ELISA法梅毒抗体检测与TRUST试验在梅毒诊断中的应用价值

喻甫国

(重庆市万州区中医院，重庆 404000)

ELISA法梅毒抗体检测与TRUST试验在梅毒诊断中的应用价值

喻甫国

(重庆市万州区中医院，重庆 404000)

目的 探讨ELISA法梅毒抗体检测与TRUST试验在梅毒诊断中的应用价值。方法 择取行梅毒血清学试验的120例患者，留取空腹静脉血并分离血清，均同时进行酶联免疫吸附法(ELISA)和甲苯胺红不加热法(TRUST)检测，并利用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法进行确证。结果 共检测血清标本120例,采用TPPA法确诊36例。TRUST法检出24例阳性,其中22例经TPPA确诊阳性,2例为假阳性,检测敏感度为61%(22/36),检测特异性为92%(22/24)；ELISA法检出37例阳性,其中34例经TPPA确诊为阳性,3例假阳性,检测敏感度为94%(34/36),检测特异性为92%(34/37)。ELISA法血清标本阳性率、检测敏感性显著优于TRUST法(P<0.05)。结论在梅毒诊断中，ELISA法敏感性优于TRUST法，有助于提高梅毒诊断准确率，对梅毒治疗及预后判断具有至关重要的作用，值得临床广泛推广应用。

ELISA法；梅毒抗体检测；TRUST试验；梅毒

梅毒作为一种常见的性传播疾病，多因梅毒螺旋体感染所致，其传播方式主要包括性行为传播、血液传播和胎盘垂直传播。在临床上，梅毒症状较为复杂，存在多样化特征。当该病原体入侵人体后，通过血液循环及淋巴系统可播散至全身，可对全身脏器与组织形成侵犯作用，具有较大的危害性。近几年，梅毒发病率呈逐年上升态势，特别是发展中国家患病率极高。从某种角度上来讲梅毒患者属于梅毒关键传染源，强化梅毒早期诊断与治疗对改善患者预后具有重要的作用[1]。目前，针对诊断梅毒多施以梅毒血清学检测，包括甲苯胺红不加热血清试验、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验、酶联免疫吸附试验等，其中前者属于非特异性试验，后两者属于特异性试验[2]。本研究择取我院2010年3月—2014年3月行梅毒血清学试验的120例患者为研究对象，采用ELISA法、TRUST法进行检测，旨在探究这两种方法在梅毒检验中的应用价值。

1 临床资料

1.1 一般资料 120例中男78例，女42例；年龄22～46(34.67±2.68)岁。

1.2 检测方法

1.2.1 试剂选择 择取TP-ELISA试剂盒(厦门英科新创科技有限公司产品)、TRUST试剂盒(上海荣盛生物药业有限公司产品)、TPPA试剂盒(富士瑞必欧株式会社产品)，2NCU/mL梅毒质控血清在重庆市临床检验中心提取。所有试剂均于有效期内使用。

1.2.2 仪器选择 采用科华ST-360酶标仪、科华ST-36W洗板机、微量移液器、科恒37℃恒温水浴箱等设备。所有设备均可正常应用。

1.2.3 方法 参照试剂盒内说明书进行实际操作。120例血清标本同时应用ELISA法与TRUST法进行检测，检测阳性标本均应用TPPA法进行确证。

1.3 观察指标 对比分析两种检测方法阳性检出率及特异性与敏感性差异。

1.4 统计学方法 应用SPSS19.0统计学软件对上述资料进行数据分析，计数资料采用2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

120例中经由TPPA法确诊36例阳性。ELISA法检出37例阳性,34例确诊阳性,3例假阳性,敏感度为94%,特异性为92%(34/37)；TRUST法检出24例阳性,22例确诊阳性,2例假阳性,检测敏感度为61%(22/36),检测特异性为92%(22/24)。ELISA法血清标本阳性率、检测方法敏感性显著优于TRUST法(P<0.05)。

3 讨 论

由于梅毒具有较大的危害,且传染性相对较大,症状呈多样化,故临床极其容易出现漏诊或误诊等现象。同时，与正常人群比较，梅毒患者艾滋病感染危险性上升5倍左右。一般而言，梅毒具有较大的传染性，且潜伏期较长，隐性与二期梅毒临床多为皮肤表现、无明显症状,往往容易忽略。因此，术前或输血前必须要强化梅毒螺旋体检测。通常人体感染梅毒后2周左右,显现血清学反应。

在临床上，梅毒检验方法相对较多，各种方法都具有自身独特的临床应用价值，如何科学择取这些方法已成为了临床实验室研究的重点问题。据美国疾病预防中心表示，在进行梅毒试验时以TP特异性抗体检测为初筛方法，可监测梅毒疗效，表明特异性试验已成为了一种有效的方法。

ELISA法主要利用双抗原夹心法与酶联免疫吸附测定法实验原理，对TP特异性抗原进行重组，纯度较高，已成为了当前梅毒血清学诊断试验的有效方案。就ELISA法而言，其检测对象为梅毒IgG与IgM混合抗体，具有较高的特异性与敏感性，一次可对多份样本进行综合检测，以酶标仪为依据，最终可对结果进行判断，操作异常简便，试剂廉价[3]。一般而言，检测结果都具有客观性，将原始数据输入计算机，可实现长期保存的目的。但在临床应用中，ELISA法也存在一些缺陷，梅毒特异性抗体显现早，而消失较为迟缓，即使通过抗梅毒治疗，仍可发现特异性抗体。特定状况下，呈终生检出状态。由此可见，ELISA法阳性仅表明曾经被感染或正在感染，无法成为最终疗效监测方法。

TRUST法主要是指将VDRL抗原置入附有甲苯胺红溶液中进行炼制而成，可对血浆或血清中的反应素进行检测，操作方法简便，结果检出十分迅速，在梅毒疗效观察、再感染、复发诊断中具有重要的应用作用。如针对先天性梅毒而言，可采用TRUST法进行检测，每间隔30d检测1次，持续半年后对反应素效价变化进行观察。若效价呈稳定或增高状态，提示为先天性梅毒；若抗体源自母体IgG，一般2个月左右会消失[4]。但TRUST法亦存在不足之处，主要表现在敏感性相对较差，易耽误临床治疗，不利于医疗质量的提高。此外，输血后无法对患者感染责任进行界定，风险较大。

据报道，以Ⅰ期与潜伏期梅毒为研究对象，TRUST方法敏感性相对较低，且待晚期梅毒患者治疗后，其结果有可能呈阴性，表明在早期与晚期梅毒辅助诊断中不宜采用TRUST方法[5]。但TRUST方法操作较为简便，试剂廉价，同时检测时间较短，无需特定仪器设备，并能对抗体滴度进行测定，属于梅毒患者治疗效果的观察指标。若患者治疗显效，TRUST测定滴度呈下降趋势，或转为阴性。因此，在临床梅毒疗效观察与复查中可采用TRUST方法。

而与ELISA、TRUST比较，TPPA的特异性与敏感性更胜一筹，临床上往往应用于梅毒确诊试验，并可对效价进行测定，但由于操作异常复杂，时间漫长，试剂价格高昂，故难以进行大量标本筛查。同时，TPPA法与ELISA方法具有一致性，以梅毒IgG与IgM混合抗体为主要检测对象，无法对疗效进行判定，故在ELISA或TRUST阳性测定后的确诊试验中应用广泛。

本研究结果显示，ELISA法特异性、敏感性高,与TPPA法具有一定的相关性，但也具有假阴性或假阳性，多因梅毒螺旋体入侵人体后，梅毒抗体表面抗原刺激机体形成梅毒螺旋体特异性抗体，而某些患者血清中存在内源性物质，可故对ELISA检测结果具有一定的影响。同时，抗体与抗原间存在交叉反应，于ELISA试验中易形成非特异性吸附作用，最终诱发假阳性。而检验人员的操作水平及抗体效价下降也易对测定结果产生影响。

此外，本研究发现TRUST敏感度低,特异性高，与黎金凤等[6]学者研究结论存在差异(灵敏度与特异性均达80%左右)，多因病毒性肝炎、活动性肺结核、硬皮病、系统性红斑狼疮、类风湿等各种疾病易对TRUST测定结果产生影响，导致结果出现假阳性。因此，标本来源属于TRUST特异性与敏感性的重要影响因素。

而经由临床实践证实，联合TRUST与ELISA两种检测方法，可减少结果假阳性率，为临床诊断与疗效判定提供准确依据。TRUST法与ELISA法联合检测主要存在4个方面的优点：①试剂成本相对低廉，试剂易长期保存，且稳定性高，输血后纠纷少；②操作方法简便；③检测结果在临床诊断与疗效判定中具有重要的作用，于梅毒潜伏期即产生梅毒特异性抗体，故在梅毒早期辅助诊断中值得广泛应用；④联合两种检测方法，可促使梅毒患者得到及时有效治疗。当检测数据不一致时，可采用TPPA方法进行复测，检验人员必须要强化与临床医生的交流与沟通，建议医生从患者临床症状、病史、体征等方面出发，以此作出准确诊断，从而将生物学因素诱发的假阳性排除，并强化疑似患者定期复查[7]。《全国临床检验操作规程》提示，梅毒TP试验阳性仅表明所测对象存在抗TP抗体或抗类脂抗体，不属于患者梅毒螺旋体感染判断的金标准，而阴性结果也无法完全将梅毒螺旋体感染排除在外，故测定结果要综合临床分析[8]。

综上所述，在梅毒检验中，ELISA法与TRUST法各自具有独特的临床应用价值，综合两种检测方法，可降低早期潜伏期梅毒漏诊率，将生物学原因导致的假阳性排除，便于梅毒确诊疗效观察。

[1] 熊文翠,马雅英,刘士君.梅毒血清试验对梅毒诊断及疗效的临床价值[J].浙江医学教育,2013，12(6):55-57

[2] 高凯.梅毒检测的ELISA法、TPPA法、TRUST法比较[J].中国医药指南,2013，11(34):108-109

[3] 林苹苹,吴亚玲,董杰.ELISA法和TRUST法在梅毒筛查中的应用[J].浙江预防医学,2011，23(1):94-95

[4] 王晓萍,涂彩霞,漆巍庆.TP-TRUST与TP-ELISA法检测梅毒结果回顾分析[J].实验与检验医学,2011，29(5):570-571

[5] 高风兰.梅毒ELISA法检测RPR、TRUST试验比较及其在输血检测中的临床意义[J].中国医药指南,2012，10(9):442-443

[6] 黎金凤,陈远平.不同梅毒血清学检测方法比较及临床应用价值[C]. 中华医学会、中华医学会检验分会、中国医院协会临床检验管理专业委员会.中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编，2011:1-1

[7] 吴丽婷,陈立刚,林哲.ELISA法与TRUST法、胶体金法检测梅毒抗体的临床应用和方法学评价[J].海南医学,2010，12(22):57-59

[8] 花南霞,苏志文.TP-ELISA法与TRUST法同步联合检测在梅毒诊断中的临床应用[J].检验医学与临床,2012，9(16):2079-2080

10.3969/j.issn.1008-8849.2015.16.033

R446.6

B

1008-8849(2015)16-1798-02

2014-07-20