新疆巴州地区生鲜牛乳中β﹣内酰胺酶残留状况调查

帕提古丽·托乎提

（新疆巴州动物疾病控制与诊断中心，新疆库尔勒 841000）

新疆巴州地区生鲜牛乳中β﹣内酰胺酶残留状况调查

帕提古丽·托乎提

（新疆巴州动物疾病控制与诊断中心，新疆库尔勒 841000）

为了解巴州地区的生鲜牛乳中β-内酰胺酶（解抗剂）残留状况，保证生鲜牛奶卫生质量安全，2014年4月至10月，在巴州辖区内16个生鲜乳收购站、5个规模化奶牛养殖小区、8个机械化挤奶厅、12个生鲜乳运输车辆和库尔勒市城郊周边的29个散生鲜乳销售点的范围内抽取了54份生鲜乳混合样品，采用SNAP快速检测试剂盒进行检测。结果检测出β-内酰胺酶阳性的样品2份，样品阳性率为3.7%。这说明仍需要加强对奶牛饲料和投入品的监督管理。此外，经实际测试，SNAP检测试剂盒具有携带方便、检测快速的特点，适用于奶站、乳制品企业、畜产品安检等部门对大批量奶样的检测。

生鲜牛乳；β-内酰胺酶；解抗剂；SNAP检测试剂盒

1 牛乳中的β﹣内酰胺酶（解抗剂）的来源

β-内酰胺酶是一种抗生素分解剂，可水解β-内酰胺类抗生素。目前，在奶牛养殖业中，抗生素常被用来治疗奶牛各种感染性疾病，有时养殖户对患乳房炎的牛用抗生素直接注射乳房部位进行治疗，或在饲料中添加大剂量抗生素。青霉素作为β- 内酰胺类药物，是治疗牛乳腺炎的首选药物，是牛奶中最常见的残留抗生素。

由于国内多数乳品企业对抗生素残留超标的牛乳采取降价收购的原则，出于经济利益的驱动，一些不法奶站使用β-内酰胺酶来降解牛乳中残留的抗生素，生产人造“无抗奶”，致使抗生素酶解后的残留物进入乳制品，对人体健康造成伤害，同时也可能造成病菌的耐药。

2009年2月，卫生部等九部门组成的全国打击违法添加非食用物质和滥用食品添加剂专项整治领导小组在公布的《食品中可能违法添加的非食用物质名单（第二批）》中，将β-内酰胺酶列入乳与乳制品掩蔽抗生素的违法添加的非食用物质，规定严厉禁止添加于食品中，并要求各相关部门严格检测。

2 检测原理

在奶样中添加一定量的β-内酰胺抗生素，采用免疫层析技术，在一定温度下，经一定时间的反应。如果样品中含有β-内酰胺酶，那么奶样中的抗生素会被β-内酰胺酶催化分解，造成抗生素消失或浓度降低。再采用SNAP抗生素快速检测试纸盒配备专用β-内酰胺酶西林瓶试剂快速检测奶样，如未检出抗生素，则奶样中含有β-内酰胺酶；如检出抗生素，则奶样中不含β-内酰胺酶（基于本法检出限）。利用β-内酰胺酶可分解奶及奶制品中的β-内酰胺类抗生素的原理，通过测定β-内酰胺酶降解后的β-内酰胺类抗生素的残留量，定性判定奶及奶制品中有无β-内酰胺酶。

3 材料

3.1 仪器和试剂

美国安普生化科技有限公司生产的（45±5）℃专用SNAP配套加热器、SNAP读数仪、SNAP抗生素快速检测试剂盒、SNAP试剂盒专用β-内酰胺酶西林瓶、1mL移液器。

3.2 检测基质

新鲜混合牛奶样品。

3.3 样品的采集

2014年4月至10月，在巴州辖区内16个生鲜乳收购站、5个规模化奶牛养殖小区、8个机械化挤奶厅、12个生鲜乳运输车辆和库尔勒市城郊周边的29个散生鲜乳销售点范围内共抽54份生鲜乳混合样品，按规定进行冷藏保存运输，送巴州动物疾病控制与诊断中心畜产品实验室，当天采用SNAP快速检测试剂盒进行β-内酰胺酶残留检测。

4 检测方法

4.1 取出适量SNAP抗生素快速检测试纸盒铝箔袋和装有β-内酰胺酶试剂的西林瓶，待其恢复至室温（25±2）℃。打开SNAP快速检测温育器，设置温度为（45±5）℃，温度稳定后待用；待西林瓶温度恢复到正常室温后，打开西林瓶，将牛奶样品摇匀后慢慢吸取3mL加入到装有β-内酰胺酶试剂西林瓶中，摇晃西林瓶使试剂溶解。将含有试剂和奶样的西林瓶放置到预热的SNAP加热器的加热板上，确保温度在（45±5）℃，保持30 min；孵育完成后，将西林瓶放入0～8℃的冰箱中冷藏至少6 min；打开SNAP抗生素快速检测试剂盒铝箔袋，从铝箔袋中取出试剂盒，置于桌面上。从冰箱中取出奶样，用移液器吸取（450±50）μL加入到内含蓝色颗粒的样品管中，充分振荡；将样品管中的样品倒入SNAP抗生素快速检测试剂盒的样品孔，样品流过结果显示窗并流向蓝色激活环。

4.2 当样品流动到试剂盒上的蓝色激活环，但蓝色激活环尚未完全消失时，立即将试剂盒上的按键按至底部，直至激活键与SNAP试剂盒保持齐平。

4.3 激活6分钟后，用专门SNAP试剂盒快速读数仪读取结果，在1分钟内判定结果。

4.4 结果判读。SNAP读数仪判定：读数仪读数＞1.05为阴性；读数仪读数≤1.05为阳性；

读数仪阴性，判定β-内酰胺酶阳性；读数仪阳性，判定β-内酰胺酶阴性。

4.5 目测判定。样品点比对照点的颜色浅：β-内酰胺酶阴性；样品点比对照点的颜色深或相同：β-内酰胺酶阳性；如果对照点未显色，重新检测样品。

5 检测结果

在54份混合生鲜乳样品中检测出β-内酰胺酶阴性样品52份，阳性样品2份，生鲜乳样品的β-内酰胺酶阳性率为3.7%。

6 结论

6.1 从2014年抽的54份生鲜乳混合样品中检测出2份β-内酰胺酶阳性样品，说明必须加强对巴州辖区内的奶站、养殖小区、机械化挤奶厅、生鲜乳运输车辆和牛奶散售点的生鲜乳检测力度，以及奶牛养殖业中奶牛饲料和投入品的监督管理，杜绝在这些环节的生鲜牛乳中违法添加违规药品和违禁物品。

6.2 SNAP检测试剂盒便于携带且装置完备，对奶站、奶牛养殖小区、奶糟、奶缸、运输车辆、零售点的生鲜牛奶，均可立即检测。SNAP检测试剂盒能够在10分钟内提供结果，无需测量试剂，是大批量检测的理想选择。SNAP检测试剂盒可适用于奶站、乳制品企业、畜产品安检部门。

Investigation of β-Lactamase Residue in Fresh Milk in Bazhou，Xinjiang

Patiguli·Tuohuti
（Bazhou Animal Disease Control and Diagnostic Center，Kurle，Xinjiang 841000）

In order to understand the β-lactamase（solution antagonist）residuein fresh milk in Bazhou，Xinjiang，and to ensure the fresh milk safety，54 milk composite samples were collected from the 16 fresh milk collecting stations、5 scale dairy farming districts，8 mechanized milking halls，12 fresh milk transportation vehicles and 29 bulk milk sales points around Korla suburbs from April to October 2014 for detection of β-lactamase residue with rapid SNAP detection kit.The results showed that 2 samples were β-lactamase positive in 54 samples with a positive rate of 3.7%，suggesting that the supervision and management of dairy cattle feed and inputs need to be strengthened.

fresh milk；β-lactamase；solution antagonist；SNAP detection kit

S851.2

B

1005-944X（2015）10-0019-02

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朱迪国）