儿童感染人博卡病毒的研究进展

邢吴敏 韩新民

南京中医药大学附属医院，江苏南京210029

儿童感染人博卡病毒的研究进展

邢吴敏 韩新民

南京中医药大学附属医院，江苏南京210029

人博卡病毒是近年来一种在呼吸道和消化道新发现的病原体，目前其发病情况、发病机制及治疗尚不十分明确，但其在临床的检出率并不低，且常可引起较为严重的急性下呼吸道感染，极大地危害患儿的生命健康。目前，尚未研究出针对此类病毒的特效西药，对小儿博卡病毒肺炎的中医药报道也是极少，因此值得进行深入研究。

人博卡病毒曰儿童曰研究进展

呼吸道感染是儿童时期最常见的疾病，亦是引起儿童死亡的常见原因，病毒又是儿童呼吸道感染的最常见病原体，其中近年来发现的人博卡病毒（human bocavirus，HBOV）是儿科临床上较为多见的一种病原体[1]。人博卡病毒于2005年首次在下呼吸道感染的瑞典儿童的鼻咽分泌物中分离[2]。随后，世界各地纷纷证实有该病毒流行，提示人博卡病毒呈全球分布。本文将从以下几个方面进行综述，以加深临床医生对该病毒的认识。

1 人博卡病毒的发现及命名

2005年9月6日，Allander等[2]从17例下呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物中分离出一种过去未被检出的病原体，基于该病毒的氨基酸序列特征与牛（bovine）博卡病毒和犬（canine）细小病毒相似，因此被命名为人博卡病毒，源于bovine中的bo和canine中的ca字母的组合[3]，后因其他分型的出现，而被称为人博卡病毒。基于其核酸序列特征将其归属于细小病毒科，细小病毒亚科，博卡病毒属。2005年9月22日澳大利亚学者再次从急性呼吸道感染的患儿中检测出同一种病毒[4]，随后很多国家或地区相继证实有人博卡病毒流行。2005年12月，刘巧突等[5]采用聚合酶链反应（PCR）技术从湖南急性肺炎患儿的标本中首次检出人博卡病毒。目前人博卡病毒分4型：人博卡病毒1、人博卡病毒2、人博卡病毒3、人博卡病毒4[2，6-7]，人博卡病毒1～4型在胃肠道标本中均有检出，而人博卡病毒1～3型除在胃肠道标本中检出外，在呼吸道分泌物中也都有检出[8]。

2 人博卡病毒的基因特征分析

人博卡病毒病毒颗粒呈直径21～28 nm的球形，二十面体立体对称结构，是一种线性单链DNA、无包膜病毒，长约5.2 kb，有3个开放读码框，2个主要的开放式阅读框，分别编码两个主要结构蛋白（VP1和VP2），1个非结构蛋白（NS1）和1个次要开放阅读框编码非结构蛋白（NP1）[9-11]。NS1能够启动病毒DNA的复制，最早被转录、翻译，NP1的功能尚不明确。VP1、VP2极其相似，是病毒衣壳的重要结构蛋白，二者含有一个相同的C端，所不同的是VP1的N端有其特有磷脂酶A片段[12]，与病毒的感染有关。人博卡病毒基因组中编码非结构蛋白（NS1、NP1）的区域比较保守，而编码核衣壳蛋白（VPl和VP2）的区域较易发生突变[13]。人博卡病毒基因组不编码聚合酶，其DNA复制完全依赖宿主细胞DNA的聚合酶进行复制。

3 人博卡病毒的流行病学特征

目前国内外对人博卡病毒流行病学方面的研究已取得一定进展。自2005年瑞典首次报道人博卡病毒后，各个国家和地区相继在患者的呼吸道分泌物、粪便、血液及脑脊液等样本中发现此病毒，但目前临床流行病学报道的人博卡病毒的阳性检出率相差较大，这可能与样本类型、采样时间、样本处理程序、患者年龄、检测方法敏感性和病情等有关。人博卡病毒多在呼吸道分泌物标本中被检出，因此通过呼吸道传播的可能性很高，但亦不能排除粪-口传播及血液传播的可能性。人博卡病毒可以感染不同年龄组人群，而儿童为主要感染人群。人博卡病毒没有明显季节性，全年均可感染，但相关文献报道感染多集中在冬春季节[13-14]。

3.1 国外人博卡病毒的流行状况

人博卡病毒感染在不同国家和地区的发病率为1.5%～24.6%[14-15]。韩国的Jong等[16]收集2010～2011年1528例呼吸道感染的儿童检测示187例人博卡病毒阳性，阳性率为12.2%，以12～24个月的患儿居多，感染高峰为6月份。越南的Tran等[17]收集了2010年4月～2011年5月急性呼吸道感染的患儿标本1082份，阳性率为7.2%，其中12～23个月患儿感染率高，从10月份至来年4月的旱季的感染率高于5月份到10月份的雨季。希腊的Katerina等[18]对1年内收集的370例呼吸道感染患儿标本进行检测，人博卡病毒的感染率为3.2%，患儿平均年龄1.8岁，仅在寒冷的季节有检出。沙特阿拉伯的Abdel-Moneim等[19]对80例收集于2012年1～5月的呼吸道感染患儿的鼻咽拭子进行反转录酶-聚合酶链锁反应（RT-PCR）检测，人博卡病毒的感染率是22.5%，阳性率远高于其他国家和地区，其中以2岁以下的的患儿居多。日本学者Endo等[20]对204份血清样本进行特异性抗体的检测，发现6岁以上呼吸道感染患儿中血清抗人博卡病毒抗体阳性率为94%～100%，这可能于患儿感染人博卡病毒后机体产生的保护免疫有关。在消化道感染方面，伊朗学者Monavari等[21]对200例年龄1～5岁因急性胃肠炎住院的患儿的粪便标本进行RT-PCR检测，有16例人博卡病毒阳性，阳性率为8%。

3.2 我国的流行情况

Chen等[22]对2009年1月～2011年3月长庚儿童医院113例2岁以下毛细支气管炎的患儿做病毒检测，查出人博卡病毒阳性率为19.5%，为第二常见病原体。利蓓荃等[23]于2009年1月～2010年12月收集急性呼吸道感染的3826例患儿的痰标本，人博卡病毒的阳性率为7.13%，感染年龄多为1～12个月的患儿，发病季节以秋冬为主。肖霓光等[24]对2007年9月～2008年3月长沙的773例急性下呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物检测，得到87例感染人博卡病毒，阳性率为11.4%，感染年龄为18 d～64个月，冬春季流行。张琴等[25]选取2009年11月～2010年6月南京呼吸道感染患儿鼻咽吸取物标本100份，检测出5例感染人博卡病毒，阳性率为5%。李晓燕等[26]收集2008年9月～2009年5月天津急性下呼吸道感染住院儿童的鼻咽吸取物标本202份，其中感染人博卡病毒14例，阳性率为6.9%，所有阳性患儿的年龄均≤6岁，6月～12月龄患儿感染率最高，为14.3%。杨晶艳等[27]于2010年5月～2011年8月收集四川大学华西第二医院呼吸道感染儿童的787例呼吸道分泌物标本，其中65例人博卡病毒阳性，检出率为8.26%，其中33例混合感染其它呼吸道病毒，感染对象以＜3岁儿童为主，季节分布不明显，以2010年5、7、8、12月检出率较高。

4 人博卡病毒感染的临床特征

人博卡病毒首先在有呼吸道症状的患者的分泌物中检出，人博卡病毒与呼吸道感染的关系有较多、较深的文献支持。长沙地区87例感染人博卡病毒的患儿大部分出现阵发性干咳，其次是发热（71.2%）、喘息（31.0%）、腹泻（8.0%）及呼吸困难（5.7%），临床诊断以支气管肺炎、肺炎为主，分别占60.9%和23.0%，其次是毛细支气管炎占10.3%，另外还有少数诊断为急性支气管炎、支气管哮喘和喉炎[24]。利蓓荃等[23]报道苏州地区89例单纯人博卡病毒感染呼吸道感染患儿中诊断为上呼吸道感染4例（4.49%），大叶性肺炎5例（5.62%），重症肺炎4例（4.49%），支气管肺炎76例（85.39%）。主要临床症状有咳嗽86例（96.63%），发热50例（56.18%），喘息41例（46.07%），胃肠道症状12例（13.48%），肺部啰音75例（84.27%）。人博卡病毒还可引起病毒血症[28-30]，还有报道称其与婴幼儿喘息性疾病存在相关性[31-32]。人博卡病毒也可引起重症感染，表现为缺氧、呼吸窘迫、喘息、咳嗽和发热[33]，可并发气胸、纵隔气肿、皮下气肿和急性呼吸衰竭，甚至危及生命[34]。另外，人博卡病毒在急性胃肠炎患儿的大便及脑炎患儿的脑脊液中也被检出。前者主要是腹泻和呕吐等急性胃肠炎症状。Mitui等[35]报道2例严重脑炎死亡患儿的脑脊液及血液检出人博卡病毒，提示人博卡病毒是导致此次严重脑炎的主要病原体。

5 实验室检查

目前，国际上对人博卡病毒感染的诊断没有统一的标准，电镜、病毒分离培养法、分子生物学及免疫学方法均可检测人博卡病毒，电镜检测比较直观可靠，可对人博卡病毒的形态结构进行观察，但其具有设备昂贵、操作技术要求高，检测时间长且阳性率低等缺点，故不适用于临床[36]。人博卡病毒体外细胞培养增殖不易，Dijkman等[9]通过立体培养的呼吸道上皮实现了人博卡病毒的体外增殖，人博卡病毒体外的成功培养对其致病性等研究有所帮助。PCR法是目前临床诊断人博卡病毒感染最常用的方法，具有快速、敏感等优点，常规PCR可以对病毒DNA进行定性，定量PCR可以检测病毒载量[37]。免疫学方法可以对人体血清中的特异性抗体进行检测，人博卡病毒感染早期血清中出现的IgM抗体2～3 d便可消失，不利于早期诊断，而随后出现的IgG抗体在血清中存在时间较长，因此多根据IgG抗体滴度的变化来诊断是否存在既往人博卡病毒感染[32]。

6 治疗及展望

目前，尚无人博卡病毒感染的抗病毒药物相关研究。西医对于人博卡病毒感染的治疗主要以抗病毒、对症治疗及预防并发症为主，其疗效也存在争议。Schenck等[38]回顾性分析1例造血干细胞移植后的患儿，该患儿住院期间的鼻咽分泌物、血液、粪便标本内均检测到人博卡病毒-1 DNA，然而在更昔洛韦、膦甲酸钠治疗后，人博卡病毒-1 DNA在血清、鼻咽部抽吸物、粪便标本中均未检测到。而Kupfer等[39]对1份呼吸道标本中检测到人博卡病毒-1 DNA的B细胞淋巴瘤患者注射更昔洛韦后临床症状无明显改善。

近年来中医药治疗小儿病毒性肺炎进展较快，研究内容广泛。但对人博卡病毒肺炎的研究近乎空白，我们查阅了国内外文献，未见到一篇中医药关于人博卡病毒的报道。近年中医药对病毒性肺炎的研究已取得一定的进展，汪受传等[40]研究表明，金欣口服液对呼吸道合胞病毒（RSV）引起的病毒性肺炎有很好的疗效。杜丽娜等[41]研究表明，槲皮素、虎杖苷、黄芩素、汉黄芩素、异鼠李素、大黄素甲醚对RSV具有直接灭活作用，是金欣口服液抗RSV的物质基础。除去以汪受传等[40]及杜丽娜等[41]对RSV较为系统的临床及实验室研究报告外，其余研究主要以散在的临床经验总结为主，较系统的证治标准研究相对较少。临床多以症状体征诊断为主，经病原学诊断确诊者仍较少，治疗上多以个人经验为主，尚缺乏统一的治疗标准。人博卡病毒作为新近发现病原体，在治疗方面的研究目前近乎空白，中医药在抗病毒方面具有明显优势，发挥中医药特色治疗小儿病毒性肺炎，采用专方专药治疗单种病毒感染，在提高治愈率，降低病死率方面，发挥着重要的作用。

目前，关于人博卡病毒的西医临床研究资料较少且不完整，中医药对此病毒的临床研究也近乎空白，因此值得我们深入研究。我们应在前人对小儿病毒性肺炎多年临床和科学研究的基础上，建立合适的动物模型，研究人博卡病毒感染的致病机制，进一步对小儿博卡病毒性肺炎的证治规律进行深入研究，运用辨证论治的方法，在现代病原学检测技术的指导帮助下，研究专方专药对该病毒的治疗效果及机制，充分发挥中医中药的优势，提高小儿博卡病毒性肺炎的临床疗效，减少治疗后的不良反应及副作用，降低其发病率及病死率，并对其进行系统、规范、多中心的临床研究，总结出小儿博卡毒性肺炎的病症诊断标准及有效的治疗方法，进而研发出有效的治疗药物，为儿童的健康成长服务，这是近年来研究的重点。

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Study progress of Human Bocavirus infection of children

XING WuminHAN Xinmin
The Affiliated Hospital of Nanjing University of Chinese Medicine,Jiangsu Province,Nanjing210029,China

Human bocavirus(HBOV)is a new pathogens,it is discovered from respiratory tract and digestive tract.The incidence,pathogenesis and treatment of HBOV are not clear,but the clinical detection rate of HBOV is high.It often causes severe acute lower respiratory infections.HBOV had great harm to the patient's life and health.At present,the effects drugs for the virus has not been developed by Western medicine,and the clinical research report of traditional Chinese medicine on the HBOV pneumonia in children was rare.Therefore,it is worth for us doing a further research.

Human Bocavirus;Children;Review recent progress

R373.1

A

1673-7210（2015）04（b）-0034-04

2015-01-14本文编辑：任念）

国家中医药管理局国家中医临床研究基地业务建设科研专项课题（编号JDZX2012102）。

邢吴敏（1988.4-），女，山西晋城人，南京中医药大学中医儿科学专业2012级在读硕士研究生；研究方向：小儿肺系疾病。

韩新民（1957.4-），男，博士，教授，主任医师，南京中医药大学儿科教研室主任，江苏省中医院儿科副主任；研究方向：小儿呼吸系统、消化系统、神经系统疾病。