于吉锋,李江凌,王文贵,廖党金,魏 甬,李兴玉,林 毅,叶健强
(四川省畜牧科学研究院,成都610066)
·简报·
川藏黑猪与长白猪仔猪猪瘟母源抗体消长规律比较研究
于吉锋,李江凌,王文贵,廖党金,魏 甬,李兴玉,林 毅,叶健强
为探索川藏黑猪和长白猪的猪瘟免疫方法,本研究采用猪瘟阻断ELISA对0、1、4、7、10、20、25、30、35日龄时川藏黑猪与长白猪仔猪的猪瘟母源抗体水平进行了检测。结果显示,川藏黑猪仔猪和长白猪仔猪出生后哺母乳前的猪瘟母源抗体均为0,哺母乳后d1,猪瘟母源抗体分别为>210和28.2,合格率分别为100%和87%。4日龄和7日龄时,川藏黑猪仔猪的猪瘟母源抗体仍为≥210,合格率100%;长白猪仔猪的猪瘟母源抗体为28.4和27.4,合格率100%和83%;随后川藏黑猪仔猪的猪瘟母源抗体呈下降趋势,35日龄达到保护临界值(24.0);长白猪仔猪的猪瘟母源抗体下降更迅速,25日龄时其母源抗体水平已达临界值(24.0)。检测结果表明无论是母源抗体水平还是母源抗体持续时间,川藏黑猪与长白猪仔猪之间有较大差异,川藏黑猪仔猪猪瘟疫苗的首免时间应为35日龄,而长白猪仔猪猪瘟疫苗的首免时间应为25日龄。
猪瘟;母源抗体;消长规律;川藏黑猪;长白猪
(四川省畜牧科学研究院,成都610066)
猪瘟(classical swine fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的一种急性、烈性传染病,属我国一类动物疫病,每年因此造成的损失达数十亿计[1,2],严重威胁我国养猪业的发展。疫苗免疫接种是控制猪瘟最有效的方法之一,但其免疫抗体产生的水平,除了与疫苗本身有关,还与动物种类、品种等因素相关[3,4]。新生仔猪的免疫器官尚未发育成熟,通过吸食初乳可获得母源抗体,从而抵抗猪瘟病毒感染,但母源抗体对免疫疫苗会造成影响,初免过早会因母源抗体的中和作用造成免疫抗体水平低甚至免疫失败,初免过晚会导致仔猪暴漏在猪瘟疫病的威胁之中[5,6],因此确定最佳的首免日龄是预防仔猪感染猪瘟的关键。
不同品种猪的母源抗体在仔猪体内持续时间有一定差异,杜喜等[7]确定金华猪仔猪在28日龄进行猪瘟疫苗首免,李渤南等[8]研究证实烟台黑猪和鲁烟白猪仔猪的猪瘟母源抗体水平变化差异具有显著统计学意义,现有长白猪仔猪猪瘟首免日龄一般为21~25日龄。川藏黑猪(农01新品种证字第23号)是四川省畜牧科学研究院历经多年培育而成的一个新品种,具有产仔数高,肉质优、抗逆性强、生产效率高等突出优点。四川省是我国生猪养殖大省,长白猪也是四川省饲养的主要品种之一,本研究比较这两个品种仔猪猪瘟的母源抗体差异,为制定川藏黑猪与长白猪的猪瘟免疫程序提供科学依据。
1.1 材料
1.1.1 实验动物 分别选择年龄、胎次、饲养状况、环境条件相近且同一天分娩的5头健康川藏黑猪母猪和5头长白猪母猪,以及所产仔猪各25头,母猪产前猪瘟免疫抗体检测合格,其仔猪21日龄断乳。试验期间,参试猪均用该养猪场常规饲养方法饲养。1.1.2 疫苗及主要试剂 猪瘟疫苗为脾淋巴苗,中牧实业股份有限公司生产,批文号:兽药生字(2010)220051001;猪瘟抗体检测试剂盒(阻断ELISA)购自美国IDEXX公司。
1.2 方法
1.2.1 免疫方法 母猪在配种前2周免疫猪瘟脾淋疫苗4头份。
1.2.2 采血及血清制备 分别在仔猪0、1、4、7、10、20、25、30、35日龄时,每只前腔静脉采血2~3 mL,母猪耳源静脉采血2~3 mL(长白猪采集到25日龄时已达临界值,后续未继续采血检测)。将血液置入已编号无菌试管内,静置自然凝集析出血清,或500×g离心5 min取其上清液即血清,对分离血清立刻进行猪瘟抗体检测。
1.2.3 抗体检测 按猪瘟抗体检测试剂盒说明书操进行,将采集的血清进行猪瘟抗体阻断率检测。
1.2.4 猪瘟抗体效价的换算 抗体阻断率与抗体效价比较,参照该检测试剂盒说明书(见表1)。
1.2.5 评价标准 猪瘟抗体效价≥24判为抗体合格。
2.1 川藏黑猪母猪与长白猪母猪猪瘟免疫抗体效价川藏黑猪母猪和长白猪母的猪瘟免疫抗体水平分别在29.2~210和28.0~210,合格率均为100%(见表2),川藏黑猪母猪比长白猪母猪的猪瘟免疫抗体水平高,尤其是10~35日龄时川藏黑猪母猪的猪瘟免疫抗体水平显著高于长白猪母猪的猪瘟免疫抗体水平,但两者的免疫抗体水平均维持在较高水平并远远高于保护临界值(24.0)。
2.2 川藏黑猪仔猪与长白猪仔猪的猪瘟母源抗体两个品种仔猪的猪瘟母源抗体水平和合格率见表3,其母源抗体变化见图1。川藏黑猪仔猪和长白猪仔猪出生后哺母乳前的猪瘟母源抗体均为0,哺母乳后d1的猪瘟母源抗体分别为>210和28.2,合格率分别为100%和87%。4日龄和7日龄川藏黑猪仔猪的猪瘟母源抗体仍≥210,合格率100%,而长白猪仔猪的猪瘟母源抗体为28.4和27.4,合格率100%和83%。可见,两个不同品种仔猪虽然血缘差异较大,但通过吸食具有猪瘟高免疫抗体水平的母猪初乳,均可获得较高水平的母源抗体水平,这在初生仔猪抵抗猪瘟病毒感染中具有重要作用。随后,川藏黑猪仔猪的猪瘟母源抗体呈下降趋势即,合格率也呈下降趋势,35日龄达到保护临界值(24.0);长白猪仔猪的猪瘟母源抗体下降更迅速,25日龄时其母源抗体水平已达临界值(24.0),保护率也为47%。
2.3猪瘟抗体效价在24以上时才能抵抗猪瘟强毒侵害,因此在仔猪母源抗体降低到保护的最低临界值(抗体水平在24时)时进行首免是合理的,仔猪通过吸食初乳获得的母源抗体水平,无论是抗体水平还是持续时间,川藏黑猪和长白猪之间差异明显较大。川藏黑猪仔猪的猪瘟母源抗体水平较高并且持续时间较长,35日龄时达保护临界值,即猪瘟疫苗首免时间为35日龄;长白猪仔猪的猪瘟母源抗体水平相对川藏黑猪仔猪水平较低,25日龄时其母源抗体水平达保护临界值,即猪瘟疫苗首免时间为25日龄,这与其他研究结果基本一致[9]。两个品种仔猪的母源抗体水平的差异可能与川藏黑猪带有地方血源抵抗疫病能力较强有关,这一推测还需进一步研究证实。
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DYNATICS OF MATERNAL ANTIBODIES AGAINST CLASSICAL SWINE FEVER IN NATIVE SICHUAN-TIBET BLACK PIGS AND LANDRACE PIGS
YU Ji-feng, LI Jiang-ling, WANG Wen-gui, LIAO Dang-jin, WEI Yong, LI Xing-yu, LIN Yi, YE Jian-qiang
(Sichuan Academy of Animal Husbandry Sciences, Chengdu 610066, China)
In order to better understand immunization protocol of classical swine fever in native Sichuan-Tibet black pigs and imported Landrace pigs, maternal antibodies of piglets were monitored at day 0, 1, 4, 7, 10, 20, 25, 30 and 35 by the blocking ELISA. There were no maternal antibodies detected in piglets born to Sichuan-Tibet black sows and Landrace sows before suckling. However, the maternal antibodies were titrated to be >210or 28.2in one-day old piglets born to Sichuan-Tibet black sows or Landrace sows, respectively. At day 4 and 7, the maternal antibody titers were >210in Sichuan-Tibet black piglets while the titers were 28.4and 27.4in Landrace piglets. Afterwards, the titers declined to 24.2in 35 days-old Sichuan-Tibet black piglets and to 24.0in Landrace piglets. Obviously, the maternal antibodies dropped faster in Landrace piglets than Sichuan-Tibet black piglets. In conclusion, signif cant differences in titers and duration of maternal antibodies were detected between Sichuan-Tibet black piglets and Landrace piglets. These results suggested that the f rst immunization could be administered to 35 days-old Sichuan-Tibet black piglets but to 25 days-old Landrace piglets.
Classical swine fever; maternal antibody; dynamics; Sichuan-Tibet black pigs; Landrace
S852.651
B
1674-6422(2015)03-0061-04
2015-01-26
国家现代农业产业技术体系四川创新团队(SCCXTD-004);四川省农业科技成果转化项目(2013NC0016);四川省公益性科研院所基本科研项目(SASA2012A02、SASA2013A04、SASA2013B04)
于吉锋,男,硕士,助理研究员,主要从事动物传染病研究
廖党金,E-mail: Liaodjm@126.com