常见食源性吸虫病及其诊治进展

刘 君，程训佳，潘孝彰

因生食或半生食含有感染期寄生虫的食物而感染的寄生虫病，称为食源性寄生虫病，如该寄生虫为吸虫，则导致食源性吸虫病（food-borne trematodiasis,FBT）。FBT也是被忽视的热带病（neglected tropicaldiseases,NTDs）系列的一类疾病[1-2]。与其他NTDs一样，由于这类疾病长期主要在贫穷落后的部分区域流行，因而一直不被重视。但随着全球经济的发展及交通的便捷，食物的生产、加工、运输与消耗呈现一体化，导致FBT患病人群数量增加的趋势。目前全世界90%的水产品由亚洲提供，随着淡水产品在全球范围的消耗，与淡水鱼虾及淡水植物关系密切的FBT流行区域同步出现上升趋势[3]。

常见的FBT的病原体包括：华支睾吸虫（肝吸虫）、肝片形吸虫、巨片形吸虫、猫后睾吸虫、麝猫后睾吸虫、卫氏并殖吸虫及布氏姜片吸虫。人患FBT是因食入含有囊蚴的食物或饮入被囊蚴污染的水而感染。不同种类的吸虫在人体寄生的部位不同，其中华支睾吸虫、肝片形吸虫、巨片形吸虫、猫后睾吸虫及麝猫后睾吸虫寄生于肝脏，引起肝脏吸虫病；卫氏并殖吸虫寄生于肺，引起肺吸虫病；布氏姜片吸虫寄生于肠道，引起肠吸虫病。不同种类吸虫病的临床表现和诊断方法不尽相同，本文主要介绍

1 食源性吸虫的生活史

肝脏吸虫、肺吸虫和肠吸虫3类吸虫生活史不尽相同。当成虫在人体内发育成熟后在人体内排出虫卵，虫卵随粪便或痰液进入外界淡水环境，在淡水螺体内进行无性增殖，经胞蚴、雷蚴发育为尾蚴，从螺体内逸出。不同虫种的尾蚴进入淡水后发育过程有所不同，华支睾吸虫的尾蚴侵入淡水鱼虾的体内，在其肌肉内发育为囊蚴，人或其他食肉动物在食入生或半生的鱼虾后感染。肝片形吸虫、巨片形吸虫及布氏姜片吸虫的尾蚴进入淡水后，在水生植物或其他物体甚至在水体中发育成囊蚴，当人或其他动物食入或饮入被囊蚴污染的植物或水而被感染。肺吸虫的尾蚴从螺体内逸出后，钻入淡水蟹及蝲蛄体内，在其肌肉内发育为囊蚴，当人或其他动物食入生或半生的淡水蟹及蝲蛄时便被感染。

2 几种常见的FBT

2.1 肝脏吸虫病

2.1.1 疾病概述 可寄生在人体肝脏的食源性吸虫主要有华支睾吸虫、肝片形吸虫、巨片形吸虫、麝猫后睾吸虫和猫后睾吸虫5种。它们寄生在人体肝脏的胆管和胆囊等部位，寄生后是否出现临床症状取决于感染吸虫的种类、数量、寄生部位及宿主的免疫反应。多数患者轻度感染时临床症状轻，不易被察觉；中度感染时可出现发热、疲倦、厌食及胃肠不适等症状；重度感染时可出现严重腹泻，或腹泻与便秘交替出现以及恶心、胆绞痛、消化不良、营养不良及贫血等症状，还可导致胆石症、胆汁淤积、胆管炎、胆囊炎、肝脓肿、肝硬化、胰腺炎和肝炎，更为严重的是，华支睾吸虫和麝猫后睾吸虫还可引起胆管癌[3-6]。

虽然目前关于胆管癌的发病机制还不确定，但寄生虫对胆管的刺激是重要因素[7-10]。国际癌症研究署分别在1994年和2009年确定麝猫后睾吸虫和华支睾吸虫是两种明确的致癌病原体[11-12]。胆管癌是食源性吸虫导致人体死亡常见的疾病，而且当胆管癌与肝脏吸虫病并存时，症状混杂不易辨别，给及时诊断带来困难[13]。然而猫后睾吸虫和肝片形吸虫不具致癌性[11-12,14]。肝片形吸虫可在人体引起异位寄生，以皮肤、眼、腹部、心脏等部位常见，在极少情况下还可导致宿主死亡[15]。

2.1.2 检测方法 肝脏吸虫病最常用的诊断方法是粪检法，虽然这种方法具有操作简单、取样方便、无创伤的优点，但直接涂片法常因虫卵数量少、体积小而导致检出率低。改良福尔马林-醋酸乙酯浓集法、改良加藤涂片法和斯托尔稀释虫卵计数法可提高检出率[16-18]。但在虫体未发育成熟尚未排虫卵、感染强度不大或胆管堵塞后虫卵排不出来的情况下，粪检法诊断的阳性率会明显降低。并且粪检法对检验人员要求较高，尤其是对于肝脏吸虫病患者中大多数的轻度感染者的诊断尤其重要。当患者体内寄生的虫荷低于20条或当检测的粪便中虫卵数低于1000个/g时，检出率将下降20%[19]。检获虫卵不仅可通过粪便，还可通过鼻胆管、经皮肝穿刺胆道引流或经十二指肠引流获得。当使用驱虫药物时也可以检获成虫。

目前一些血清学方法也用于诊断肝脏吸虫病，如皮内试验、免疫电泳、间接血凝试验、间接荧光抗体试验和间接酶联免疫吸附试验等[20-22]。间接酶联免疫吸附试验在血清学诊断中最为常用，但由于虫体抗原成分多，导致这种方法的灵敏度和特异度不稳定，但检测的灵敏度及特异度明显高于粪检法[20,23-24]。目前酶联免疫吸附试验可用重组抗原检测血清抗体[24-25]。组织蛋白酶L的前肽、谷胱甘肽-S-转移酶、腺苷酸激酶3、磷酸甘油酸酯激酶、组织蛋白酶B/F、豆荚蛋白和咪基牛磺酸激酶诊断肝脏吸虫病较粪检法有更好的灵敏度和特异度[26-28]。目前，通过酶联免疫吸附试验检测尿液和唾液等非粪便中的抗原被认为是一种潜在的血清学诊断后睾吸虫病方法[29]。基于抗体检测方法的一个缺点是不能区分患者在检测时是否仍在感染。克服这一缺陷可通过使用抗原诊断确定人体内是否有虫体[30]。单克隆抗体检测及粪便抗原检测可以检测出宿主的感染状况，即使宿主体内虫荷很低，粪检法结果为阴性。因此这两种方法对轻度感染者进行诊断及在治疗后对治疗效果进行评估特别适合。

分子生物学方法也在不断开发用以诊断肝脏吸虫病。目前华支睾吸虫和猫后睾吸虫的部分基因可用于诊断，如卫星DNA、内转录区（internal transcribed spacer,ITS）1、ITS2和线粒体 DNA 等[31]。PCR及实时PCR（real-time PCR,RT-PCR）诊断肝脏吸虫病特异度高但灵敏度变化大，这与感染的强度有关。如猫后睾吸虫的虫卵达到1000个/g粪便时，其灵敏度为100%，当虫卵密度为200个/g粪便时，灵敏度只有68%[32]。猫后睾吸虫的反转录转座子作为一种新的PCR诊断肝片形吸虫病的标记物具有很高的灵敏度和特异度[33]。特异性引物PCR可区分猫后睾吸虫、麝猫后睾吸虫及华支睾吸虫[34-35]。另一些方法或基因标记物如PCR、限制性片段长度多态性PCR、多重PCR、RT-PCR及多重连接依赖性探针扩增焦磷酸测序等可用以区别不同种类的肝脏吸虫[36-37]。各种分子生物学的诊断方法正在不断研究，用于在流行区进行肝脏吸虫病的诊断及治疗后的疗效评估[38]。

2.1.3 治疗 对于肝脏吸虫病的治疗，因虫种不同而异，针对华支睾吸虫可使用的药物较多，常用的包括氯喹、六氯对二甲苯、吡喹酮和阿苯达唑等；而针对猫后睾吸虫和麝猫后睾吸虫，常用吡喹酮；针对肝片形吸虫和巨片形吸虫可使用三氯苯达唑和碘醚柳胺等。

2.2 肺吸虫病

2.2.1 疾病概述 肺吸虫病是由卫氏并殖吸虫寄生在肺部引起的疾病。该吸虫是最常见的可引起异位寄生的食源性吸虫。异位寄生的部位或器官包括脑、皮肤、眼、腹部器官、生殖器或中枢神经系统等[39]。肺吸虫病可导致患者出现出血性肺炎、气胸、胸膜肺囊肿、肺脓肿等。严重的胸膜肺吸虫病症状与结核性肺炎、支气管肺炎及哮喘性肺炎相似，如慢性咯血、胸痛、呼吸困难等。卫氏并殖吸虫寄生在肺部后可长期无症状，多数患者在感染约半年时缓慢发病，病程较长，常见临床症状包括咳嗽、发热、血痰、食欲不振、胸痛、头痛及盗汗等，慢性感染时症状与肺结核病相似。肺吸虫病导致患者死亡的最常见的原因是由于寄生在脑部引起的病变，可表现为头痛、精神错乱、行为失常、脑膜刺激征、抽搐、偏瘫、视力障碍及脑出血。

2.2.2 检测及治疗 对于肺吸虫病的诊断可通过虫卵进行鉴定。但在患者痰液中检测虫卵灵敏度低，并且虫卵在患者感染2～3个月虫体成熟后才产出，因此在感染早期时诊断使用该法不可靠，而通过粪检法检获虫卵其灵敏度更低[40]。与肝脏吸虫病的诊断相似，目前血清学及分子生物学多种诊断方法用于诊断肺吸虫病，但同样存在抗原成分多、特异性引物少的问题，导致不同检测方法的灵敏度和特异度有所不同[40－41]。目前影像学诊断也逐渐在临床上用以诊断肺吸虫病，如计算机断层扫描和核磁共振成像等[42]。关于肺吸虫病的治疗，主要是在排除肿瘤等需鉴别诊断的疾病后，给予抗病原体治疗，可使用的药物包括吡喹酮和三氯苯达唑[43]。

2.3 肠吸虫病

2.3.1 疾病概述 能引起肠吸虫病的食源性吸虫主要是布氏姜片吸虫。布氏姜片吸虫在人体主要寄生在肠道，偶尔会引起异位寄生，极少数情况下可导致宿主死亡[15]。布氏姜片吸虫由于吸盘发达，吸附能力强，可导致被吸附部位的肠黏膜坏死脱落，发生炎症、出血及水肿而形成溃疡或脓肿，导致肠道梗阻及溃疡[6]。轻度感染者可无明显症状，寄生虫数量较多时常出现腹痛、腹泻及消化不良，患者排便量多，便稀薄而臭，或腹泻与便秘交替出现，甚至出现肠梗阻。在营养不良的患者中曾出现反复中毒感染的病例，尤其是儿童，可出现低热、消瘦、贫血、水肿、腹水以及智力减退和发育障碍，少数患者可因多器官衰竭而死亡。

2.3.2 检测及治疗 肠吸虫病的诊断目前仍以粪检法查获虫卵为“金标准”，但是寄生在人体肠道的寄生虫种类多，有些种类的虫卵形态相似，仅通过虫卵进行虫种的鉴定易造成误诊。并且粪检虫卵时易受到虫体发育成熟与否、粪便中虫卵的分布与数量及检测人员检测水平等因素的影响。由于布氏姜片吸虫寄生在肠道，对人体血清的影响不如肝脏吸虫和肺吸虫大，因此目前通过血清学方法和分子生物学方法诊断的报道还不多[44]。对于肠吸虫病的病原治疗，目前使用的药物有吡喹酮、硫双二氯酚、强氯扎胺和左旋咪唑等，一些植物提取物也被开发用于治疗[45]。

3 展 望

随着对FBT的研究，人们逐渐认识到这类疾病不仅具有危害大、流行广及诊断难的特点，并且有些种类寄生虫还可作为致癌因素对健康构成较大的危害。在对这些寄生虫病诊断研究过程中，结合其他学科不断开发出了灵敏度和特异度更高的诊断方法，虽然目前有些技术手段还不成熟，但可为将来的进一步研究发展奠定较好的基础。目前虽然已有一些药物可用于治疗FBT，但这些药物的不良反应及虫株对药物逐渐产生的耐药性影响其疗效，因此迫切须要寻求开发更高效低毒的药物。

[1]Utzinger J,de Savigny D.Control of neglected tropical diseases:integrated chemotherapy and beyond［J］.PLoSMed,2006,3(5):e112.

[2]Torgerson PR,de Silva NR,Fèvre EM,etal.The global burden of foodborne parasitic disease:an update［J］.Trends Parasitol,2014,30(1):20－26.

[3]Keiser J,Utzinger J.Food－borne trematodiases［J］.Clin Microbiol Rev,2009,22:466－483.

[4] 王姝雅.华支睾吸虫病的感染及流行病学分析［J］.中国卫生标准管理,2014,22:92－93.

[5] 刘国兴,吴秀萍,王子见,等.三种吸虫感染与胆管癌发病关系的研究进展［J］.中国寄生虫学与寄生虫病杂志，2010,28(4):301－305.

[6]Keiser J,Utzinger J.Emerging foodborne trematodiasis［J］.Emerg Infect Dis,2005,11(10):1507－1514.

[7]Lim JH.Liver flukes:the malady neglected［J］.Korean JRadiol,2011,12(3):269－279.

[8]Choi BI,Han JK,Hong ST,etal.Clonorchiasis and cholangiocarcinoma:etiologic relationship and imaging diagnosis［J］.Clin Microbiol Rev,2004,17(3):540－552.

[9]Sripa B,Kaewkes S,Sithithaworn P,et al.Liver fluke induces cholangiocarcinoma［J］.PLoSMed,2007,4(7):e201.

[10]Shimonishi T,Sasaki M,Nakanuma Y.Precancerous lesions of intrahepatic cholangiocarcinoma［J］.JHepatobiliary Pancreat Surg,2000,7(6):542－550.

[11][No authors listed].Infection with liver flukes(Opisthorchis viverrini,Opisthorchis felineus and Clonorchis sinensis)［J］.IARCMonogr Eval Carcinog Risks Hum,1994,61:121－75.

[12]Bouvard V,Baan R,Straif K,et al.A review of human carcinogens－Part B:biological agents［J］.Lancet Oncol,2009,10(4):321－322.

[13]Blechacz BRA,Gores GJ.Cholangiocarcinoma［J］.Clin Liver Dis,2008,12:131－150.

[14]刘倩,程娜,周岩,等.片形吸虫病研究进展［J］.中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2013,31(3):229－234.

[15]Fried B,Graczyk TK,Tamang L.Food－borne intestinal trematodiases in humans［J］.Parasitol Res,2004,93(2):159－170.

[16]Elkins DB,Haswell－Elkins MR,Mairiang E,etal.A high frequency of hepatobiliary disease and suspected cholangiocarcinoma associated with heavy Opisthorchis viverrini infection in a small community in north－east Thailand［J］.Trans R Soc Trop Med Hyg,1990,84(5):715－719.

[17]Hong ST,ChoiMH,Kim CH,etal.The Kato－Katzmethod is reliable for diagnosis of Clonorchis sinensis infection［J］.Diagn Microbiol Infect Dis,2003,47(1):345－347.

[18]Viyanant V,Brockelman WY,Lee P,et al.A comparison of a modified quick－Kato technique and the Stoll dilution method for field examination for Opisthorchis viverrini eggs［J］.JHelminthol,1983,57(3):191－195.

[19]Sithithaworn P,Tesana S,Pipitgool V,etal.Relationship between faecal egg count and worm burden of Opisthorchis viverrini in human autopsy cases［J］.Parasitology,1991,102(Pt2):277－281.

[20]Hong ST,Fang Y.Clonorchis sinensis and clonorchiasis,an update［J］.Parasitol Int,2012,61(1):17－24.

[21]Kim TY,Lee YS,Yun JH,etal.A case of probablemixed－infec－tion with Clonorchis sinensis and Fasciola sp.:CT and parasitological findings［J］.Korean JParasitol,2010,48(2):157-160.

[22]Wongratanacheewin S,Sermswan RW,Sirisinha S.Immunology and molecular biology of Opisthorchis viverrini infection［J］.Acta Trop,2003,88(3):195-207.

[23]Poopyruchpong N,Viyanant V,Upatham ES,et al.Diagnosis of opisthorchiasis by enzyme-linked immunosorbent assay using partially purified antigens［J］.Asian Pac JAllergy Immunol,1990,8(1):27-31.

[24]Wongsaroj T,Sakolvaree Y,ChaicumpaW,etal.Affinity purified oval antigen for diagnosis of Opisthorchiasis viverrini［J］.Asian Pac JAllergy Immunol,2001,19(4):245-258.

[25]Ruangsittichai J,Viyanant V,Vichasri-Grams S,et al.Opisthorchis viverrini:identification of a glycine-tyrosine rich eggshell protein and its potential as a diagnostic tool for human opisthorchiasis［J］.Int JParasitol,2006,36(13):1329-1339.

[26]Chen J,Xu H,Zhang Z,etal.Cloning and expression of 21.1-kDa tegumental protein of Clonorchis sinensis and human antibody response to it as a trematode-nematode pan-specific serodiagnosis antigen［J］.Parasitol Res,2011,108(1):161-168.

[27]Li S,Shin JG,Cho PY,et al.Multiple recombinant antigens of Clonorchis sinensis for serodiagnosis of human clonorchiasis［J］.Parasitol Res,2011,108(5):1295-1302.

[28]Li Y,Hu X,Liu X,etal.Serological diagnosis of clonorchiasis:us ing a recombinant propeptide of cathepsin L proteinase from Clonorchis sinensis as a candidate antigen［J］.Parasitol Res,2012,110(6):2197-2203.

[29]Sawangsoda P,Sithithaworn J,Tesana S,etal.Diagnostic values of parasite-specific antibody detections in saliva and urine in comparison with serum in opisthorchiasis［J］.Parasitol Int,2012,61(1):196-202.

[30]Sirisinha S,Chawengkirttikul R,Haswell-Elkins MR,etal.Evaluation of a monoclonal antibody-based enzyme linked immunosorbent assay for the diagnosis of Opisthorchis viverrini infection in an endemic area［J］.Am JTrop Med Hyg,1995,52(6):521-524.

[31]Qiao T,Zheng PM,Ma RH,et al.Development of a real-time PCR assay for the detection of Clonorchis sinensis DNA in gallbladder bile and stone samples from patients with cholecystolithiasis［J］.Parasitol Res,2012,111(4):1497-1503.

[32]Wongratanacheewin S,Pumidonming W,Sermswan RW,etal.Detection of Opisthorchis viverrini in human stool specimens by PCR［J］.JClin Microbiol,2002,40(10):3879-3880.

[33]Phung LT,Loukas A,Brindley PJ,et al.Retrotransposon OVRTE-1 from the carcinogenic liver flukes Opisthorchis viverrini:potential target for DNA-based diagnosis［J］.Infect Genet Evol,2014,21:443-451.

[34]Pauly A,Schuster R,Steuber S.Molecular characterization and differentiation of opisthorchiid trematodes of the species Opisthorchis felineus(Rivolta,1884)and Metorchis bilis(Braun,1790)using polymerase chain reaction［J］.Parasitol Res,2003,90(5):409-414.

[35]Le TH,Van De N,Blair D,et al.Clonorchis sinensis and Opisthorchis viverrini:development of a mitochondrial-based multiplex PCR for their identification and discrimination［J］.Exp Parasitol,2006,112(2):109-114.

[36]Sanpool O,Intapan PM,Thanchomnang T,et al.Rapid detection and differentiation of Clonorchis sinensis and Opisthorchis viverrini eggs in human fecal samples using a duplex real-time fluorescence resonance energy transfer PCR and melting curve analysis［J］.Parasitol Res,2012,111(1):89-96.

[37]Sun J,Xu J,Liang P,etal.Molecular identification of Clonorchis sinensis and discrimination with other opisthorchid liver fluke species using multiple Ligation-depended Probe Amplification(MLPA)［J］.Parasit Vectors,2011,4:98.

[38]Duenngai K,Boonmars T,Sithithaworn J,etal.Diagnosis of early infection and post chemotherapeutic treatment by copro-DNA detection in experimental opisthorchiasis［J］.Parasitol Res,2013,112(1):271-278.

[39]Gadkowski LB,Jason ES.Cavitary pulmonary disease［J］.Clin Microbiol Rev,2008,21(2):305-333.

[40]Procop GW.North American paragonimiasis(caused by Paragonimus kellicotti)in the context of global paragonimiasis［J］.Clin Microbiol Rev,2009,22(3):415-446.

[41]López-Caballero J,Oceguera-Figueroa A,León-Règagnon V.Detection of multiple species of human Paragonimus from Mexico usingmorphological data andmolecular barcodes［J］.Mol Ecol Resour,2013,13(6):1125-1136.

[42]Henry TS,Lane MA,Weil GJ,et al.Chest CT features of North American paragonimiasis［J］.AJR Am JRoentgenol,2012,198(5):1076-1083.

[43]Liu Q,Wei F,Liu W,et al.Paragonimiasis:an important foodborne zoonosis in China［J］.Trends parasitol,2008,24(7):318-323.

[44]Johansen MV,Sithithaworn P,Bergquist R,et al.Towards improved diagnosis of zoonotictrematode infections in Southeast Asia［J］.Adv Parasitol,2010,73:171-195.

[45]Abdel-Ghaffar F,Semmler M,Al-Rasheid KA,et al.The effects of different plant extracts on intestinal cestodes and on trematodes［J］.Parasitol Res,2011,108(4):979-984.