血清干扰素-γ、白介素-4、白介素-6及白介素-10在肾癌患者治疗中的表达及意义

魏雪菲, 徐　佩, 陈载融, 郭万华

(南京大学医学院附属南京鼓楼医院 核医学科, 江苏 南京, 210029)

血清干扰素-γ、白介素-4、白介素-6及白介素-10在肾癌患者治疗中的表达及意义

魏雪菲, 徐佩, 陈载融, 郭万华

(南京大学医学院附属南京鼓楼医院 核医学科, 江苏 南京, 210029)

摘要:目的探讨射频消融术(RFA)以及根治性手术治疗肾细胞癌患者手术前后血清干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)及白介素-10(IL-10)的表达及临床意义。方法应用ELISA法对120例肾癌患者治疗前与术后1周、1月及3月血清中的IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10含量进行检测。结果RFA组及根治组术后1周血清IFN-γ、IL-6、IL-10均升高(P<0.05); RFA组术后1、3月仅IFN-γ升高(P<0.05), 根治组术后1月仅IL-10升高(P<0.05); 2组IL-4水平手术前后均无显著差异(P>0.05)。结论检测肾癌患者治疗前后细胞因子水平对于监测疾病发展、评价手术效果、判断预后有一定的作用。

关键词:干扰素-γ; 白介素-4; 白介素-6; 白介素-10; 肾细胞癌

肾细胞癌(RCC)是泌尿系统中常见的恶性肿瘤之一，约有25%的RCC患者首诊时已为晚期[1], 其对化疗和放疗均不敏感，目前手术是公认的治疗原发性肾癌唯一有效的方法[2]。近来还有人[3]提出射频消融结合肾血管栓塞术治疗瘤体较大的肾癌是一种安全、可行的方法。各种细胞因子的分泌异常及异常炎症细胞的出现在RCC的发病过程中发挥着重要的作用[4], 如干扰素-α(IFN-α)[5]、干扰素-γ(IFN-γ)[6]、白介素-2(IL-2)[7]、白介素-4(IL-4)[8]、白介素-6(IL-6)[9]、白介素-9(IL-9)[10]、白介素-10(IL-10)[11]等。本文通过检测RCC患者血清中IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10水平在治疗前及治疗后1周，1、3个月的变化，探讨细胞因子在RCC疾病发生中的作用，现报告如下。

1资料与方法

1.1　一般资料

选取本院2012年1月—2014年6月住院患者120例，男78例，女42例，年龄26～69岁，平均年龄(2.5±13.4)岁，病理诊断为肾细胞癌患者。所有病例都未合并或已排除其他疾病如肾结核、肾结石、肾感染性疾病、肾良性肿瘤、肾盂肿瘤、肾间叶肿瘤、后腹腔其他肿瘤等；所有患者术前均未行放疗、化疗、免疫治疗或靶向治疗。正常对照组30例，为本院健康体检人群。

1.2　方法

人IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10 ELISA试剂盒均购于江苏凯基生物科技发展有限公司，酶标仪为BIO-RAD公司的Benchmark酶标仪。

RFA治疗组(60例):根据肿瘤的直径、位置以及邻近血管与脏器的关系，分为超声引导下经皮射频消融术、腹腔镜辅助下射频消融术以及开放射频消融术。根治术组(60例)均采用腹腔镜肾肿瘤根治性切除术。

所有病例均于术前1 d和治疗后1周, 1、3个月清晨空腹抽取静脉血3 mL, 静脉血标本采集后应立即离心,将获得的血清置-70 ℃冰箱保存待检。采用双抗体夹心ELISA法检测所有标本的IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10含量，检测步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.3　统计学处理

采用SPSS 20.0软件进行统计学处理，结果均以均数±标准差表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

各组标本血清IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10检测结果见表1。RCC患者除血清IL-4外, IFN-γ、IL-6及IL-10测定结果与对照组比较有显著差异。RFA组术后血清IFN-γ水平均高于术前(P<0.05), 术后1周的IL-6、IL-10水平较术前均升高(P<0.05), 术后1、3个月较术前均下降(P<0.05); 根治组术后1周IFN-γ水平较术前升高(P<0.05), 术后1、3个月与术前比较无显著差异(P>0.05)，术后1周IL-6水平较术前升高(P<0.05), 术后1个月与术前比较无显著差异(P>0.05), 术后3个月较术前明显下降(P<0.05), 术后1周及1月的IL-10水平较术前升高(P<0.05),术后3个月与术前比较无显著差异(P>0.05); 2组IL-4水平手术前后均无显著差异(P>0.05)。

表1　RCC患者治疗前后与对照组血清IFN-γ、IL-4、IL-6及IL-10检测情况比较　pg/mL

与对照组比较, *P<0.05; 与同组治疗前比较, #P<0.05。

3讨论

免疫因素在恶性肿瘤的发生发展中发挥了重要作用[12], 机体的荷瘤状态会引发免疫应答，机体发挥抗肿瘤免疫反应以细胞免疫为主，主要效应细胞是CD4+和CD8+T淋巴细胞。CD4+T细胞中的Th1型细胞和CD8+T细胞中的Tc1型细胞可释放IL-2、IFN-γ等MHCⅠ类分子来刺激NK细胞和CTL细胞活化，激活单核细胞、巨噬细胞和NK细胞介导的肿瘤细胞杀伤途径，促进肿瘤细胞凋亡；而CD4+T细胞中的Th2型细胞和CD8+T细胞中的Tc2型细胞可分泌IL-4、IL-6、IL-10等MHCⅡ分子来抑制MHCⅠ类分子的表达，降低抗原递呈能力，影响CTL对肿瘤抗原的识别，使肿瘤细胞逃避特异性CTL的杀伤作用[13]。IL-10在介导免疫耐受方面具有重要作用。Th1、Th2型细胞因子水平及比例变化在机体免疫调节中具有重要意义, Th2向Th1漂移可促进抗肿瘤效应，若Th1/Th2比例向Th2偏移则会造成免疫抑制状态，干扰抗肿瘤免疫反应，有可能发生肿瘤细胞的免疫逃避[14]。

肾癌患者免疫功能缺陷和紊乱, CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+比值明显降低CD8+T细胞水平升高[15]。本研究结果显示，肾癌患者射频消融术及根治性手术1周，各种细胞因子的表达较术前均有明显上升，且2组患者细胞因子水平相当，但在术后1个月及3个月后, 2组患者血清细胞因子水平出现显著性差异。其可能原因为：术后1周时由于手术过程中的创伤、出血、应激等因素可导致机体不同程度的免疫功能紊乱以及术后炎性反应导致了细胞因子的大量释放，因此在1周时未表现出显著性差异，当术后1个月患者细胞因子水平的差异才逐渐表现出来，根治组患者基本恢复到术前水平, RFA组IFN-γ水平明显升高, IL-6、IL-10水平降低。

临床实验[16]表明, IFN-γ水平升高有助于机体抗肿瘤免疫功能的恢复，促进肿瘤细胞的凋亡效应; IL-4可诱导肿瘤免疫并可排斥已形成的恶性肿瘤; IL-6水平的降低有利于解除机体的免疫抑制状态，增强免疫功能; IL-10水平的下降还能刺进Th1细胞及其分泌的细胞因子的作用，提高其抗原递呈能力，减少对肿瘤细胞的免疫耐受[17]。本研究中RFA治疗后肾癌患者血清IFN-γ水平明显升高, IL-6、IL-10水平降低，这种细胞因子的改变提示RFA治疗可以上调患者体内Th1型细胞因子的表达，同时抑制患者Th2型细胞因子的表达，促进Th1/Th2比例向Th2逆转，增强了肾癌患者的机体抗肿瘤免疫反应，与国外报道一致[18]。由于本文中检测的免疫指标有限，随访时间较短，因此需要加大标本量及检测指标进一步研究其内在关系，使之与临床关系更加确定。

综上所述，分析肾癌患者治疗前后的免疫相关细胞因子水平可以探查肾癌患者机体的免疫状态，为肾癌的综合治疗、疗效观察、手术方法评价及预后判断等提供了新的思路。

参考文献

[1]仉洁, 钟理, 石伟, 等. 肾细胞癌免疫治疗的研究进展[J] .中国肿瘤生物治疗杂志, 2013, 20(1): 120.

[2]杨丰强, 刘敏, 朱凯, 等. 肾癌患者血清中可溶性人类主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A蛋白的表达和临床意义[J]. 上海医学, 2013, 36(7): 880.

[3]Yamkado K, Nakatsuka A, kobayashi S, et al. Radiofrequency ablation combined with renal arterial embolization for the treatment of unresectable renal cell carcinoma larger than 3.5cm: initial experience[J]. Cardiovaasc Intervent Radiol, 2006, 29: 389.

[4]Topalian S, Weiner G, Pardoll D.Cancer immunotherapy comes of age [J]. J Clin Oncol, 2011, 29(36): 4828.

[5]鲍镇美. 肾癌的生物治疗[J]. 实用肿瘤杂志, 2010, 15: 7.

[6]Cheng C, Qu Q X, Shen Y, et al.Overexpression of B7-H4 in tumor infiltrated dendritic cells[J]. J Immunoassa Immunochem, 2011, 32(4): 353.

[7]马登扬, 陈挺, 蒋悦, 等. 干扰素α(IFN-α)和白细胞介素2(IL-2)联合应用预防肾癌根治术后复发和转移的远期效果评价[J]. 海峡药学, 2013, 25(6): 59.

[8]边宝娟. 特发性肾病综合征血清IL-2、IL-4、IL-6的临床意义[J]. 现代医院, 2011, 11(3): 10.

[9]赵国志, 刘阳, 赖永通, 等. 检测血清可溶性白介素- 6 受体的动态变化在肾移植中的临床应用及其价值[J]. 重庆医科大学学报, 2013, 38(3): 300.

[10]余丽芳, 高建飞, 章必成. 辅助性T细胞9与肿瘤免疫[J].临床误诊误治, 2013, 26(6): 102.

[11]Ljungberg B, Cowan N, Hanbury D, et al. EAU guidelines on renal cell carcinoma: the 2010 update[J]. Eur Urol, 2010, 58: 398.

[12]Topalian S L, Weiner G J, Pardoll D M.Cancer immunotherapy comes of age [J].J Clin Oncol, 2011, 29: 4828.

[13]陈伟, 张金平, 王林辉, 等. 局限性肾透明细胞癌术后应用干扰素辅助治疗免疫功能分析[J]. 第二军医大学学报, 2012, 33(9): 1028.

[14]阎永贞, 那可, 魏晓东, 等. 肿瘤免疫逃逸机制的研究进展[J]. 复旦学报: 医学版, 2013, 40(5): 619.

[15]McAchran S, Lesani O, Resnick M. Radiofrequency ablation of renal tumors: past, present, and future[J].Urology, 2005, 66(5): 15.

[16]王丹凤, 时燕萍. 子宫肌瘤与机体免疫功能相关性探讨[J].辽宁中医药大学学报, 2012, 6(11): 100.

[17]于春宝, 左云, 王俊玲, 等.肺结核病人细胞免疫功能的研究[J].临床肺科杂志, 2008, 13(2): 138.

[18]Mickisch G H. Rational selection of a control arm for randomised trials in metastaic renal cell carcinoma[J]. Eur Urol, 2003, 43(6): 670.

Expressions and significance of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 in treatment of patients with renal cell carcinoma

WEI Xuefei, XU Pei, CHEN Zairong,GUO Wanhua

(DepartmentofNuclearMedicine,NanjingDrumTowerHospitalAffiliatedtoMedical

CollegeofNanjingUniversity,Nanjing,Jiangsu, 210008)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the expressions and clinical significance of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 before and after operation in patients with renal cell carcinoma by treatment of radiofrequency ablation and radical operation. MethodsELISA was used to detect the levels of serum IFN-γ, IL-4, IL-6 and IL-10 before operation and one week, one month and three months after operation in 120 patients with renal cancer. ResultsLevels of IFN-γ、IL-6、IL-10 increased significantly one week after operation in both of RFA group and radical operation group (P<0.05). IFN-γ increased significantly one month and three month after operation in the RFA group (P<0.05), while IL-10 increased significantly one month after operation in the radical operation group (P<0.05). There was no significant difference of IL-4 level before and after operation in both groups (P>0.05). ConclusionDetection of cytokine levels before and after treatment in patients with renal cancer is beneficial for monitoring disease development, evaluating surgical effects and judging prognosis.

KEYWORDS:interferon-γ; interleukin-4; interleukin -6; interleukin-10; renal cell carcinoma

通信作者:郭万华, E-mail: wanhuaguo@163.com

基金项目:国家自然科学基金资助项目(81171363)

收稿日期:2014-08-20

中图分类号:R 692

文献标志码:A

文章编号:1672-2353(2015)07-068-03DOI: 10.7619/jcmp.201507019