高脂血症伴牙周炎患者牙周临床参数、血清CRP、IL-6水平的检测分析

张　雪, 贾兴亚, 张忠提, 刘小舟, 朱　仑, 张冬梅

(中国医科大学口腔医学院, 1. 干诊科; 2. 牙周科, 辽宁 沈阳, 110002)

高脂血症伴牙周炎患者牙周临床参数、血清CRP、IL-6水平的检测分析

张雪, 贾兴亚, 张忠提, 刘小舟, 朱仑, 张冬梅

(中国医科大学口腔医学院, 1. 干诊科; 2. 牙周科, 辽宁 沈阳, 110002)

摘要:目的探讨高脂血症伴牙周炎患者牙周临床参数、血清中炎症因子白介素-6(IL-6)和C反应蛋白(CRP)水平变化。方法高脂血症合并牙周炎患者32例为(H+P)组；牙周炎患者38例为P组；高脂血症患者23例为H组；牙周健康且无全身系统性疾病的健康志愿者25例为N组。记录简化牙石指数、探诊出血阳性率、探诊深度、附着丧失。采用ELISA法检测血清炎症因子IL-6和CRP水平。结果(H+P)组牙周组织检测指标显著高于P组、H组、N组(P<0.05); (H+P)组血清炎症因子IL-6和CRP显著高于N组、P组、H组(P<0.05)。结论较高的血脂水平与牙周炎的病变过程存在一定关联。

关键词:牙周炎; 高脂血症; 白介素-6; C反应蛋白

近年来高脂血症和心血管疾病的发病率呈上升趋势，高脂血症可刺激促炎症细胞因子的表达，造成氧化应激,并促进中性粒细胞的聚集而加剧炎症过程[1]。牙周炎是指发生在牙周支持组织的慢性炎症性破坏性疾病，其发病机制复杂，涉及细菌及其毒性产物引发的炎症反应及过度的宿主反应造成的组织破坏，是成人失牙的主要原因。有研究[2]表明，血脂水平与牙周炎病变程度相关，牙周炎患者血清中的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平较健康人高。高脂血症与牙周炎二者之间关于炎症的发生与促进协同加剧的作用机制引起关注。本研究通过检测、比较4组牙周组织及炎症因子白介素-6(IL-6)和C反应蛋白(CRP)的水平，为进一步研究牙周疾病和高脂血症之间双向联系奠定基础。

1材料与方法

1.1　一般资料

选择2012年4月—2014年5月就诊于中国医科大学附属口腔医院牙周病患者70例，其中高脂血症+牙周炎患者[(H+P)组]32例，男18例，女14例，年龄45～69岁；牙周炎患者(P组)38例，男21例，女17例，年龄28～69岁；高脂血症患者(H组)23例，男14例，女9例，年龄36～69岁；另于体检人群中选取牙周健康且无全身系统性疾病的健康志愿者(N组)25例，男12例，女13例，年龄28～55岁。参照《中国成人血脂异常防治指南》纳入研究的高脂血症患者符合以下条件：血清总胆固醇>5.72 mmol/L, 或血清甘油三酯含量>1.70 mmol/L, 或血清高密度脂蛋白含量<0.9 mmol/L, 或低密度脂蛋白含量>3.6 mmol/L, 上述4项符合其中1项即可诊断为高血脂；纳入研究的慢性牙周炎患者参照1999年牙周病分类国际研讨会制定的标准诊断为慢性牙周炎。所有受试者均填写知情同意书。所有受试者排除糖尿病、肿瘤、其他部位严重感染、肾脏疾病、进行性肝脏疾病、传染性疾病，3个月内进行牙周治疗、使用抗生素及抗凝药物者。

1.2　牙周临床指标检查

牙周临床指标检查包括如下几点：根据Greene和Vermillion提出的4级记分标准，只检查6个牙(16、11、26、31的唇颊面和36、46的舌面)检查并记录简化牙石指数(CI-S):0=龈上、龈下无牙石; 1=龈上牙石覆盖牙面积占牙面1/3以下; 2=龈上牙石覆盖牙面积占牙面1/3～2/3; 3=龈上牙石覆盖牙面积占牙面2/3以上；探诊出血(BOP); 牙周探诊深度(PD); 附着丧失(AL)，所有检查由同一名医生完成。

1.3　标本采集

所有受试者采集清晨空腹静脉血10 mL, 3 800 r/min离心10 min分离血清，收集血清于无菌试管中，密封，-70 ℃冰箱保存待测。

1.4　血脂测定

用全自动生化仪以酶法试剂盒测定总胆固醇(TC), 甘油三酯(TG), 直接法测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。

1.5　血清炎症因子IL-6和CRP检测

室温复融血清样本，用IL-6酶联免疫检测试剂盒，按说明书实际操作步骤操作，酶联反应终止后，在30 min内使用酶标仪在450 nm下读取OD值，以标准品在半对数表上绘制标准曲线，根据样品值在该曲线图上查出相应的血清IL-6含量。CRP检测用ELISA法，原理与步骤同上。

1.6　统计学分析

采用SPSS13.0统计软件进行分析，测量值以均数±标准差表示，建立数据库，各组牙石指数比较采用秩和检验；PD,AL的比较用t检验；BOP的组间比较采用卡方检验；4组间TC、TG、HDL-C、LDL-C、IL-6、CRP水平的比较采用单因素方差分析和最小显著法多重比较。检验水准为α=0.05。

2结果

2.1　简化牙石指数比较

(H+P)组、P组简化牙石指数显著高于N组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1　各组简化牙石指数(CI-S)比较

与N组比较，*P<0.05。

2.2　其他牙周参数比较

BOP阳性率方面，(H+P)组、P组、H组均高于N组(P<0.05); PD、AL比较，(H+P)组的PD、AL均显著高于其他3组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

与其他3组比较, *P<0.05，#P<0.05, △P<0.05，▲P<0.05。

2.3　血清炎症因子含量比较

4组IL-6和CRP含量比较，H组、P组、(H+P)组血清炎症因子含量显著高于N组，差异有统计学意义(P<0.05); (H+P)组血清炎症因子含量显著高于H组、P组，差异有统计学意义(P<0.05); H组与P组差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3　各组IL-6和CRP含量的比较

与N组比较，*P<0.05; 与(H+P)组比较，#P<0.05。

2.4　血清炎症因子IL-6、CRP与血脂水平的Pearson相关性分析结果

血清炎症因子IL-6与血脂TG、TC、LDL水平呈正相关(γ=0.849、0.732、0.693,P<0.05), 与血脂HDL水平呈极弱相关或无相关。血清炎症因子CRP与血脂TG、TC、LDL水平呈正相关(γ=0.736、0.756、0.731,P<0.05), 与血脂HDL水平呈极弱相关或无相关。

3讨论

本实验中牙周检测指标在N组、H组、P组、(H+P)组间依次呈升高趋势。本实验结果显示，牙周炎合并高脂血症患者牙周组织的病变程度严重于牙周炎组、高脂血症组。有研究[3]表明，血脂水平与牙周病的患病率之间有关联。Culter等[4]将一组成年牙周炎患者和与之年龄相匹配的牙周健康的对照组进行比较，认为牙周炎与高胆固醇(TC)、高甘油三酯(TG)相关联。国内王岩等[5]的横断面调查研究认为，总胆固醇、甘油三酯均与牙周炎的患病率相关。另有动物实验研究[6]表明，较高的血脂水平影响骨密度，加重了骨质疏松；在高脂血症与牙周炎关系的动物实验中，对牙槽骨的密度进行Micro-CT检测，附着丧失(AL)在高脂血症合并牙周炎组最高，提示较高的血脂水平与牙槽骨的丧失存在关联，进一步证实了高血脂加重牙槽骨丧失[7-8]。

高脂血症伴牙周炎患者血清中IL-6、CRP的含量显著高于H组、P组，差异有统计学意义(P<0.05)。白介素-6(IL-6)具有免疫调节和免疫刺激作用，参与炎症、免疫反应以及脂类物质代谢，在高脂血症存在的条件下，血清中IL-6含量增加[9-10]。本研究进一步证实，在牙周炎与高脂血症并存的情况下IL-6显著增高，(H+P)组IL-6含量明显高于P组、H组，较高的血脂水平为炎症的存在提供了条件。本实验中H组IL-6水平与N组相比有显著差异，提示高脂血症患者已处于炎症状态。IL-6与牙周炎症的相互关系影响: ① IL-6可以促进牙槽骨的吸收:IL-6通过诱导成骨细胞产生破骨细胞分化因子可以诱导破骨细胞前体转化为成熟的破骨细胞[11]; ② 由IL-6诱导产生的基质金属蛋白酶可以促进骨基质的降解，并且IL-6具有抑制成骨作用[12]; 能轻度抑制成骨细胞碱性磷酸酶的活性和胶原的合成，从而抑制牙槽骨吸收后新骨的形成[13]; ③ IL-6可以抑制牙周膜的修复:成纤维细胞虽是IL-6的主要来源细胞，但亦能抑制成纤维细胞、胶原细胞和基质细胞等牙周膜细胞的生长，并降低成纤维细胞的附着，从而导致牙周膜修复能力的减弱、牙周附着的丧失，形成深牙周袋[14]; ④ IL-6参与牙周炎的炎症反应：调节急性期蛋白的产生 ，促进炎症细胞的聚集、活化并促进炎症介质的释放[15]。高血脂可参与影响中性粒细胞的功能，刺激促炎细胞因子的表达，造成氧化应激，并促进中性粒细胞的聚集而加剧炎症过程，从而对牙周疾病的病变过程造成影响[16]。

C反应蛋白(CRP)是反映机体炎症状态的一个敏感而可靠的指标, CRP是一种由肝脏合成的急性时相蛋白，系炎性细胞激活后产生IL-6等细胞因子刺激肝脏合成，能激活补体系统、参与炎症反应，是经典的炎症标志物[17]; CRP可激活血管内皮细胞表面黏附因子的表达，促进单核细胞趋化蛋白分泌，导致炎症细胞聚集[18]; 也有研究[19]显示，牙周感染可能通过其产生的炎症介质刺激肝脏合成并分泌CRP, 使循环中的CRP水平升高并引发全身慢性炎症反应; CRP影响血脂水平凝集血细胞激活血小板，从而促进血栓形成并影响血脂水平的变化[20]。本研究中CRP在P组、H组均较N组升高，提示H组人群已处于炎症状态。有研究[21]证实在正常人群和高脂血症人群中，随着血脂水平的升高，炎症因子CRP、IL-6也同时升高，提示高脂血症人群已处于炎症状态。在(H+P)组CRP含量显著高于仅存一种疾病的P组、H组，提示高脂血症和牙周炎两种疾病同时作用下CRP的含量增高。通过对血清炎症因子IL-6、CRP与血脂水平的Pearson相关性分析结果显示，TG、TC、LDL水平与炎症因子IL-6、CRP呈强直线相关性。

综上所述，较高的血脂水平与牙周炎的病变过程存在一定关联。本实验是临床研究，病例选择受患者群影响，H组样本选择尚有不足之处，H组的CI-S指数为1的占15例，H组的牙周组织只是相对于(H+P)组较健康，在纳入样本检查时已有附着丧失约1 mm，并且本研究没有对牙周炎进行分型和分度，只是对高脂血症与牙周炎间联系的初步临床探索。明确牙周炎和血脂水平之间相互作用的机制，将为较高血脂水平牙周炎患者的防治及治疗工作实行更加合理的治疗，二者之间的相互作用机制有待进一步研究。

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Detections of periodontal indexes, serum C-reactive

protein and interleukin-6 levels in patients with

hyperlipidemia and periodontitis

ZHANG Xue, JIA Xingya, ZHANG Zhongti, LIU Xiaozhou, ZHU Lun, ZHANG Dongmei

(1.DepartmentofVIP; 2.DepartmentofPeriodontology,SchoolofStomatologyofChina

MedicalUniversity,Shenyang,Liaoning, 110002)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the change of serum C-reactive protein( CRP) and interleukin-6 ( IL- 6)levels and periodontal indexes in patients with hyperlipidemia and periodontitis. MethodsA total of 32 patients with hyperlipidemia and periodontitis were selected as group (H+P), 38 patients with periodontitis were selected as group P, 23 patients with hyperlipidemia were selected as group H and 25 healthy volunteers were selected as group N. The calculus index-simplified, bleeding on probing, probing depth and attachment loss were recorded. Enzyme-Linked Immuno-sorbent Assay (ELISA) was used to measure the levels of IL-6 and CRP. ResultsThe values of periodontal indexes in the group (H+P) were significantly higher than those in the group P, the group H and the group N (P<0.05). Levels of IL-6 and CRP in the group (H+P) were significantly higher than those in the group P, the group H and the group N (P<0.05).ConclusionThere is a certain correlation between hyperlipidemia and pathological process of periodontitis.

KEYWORDS:periodontitis; hyperlipidemia; interleukin-6; C-reactive protein

通讯作者:贾兴亚, E-mail: jia.xing.ya@tom.com

基金项目:辽宁省医学高峰建设工程重点科研项目(200909)

收稿日期:2014-12-26

中图分类号:R 781.4

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2015)11-078-04

DOI:10.7619/jcmp.201511023