织，0.2 ml/只。接种8 d后给予药物干预，对照组给予灌胃CMC溶液，10 ml·kg·-1d·-1给药，连续给药21 d和腹腔注射0.9%生理盐水，0.5 ml/次，每4 d给1次，共4次。尼美舒利组给予尼美舒利灌胃，逐日60 mg·kg·-1d·-1，连续给药3周。顺铂组给予顺铂腹腔注射，5 mg·kg·-1d·-1，每4 d给1次，共4次。联合组给予尼美舒利灌胃，逐日给予60 mg·kg·-1d·-1，连续给药3周和顺铂腹腔注射，5 mg·kg·-1d·-1，每4 d给1次，共4次。3周后停药并处死裸鼠。实验中注意观察裸鼠的精神、进食、排便及体重情况。每周2次以游标卡尺测量裸鼠移植瘤的大小：测量肿瘤最长瘤径(a)和最短瘤径(b)计算近似体积V=ab2/2，并绘制肿瘤生长曲线。实验结束后处死裸鼠取瘤称重，结合用药过程测量的瘤长，按公司分别计算相应的瘤体积抑制率及瘤重量抑制率：裸鼠体积抑制率=(对照组瘤体积-用药组瘤体积)/对照组瘤体积×100%；裸鼠瘤重抑制率=(对照组移植瘤重-用药组移植瘤重)/对照组移植瘤×100%。

五、统计学方法

结果

一、用药后裸鼠移植瘤生长情况及平均瘤体积

各组平均肿瘤体积分别为：对照组(0.412±0.192)cm3；尼美舒利组(0.314±0.125)cm3；顺铂组(0.139±0.085)cm3；联合用药组(0.049±0.028)cm3，见表1。对比对照组，尼美舒利组、顺铂组、尼美舒利连和顺铂组肿瘤生长缓慢，肿瘤体积比对照组小(P<0.05 )，顺铂与尼美舒利联合组用药平均瘤体积小于尼美舒利组和顺铂组(P<0.05 )。

二、裸鼠移植瘤平均移植瘤重量及裸鼠一般状况

各组平均肿瘤重量分别为：对照组(0.309±0.177)g；尼美舒利组(0.223±0.189)g；顺铂组(0.216±0.141)g；联合用药组(0.211±0.131)g, 见表1。同对照比比较，尼美舒利组、顺铂组和尼美舒利联合顺铂组瘤重量显著小于对照组(P<0.05 )，尼美舒利与顺铂联合用药组平均瘤重量低于尼美舒利组及顺铂组(P<0.05 )。用药期间：对照组及尼美舒利组用药后生长状态良好，饮食变化不明显。

表1　用药治疗后不同组别肿瘤重量(g)及肿瘤体积(cm3)

三、裸鼠移植瘤体积抑制率

尼美舒利组平均瘤体积为50.49%，顺铂组平均瘤体积抑制率：57.62%，尼美舒利联合顺铂组平均瘤体积抑制率65.23%，联合组平均瘤体积抑制率增加(P<0.05 )。

四、裸鼠移植瘤生长曲线及移植瘤重量抑制率

以A549细胞接种后的天数为横坐标，从第5天开始每隔4d测量的肿瘤体积为纵坐标(mm3)(图1)。尼美舒利组平均瘤重量抑制率为27.82%，顺铂组平均瘤重量抑制率29.96%，尼美舒利联合顺铂组平均瘤重量抑制率为31.58%，联合组平均肿瘤重量抑制率增加(P<0.05 )。

图1　人肺腺癌裸鼠移植瘤生长曲线

讨论

顺铂与其他多种抗肿瘤方法综合应用有协同作用，是目前肺癌综合治疗最常用的药物，其单独多次使用会加剧免疫抑制。但顺铂杀伤大量癌细胞同时，也杀伤了大量正常细胞，使机体的免疫功能下降。多疗程、大剂量化疗还会损伤患者机体，加重肿瘤的免疫逃逸。寻找一种副作用低且有效的肺癌综合治疗方法，对肺癌患者很重要。目前COX-2抑制剂作为一种新的生物靶向分子，在研究治疗肺癌中逐渐崭露头角[4]。

化疗与选择性COX-2抑制剂联合应用在肺癌治疗，正成为NSCLC的治疗主要模式。李根[5]发现COX-2抑制剂联合化疗可提高细胞对比药物的敏感性，使抗癌药物浓度增加，增强传统化疗的疗效。化疗药物联合选择性COX-2抑制剂可降低单纯化疗药物所引起的副作用，通过调节机体的细胞因子来增加肿瘤的免疫，与其有关的治疗还在不断探索过程中。目前国内外已有试验证实COX-2抑制剂与化疗联合应用对肺癌生长的影响[6]。张平[7]在研究COX-2抑制剂与化疗联合用药对肺腺癌细胞的作用中证实，COX-2(NS-398)与化疗(顺铂)在抑制肺癌细胞的增殖生长方面有协同作用。Nishiyama等[8]研究也显示，选择性COX-2抑制剂可提高NSCLC患者对化疗药物的敏感性，进一步抑制肿瘤生长。Huang等[9]也报道了NSCLC来源的PGE2通过调节细胞因子平衡，抑制宿主免疫，继而抑制了肿瘤的生长。美国临床肿瘤协会(ASCO)曾经报道COX-2抑制剂可与化疗药物结合治疗复发性NSCLC。

基于以上研究表明，尼美舒利与顺铂联合药物干预对肺腺癌生长的抑制作用强于单独任何一种药物，从而证实尼美舒利和顺铂单独药物干预时，对肿瘤的生长具有一定的抑制作用；两者联合用药干预时，尼美舒利可以改善顺铂的抗肿瘤活性，以实现对肿瘤的抑制作用。Watikins等[10]采用，COX-2抑制剂联合化疗6例胆管癌患者，其中完全缓解1例，病情稳定2例，患者耐受良好，显示COX-2抑制剂联合化疗组对肿瘤治疗优于单一治疗组。

本研究结果显示，尼美舒利联合顺铂对A549细胞及裸鼠移植瘤有显著的协同抗肿瘤作用，但由于动物脏器的特点，如胃黏膜屏障等的生理特点有别于人类，且尼美舒利抗肿瘤的最佳剂量上缺乏可靠的数据，故COX-2抑制剂与化疗药物在人体内联合应用能否增加抗肿瘤作用并减少不良反应，尚有待于进一步证实。

参考文献

1周崧雯, 周彩纯, 徐建芳, 等. 长春瑞滨和顺铂联合西乐一线治疗晚期非小细胞肺癌[J]. 同济大学学报(医学版), 2007, 28(5): 87-92.

2魏海明, 田志刚, 等. 以“预存免疫”为基础的IL-12抗肺癌免疫化疗技术[J]. 科技计划成果, 2010(3): 18-19.

3梁娜, 张树友, 王辉, 等. COX-2抑制剂联合放疗对人乳腺癌裸鼠移植瘤作用的研究[J]. 山东医药, 2011, 51(12): 33-34.

4Dreicer R, Stadler WM, Ahmann FR, et al. MVA-MUC1-IL-2 vaccine

immunotherapy(TG4010)improves PSA doubling time in patients with prostate cancer with biochemical failure[J]. Invest New Drugs, 2009, 27(4)：379-386.

5李根. 选择性COX-2抑制剂塞来昔布抗癌作用研究进展[J]. 武警后勤学院学报(医学版), 2012, 21(3)：214-220.

6Trifan OC, Durhamw F, Salazar VS, et al. Cyclooxygenase-2 inhibition

with celecoxib enhances antitumor efficacy and reduces diarrhea side effect of CPT-11[J]. Cancer Res, 2002, 62(20): 5778-5784.

7张平. 环氧化酶-2抑制剂的药理作用进展[J]. 药物流行病学杂志, 2010, 19(2)：107-110.

8Nishiyama O, Taniguchi H, Kondoh Y, et al. Meloxicam a selective cyclooxygenase-2(cox-2) inhibition enhances the response to carboplatin and weekly paclitaxel in advanced non-small cell lung cancer(NSCLC)[J]. J Clin Oncol, 2006, 23(16s): 7312.

9Huang M, Shama S, Mao JT, et al. Non-small cell lung cancer derived soluble mediators and prostaglandin E2enhance peripheral blood lymphocyte IL-10 transcription and peotein production[J]. J Immunol, 1996, 157(12): 5512-5520.

10Watkins JF, Mayo MS, Smith HJ, et al. Gemcitabine, irrnotecan and celecoxib in patients with biliary cancer[J]. Anticancer Drugs, 2009, 20(4): 294-300.

(本文编辑：王亚南)

朱天吉，张卿，季晓磊，等. 尼美舒利联合顺铂对肺腺癌的影响[J/CD]. 中华肺部疾病杂志： 电子版， 2015， 8(6)： 739-741.

(收稿日期：2015-05-14)

中图法分类号：R743，R563

文献标识码：B

通讯作者：张卿，Email:nmg740912@163.com

基金项目：内蒙古医科大学附属医院科研项目资助

DOI：10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2015.06.014