CIK治疗乙型肝炎研究进展

白尚星

CIK治疗乙型肝炎研究进展

白尚星

近年来, 细胞治疗已成为临床治疗乙型病毒性肝炎(乙型肝炎)的一种重要手段, 细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)作为一种新型、高效、广谱的免疫活性细胞, 在乙型肝炎治疗中得到广泛应用。本文就CIK的生物学特性、制备和临床应用做一综述。

细胞因子诱导；杀伤细胞；乙型病毒性肝炎

我国属乙型肝炎高地方性流行区, 每年死于肝硬化和肝癌等乙型肝炎相关疾病者达30余万例。乙型肝炎已成为严重危害我国人民健康的重要因素。目前对乙型肝炎的治疗缺少有效手段。最有效的是应用干扰素、拉米夫定等药物抗病毒治疗, 但其治疗反应率不高, 效果并不理想。细胞免疫治疗由于其安全、不良反应少、抗病毒活性高、增强机体免疫等特点成为治疗乙型肝炎的又一手段［1］。

细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killers, CIK)是外周血单个核细胞经多种细胞因子刺激产生的一群异质细胞, 兼有T 细胞强大的抗病毒活性与自然杀伤细胞(NK细胞)的非主要组织相容性复合物(MHC)限制性免疫杀瘤和抗病毒特点［2］。CIK还能分泌多种细胞因子, 提高机体的免疫能力,增强抗病毒能力, 在细胞治疗中前景越来越广阔。本文就近年来在CIK治疗乙型肝炎方面的相关研究作简要综述。

1 CIK细胞的生物学特性

CIK细胞是人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子如干扰素(IFN)、CD3单抗和白细胞介素-2(IL-2)等刺激后生成的一群异质细胞。Kim等［3］研究显示, 外周血CIK细胞含量很少, 细胞因子IL-2可促进其增殖。流式细胞仪检测CIK高表达CD3CD8和CD3CD56, 提示其具有T细胞的功能又具有NK细胞的功能。杀伤活性试验显示［4］, CIK能对多种肿瘤细胞如人红白血病细胞株K562、肝癌细胞株HepG2和人肺癌细胞株A549等起到杀伤作用。目前已有大量临床研究报道CIK应用于肿瘤治疗［5,6］。

2 CIK细胞的制备和扩增培养

CIK细胞来源于外周血单个核细胞, 常规培养方法是应用IFN-γ、CD3单抗和IL-2刺激使其大量增殖, IFN-γ能增加CIK的细胞毒活性, CD3单抗和IL-2能使T细胞活化并增殖。乔林邦等［7］在常规培养中加入重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)可抑制细胞, 增加T细胞生成。刘军权等［8］在常规培养中加入CD28mAb、IL-15和IL-21, 结果显示在CIK细胞培养体系中增加mAb、IL-15和IL-21, 细胞增殖能力增加, 细胞分泌IFN-Y量显著增高, 经不同刺激因子活化的CIK细胞对A549、MFC-7和HMEl细胞杀伤活性有明显增强。徐本玲等［9］在常规培养中加入重组人纤维连接蛋白(Retro Nectin, RN)结果显示用RN诱导的CIK细胞增殖速度快, 杀伤肿瘤细胞活性高, 细胞因子IFN-γ和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌量增多, 在无血清培养条件下可在短期内诱导出大量的具有生物学活性的CIK细胞。

3 CIK细胞应用于治疗乙型肝炎的临床应用

目前细胞免疫治疗乙型肝炎病毒(HBV)感染已取得一定的疗效。韩际奥等［10］对95例慢性乙型肝炎(CHB)患者随机分组, 自体静脉回输DC/CIK, 患者治疗后3、6个月时病毒载量显著下降, 治疗后1个月后, 患者血清IL-12水平显著高,提示细胞治疗对HBV有一定的抑制作用。苏海滨等［11］研究显示, 应用CIK细胞治疗慢性乙型肝炎患者, 随访52周后HBV-DNA显著下降。陈作严等［12］将50例慢性乙肝患者随机分成两组。治疗组30例, 接受CIK 细胞治疗一个疗程, 回输细胞数为(1.0~3.2)×1010, 对照组采用常规药物治疗。结果显示30例治疗组患者经CIK治疗后,的表达和细胞增殖倍数均明显增加。在近期的疗效观察中, 乙肝患者血清中HBV-DNA含量明显下降, 完全应答率>50%。陈宛丽等［13］应用CIK细胞治疗慢性乙型肝炎, CIK组12例和对照干扰素组21例, 疗程结束6个月后, 患者的谷丙转氨酶(ALT)及HBV-DNA复常率、HBeAg转阴率及HBeAb阳转率均高于干扰素治疗组患者。陈剑等［14］收集72例肝郁脾虚型HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者, 其中42例为CIK细胞治疗组, 30例为口服恩替卡韦(ETV)对照组, 研究表明CIK细胞治疗肝郁脾虚型慢性乙型肝炎患者在24周内是安全有效的,其抑制HBV-DNA作用较服恩替卡韦差, 但改善肝功能的作用与恩替卡韦相当, 且HBeAg阴转率及血清转换率明显优于对照组。韩际奥等［15］HBsAg致敏的DC-CIK具有较好抗病毒治疗效果, 治疗结束24周后患者病毒学应答总有效率可达63.6%, 其中4例HBV-DNA转阴, 转阴率12.1%。同时治疗后慢性乙型肝炎患者HBsAg浓度及ALT水平亦有所下降。

综上所述, CIK治疗乙型肝炎能够增加患者的免疫功能,提高抗病毒能力, 是治疗乙型肝炎感染的又一重要手段。

4 存在的问题与展望

虽然目前有关CIK细胞应用于治疗乙型肝炎研究结果令人鼓舞, 但在很多问题上仍然还存在颇多争议, 还有许多问题需要解决。如CIK培养用何种培养基、细胞移植数量、移植途径、移植时机、安全性以及不良反应症等仍需要进一步研究证实。

综上所述, 急需建立CIK的细胞治疗标准化方案来解决这些问题, 相信随着研究的深入, CIK细胞治疗标准化方案的建立、CIK在细胞治疗的应用前景会越来越广阔。

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10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.17.190

2015-02-26］

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