胃癌患者血清及癌组织中MMP-3的表达及临床意义

李　佳, 刘爱勇, 王　丽, 张美云, 李晓凤

(1. 内蒙古自治区包头市疾病预防控制中心 免疫规划科, 内蒙古自治区 包头, 014030;

内蒙古自治区包头市肿瘤医院, 2. 放疗科; 3. 预保科; 4. 肿瘤综合内科, 内蒙古自治区 包头, 014030)

胃癌患者血清及癌组织中MMP-3的表达及临床意义

李佳1, 刘爱勇2, 王丽3, 张美云4, 李晓凤4

(1. 内蒙古自治区包头市疾病预防控制中心 免疫规划科, 内蒙古自治区 包头, 014030;

内蒙古自治区包头市肿瘤医院, 2. 放疗科; 3. 预保科; 4. 肿瘤综合内科, 内蒙古自治区 包头, 014030)

摘要:目的研究胃癌患者血清及癌组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的表达特点，探讨检测血清MMP-3在临床上反映胃癌病程变化的意义。方法选取胃癌患者45例为观察组，同期健康体检者30例为对照组，比较手术前观察组与对照组血清MMP-3水平，分析观察组MMP-3在胃癌组织、癌旁组织中的表达情况，及其与临床病理因素的关系。结果胃癌组织MMP-3阳性染色率显著高于癌旁组织(P<0.01)；观察组血清MMP-3水平显著高于对照组(P<0.01); 血清MMP-3水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、临床分期密切相关(P<0.01)。结论胃癌患者MMP-3于癌组织及血清中均高表达，血清MMP-3在预测胃癌侵袭转移，评估胃癌恶性程度等可能具有重要的临床应用价值。

关键词:胃癌; 基质金属蛋白酶-3; 酶联免疫吸附测定; 免疫组织化学染色法

胃癌为常见的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康[1]，积极寻找胃癌新的防治手段，提高胃癌诊断治疗水平，一直为临床研究的热点[2]。研究表明，肿瘤细胞是否发生侵袭、转移严重影响肿瘤患者的预后[3]。肿瘤细胞的侵袭转移过程为多环节级联反应，肿瘤细胞通过破坏基底膜、降解细胞外间质实现浸润和转移过程[4]。基质金属蛋白酶类(MMPs)为蛋白水解酶，降解细胞外基质和基底膜中的成分以促进白细胞浸润周围组织是其主要生物学功能[5-6]。本研究通过检测胃癌患者血清和癌组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的表达特点，拟探讨血清MMP-3与胃癌临床病理参数的关系及其潜在的临床应用价值。

1资料与方法

1.1　一般资料

选取2009年9月-2011年8月收治的胃癌术前患者45例为观察组，其中男25例，女20例；年龄30～72岁，平均(55.2±5.6)岁。按照世界卫生组织(WHO)病理组织学分类和TNM分期标准[7]: Ⅰ～Ⅱ期15例，Ⅲ～Ⅳ期30例；伴有淋巴结转移30例，无淋巴结转移15例；肿瘤发生部位：贲门、胃底、胃体23例，胃角、胃窦22例；高、中分化腺癌11例，低分化腺癌34例；浸润深度：未达浆膜12例，达到或超过浆膜33例。同期健康体检者30例为对照组，其中男19例，女11例；年龄31～75岁，平均(53.2±3.6)岁。2组受试者年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义，具有可比性(P>0.05)。

1.2　方法

采集2组受试者空腹外周静脉血5 mL，离心后分离血清, -70 ℃冰箱保存待测，酶联免疫吸附测定(Elisa法)检测血清MMP-3水平。收集观察组术中胃癌组织，及距癌组织边缘>5 cm的癌旁组织，免疫组织化学染色法检测观察组胃癌组织、癌旁组织中MMP-3表达情况：每张切片在200倍光镜下，选5个不同视野，各视野计数200个癌细胞。阳性(+)判断标准：染色阳性细胞比例≥30%。

1.3　观察指标

分析观察组MMP-3在胃癌组织、癌旁组织中的表达情况；比较手术前观察组与对照组血清MMP-3水平；分析血清MMP-3水平与临床病理因素的关系。

2结果

2.1　MMP-3在观察组胃癌组织及癌旁组织中的表达

MMP-3免疫组织化学染色结果表明，观察组胃癌组织MMP-3阳性染色率为68.9%(31/45)，癌旁组织MMP-3阳性染色率为13.3%(6/45)，差异具有统计学意义(P<0.01)。

2.2　2组血清MMP-3水平比较

观察组术前血清MMP-3水平显著高于对照组(P<0.01)，见表1。

表1　2组血清MMP-3水平比较

与对照组比较，**P<0.01。

2.3　观察组血清MMP-3水平与临床病理因素的关系

观察组肿瘤浸润达到或超过浆膜的患者，其血清MMP-3水平显著高于未达浆膜患者(P<0.01); 发生淋巴结转移患者的血清MMP-3水平显著高于未发生淋巴结转移患者(P<0.01); TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期的患者血清MMP-3水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期的患者(P<0.01); 血清MMP-3水平与患者年龄、性别、肿瘤直径、部位、分化程度无关(P>0.05), 见表1。

表2　观察组患者血清MMP-3水平与临床病理

3讨论

胃肿瘤细胞的侵袭转移是一个多步骤、多环节的级联反应过程[8]，除肿瘤细胞本身的侵袭力，肿瘤细胞还须通过对可分泌某些细胞外基质水解酶和基底膜降解酶，并通过多种途径，降解细胞外基质，破坏屏障[9]。MMPs为一类具有锌离子依赖性的内源性蛋白水解酶[10], 其在降解细胞外基质的同时，还能破坏基底膜的完整性，促进肿瘤细胞的转移和浸润[11]。有研究[12]表明, MMP-3作为MMPs家族一员，在某些癌症癌细胞转移和浸润过程中发挥重要作用，除黏附软骨蛋白多糖、多种胶原、纤维结合素、层黏蛋白等，还可激活多种细胞因子，参与肿瘤细胞的发生、发展过程。有研究[13]发现，抑制肿瘤细胞分泌MMP-3，可明显削弱肿瘤细胞的浸润和转移能力。

廖如奕等[15]研究发现，胃癌组织中MMP-3表达量明显高于正常胃黏膜组织, MMP-3表达与胃癌的分化程度、浸润深度及淋巴结转移相关。许威等[14]报道，运用Elisa法检测胃癌患者术前MMP-3含量，其血清MMP-3水平与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、临床分期密切相关。本研究结果显示，与癌旁组织相比，胃癌组织中MMP-3表达率较高，胃癌患者血清MMP-3水平与正常对照组比较显著升高，提示胃癌肿瘤细胞MMP-3活性增强, MMP-3在患者血清与癌组织中的水平存在一定的相关性，检测血清MMP-3水平可能可用来判断胃癌的活动性；随着胃癌浸润深度的增加，术前血清MMP-3水平增加明显升高，且伴有淋巴结转移的患者，其血清MMP-3水平显著高于无淋巴结转移者，提示MMP-3水平变化与胃癌的转移和侵袭有关；MMP-3随胃癌临床病理分期升高而显著增高，表明其不仅对于胃癌有较高的诊断价值，且对胃癌的分期也有较积极的检测意义，与上述报道结果一致。

综上所述，由于血清标本比胃癌组织标本更易获得，因而通过检测血清MMP-3水平来辅助诊断胃癌的早期发生，预测胃癌侵袭转移，评估胃癌恶性程度等可能具有重要的临床实用价值与应用前景。

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Expression and clinical significance of matrix metalloproteinases-3 level in serum and tumor tissue in patients with gastric cancer

LI Jia1, LIU Aiyong2, WANG Li3, ZHANG Meiyun4, LI Xiaofeng4

(1.DepartmentofImmunizationProgram,BaotouCenterforDiseaseControlandPrevention,

Baotou,InnerMongolia, 014030; 2.DepartmentofRadiotherapy; 3.Department

ofPreventionandHealthcare;DepartmentofMedicalOncology,BaotouCancer

Hospital,Baotou,InnerMongolia, 014030)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the expression of matrix metalloproteinases-3 (MMP-3) in serum and tumor tissue and to investigate the significance of serum level of MMP-3 in reflecting course of gastric cancer. MethodsForty five patients with gastric cancer were designed as observation group and 30 healthy people were designed as control group. The serum level of MMP-3 before operation was compared between two groups. The expression of MMP-3 in tumor tissue and tumor-adjacent tissue and its relationship with clinic pathological factors were observed and analyzed. ResultsThe rate of positive MMP-3staining in tumor tissue was significantly higher than that in tumor-adjacent tissue (P<0.01). The serum level of MMP-3 in the observation group was significantly higher than that in the control group (P<0.01). Serum level of MMP-3 was associated with depth of infiltration, lymphatic metastasis and clinical stage of cancer (P<0.01). ConclusionThe level of MMP-3 is highly expressed in serum and tumor tissue in patients with gastric cancer. Serum level of MMP-3 may be valuable in prediction of invasion and metastasis and assessment of malignant degree of gastric cancer.

KEYWORDS:gastric cancer; matrix metalloproteinases-3; ELISA; immunohistochemistry

通信作者:李晓凤, E-mail: btlixiaofeng@126.com

基金项目:中国高校医学期刊临床专项资金(11321896)

收稿日期:2015-01-15

中图分类号:R 735.2

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2015)05-038-03DOI: 10.7619/jcmp.201505012