朝阳地区海产品副溶血性弧菌污染情况检测

冀 威

(辽宁省朝阳市动物疫病预防控制中心 122000)



朝阳地区海产品副溶血性弧菌污染情况检测

冀 威

(辽宁省朝阳市动物疫病预防控制中心 122000)

为了解朝阳市鲜冻水产品副溶血性弧菌污染状况，为预防副溶血性弧菌食物中毒提供科学依据。结果从3类140份鲜冻水产品中检出75株副溶血性弧菌，检出率为53.6%。在朝阳市售水产品中存在副溶血性弧菌污染，建议加大对水产品的监督检查，提示在细菌性食物中毒的调查中，如食用了水产品，应考虑副溶血性弧菌污染。

水产品；副溶血性弧菌；检测

1 生物学特性

副溶血性弧菌(VP)属弧菌科，是一种嗜盐革兰阴性致病菌，常存在于近海岸的海水、海底沉积物、鱼虾贝壳类海产品中。海产品副溶血性弧菌带菌率的种系差异主要取决于寄主的生活习性和摄食方式。温度也是VP繁殖的重要影响因子，直接影响海产品中VP的生长繁殖。

2 副溶血性弧菌的危害

副溶血性弧菌于1950年从日本一次暴发性食物中毒中分离发现。该菌为海产品中常见菌，主要引起食物中毒和急性腹泻，尤以日本、东南亚、美国及我国台北地区多见，也是我国大陆沿海地区食物中毒中最常见的致病菌。

3 材料与方法

3.1 样品采集

样品来源本次调查于2009年进行。用随机抽样的方法采集朝阳市各市场和大型超市零售的新鲜鱼虾贝，共采样3次，采样时间分别为8月、9月、10月，每次分别随机采取海水鱼、虾、贝类。样品采集后1～2h内送实验室检验。所采集的海水鱼包括鲳鱼、小黄鱼、梅鱼、白菇鱼、黄菇鱼、带鱼6种鱼，各取样10份。海水虾包括南美白对虾、日本对虾、斑节对虾、红虾和刀额新对虾5种虾，各取样10份。贝类包括扇贝、蛎子、蚬子3种贝，各取样10份。3类共140份鲜冻水产品。

3.2 试剂

试剂有3%的氯化钠碱性蛋白胨水、TCBS琼脂、3.5%氯化钠三糖铁琼脂(TSI)、3.5%氯化钠胰酪胨大豆琼脂(TSA)、嗜盐性胰酪胨肉汤，均由北京路桥有限责任公司提供。弧菌显色培养基由法国科玛嘉公司生产生化试剂由法国梅里埃公司生产。

3.3 主要仪器

主要仪器有均质器及无菌均质袋、电热恒温培养箱。

3.4 方法

3.4.1 增菌

鱼类以无菌操作秤取表面组织、肠、鳃、贝壳类先在符合生活饮用水标准的流水下洗刷外壳并甩干，无菌操作打开外壳，取全部内容物，均无菌剪碎。

虾类：取样部位为腹部内的肌肉。将虾在流水下冲洗，摘去头胸节，用灭菌剪子剪除腹节与头胸节连接处的肌肉，然后挤出腹节内的肌肉。秤取25g样品，加入225mL的碱性蛋白胨水中，混匀，置37℃恒温箱培养18h。

3.4.2 分离培养

用接种环取上述培养后的碱性蛋白胨水增菌液，划线接种于TCBS选择性琼脂平板,置37℃培养24h 。

3.4.3 鉴定

每板挑取2～3个可疑菌落，分别划线科玛嘉显色琼脂平板上，置37℃培养24h。在科玛嘉显色琼脂平板上，副溶血性弧菌为中等大小紫红色圆形隆起，混浊不透明的菌落。将科玛嘉显色琼脂平板上可疑菌落穿刺接种TSI，37℃培养24h，副溶血性弧菌在TSI上产生碱性斜面(红色)、酸性底部(黄色)，不产气，有动力，不产H2S，琼脂内轻微混浊。同时进行氧化酶试验，划线TSA，置42℃培养24h，副溶血性弧菌生长。副溶血性弧菌为氧化酶阳性。将TSA培养物进行耐盐试验，结果符合在无盐和10%盐胨水中不生长，7%盐胨水中生长特征。

涂片镜检：将可疑菌落涂片，进行革兰氏染色，镜检观察形态。副溶血性弧菌为革兰氏阴性，成棒状、弧状、卵圆状等多形态，无芽孢，有鞭毛。

4 实验结果

本实验共采集3类140份样品，检出副溶血性弧菌75株， 检出率为53.6%。鱼类检测份数各10份，鲳鱼、小黄鱼、梅鱼、白菇鱼、黄菇鱼、带鱼检测菌株数分别为5份、7份、6份、8份、7份、7份。平均检出率66.7%，3类样品中检出率最高。贝类产品监测份数各10份，扇贝、蛎子、蚬子检测菌株数分别为3份、1份、1份，平均检出率16.7%，相对较低。虾类检测份数各10份南美白对虾、日本对虾、斑节对虾、红虾、刀额新对虾检测菌株数分别为5份、6份、7份、8份、4份，平均检出率60%。

由此可见，受检的海产品的副溶血性弧菌污染较严重。从不同种类看鱼类、虾类污染较贝类高，从不同标本整体污染情况看，鱼类、虾类样品比贝类高。说明抽检的海产品均存在不同程度的副溶血性弧菌污染，提示应加强卫生监测，加强科学食用海产品的卫生安全宣传。

5 结论

副溶血性弧菌是海产品中常带菌种，常存在于近海岸的海水、海底沉积物、鱼虾贝壳类海产品中。本地海产品副溶血性弧菌带菌含量较高，以鱼类污染最为严重。温度是副溶血性弧菌繁殖的重要影响因子，直接影响海产品中副溶血性弧菌的生长繁殖。