环氧合酶-2及细胞周期蛋白D1在腮腺肿瘤组织中的表达及相关性分析

王 欣 刘 江

1.河北联合大学附属医院曹妃甸区医院放射科，河北唐山063200；2.河北联合大学基础医学院，河北唐山063000

环氧合酶-2及细胞周期蛋白D1在腮腺肿瘤组织中的表达及相关性分析

王 欣1刘 江2▲

1.河北联合大学附属医院曹妃甸区医院放射科，河北唐山063200；2.河北联合大学基础医学院，河北唐山063000

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）在腮腺肿瘤组织中的表达及相关性。方法对河北联合大学附属医院曹妃甸区医院2009年3月～2014年9月收治的25例腮腺多形性腺瘤、42例癌在多形性腺瘤中及20例腺瘤旁组织（对照）病理标本进行免疫组织化学SP法染色，观察COX-2、cyclinD1的阳性表达情况及两者的相关性。结果癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织中COX-2的阳性率分别为83.3%、52.0%、5.0%，腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织的COX-2阳性率与癌在多形性腺瘤中比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤与腺瘤旁组织比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织中cyclinD1的阳性率分别为81.0%、44.0%、10.0%，腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织的cyclinD1阳性率与癌在多形性腺瘤中比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤与腺瘤旁组织比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。在癌在多形性腺瘤中，COX-2及cyclinD1的表达与年龄、性别、肿瘤直径无关（P＞0.05）；cyclinD1的表达与TNM分期及淋巴结是否转移有关（P＜0.05），COX-2的表达仅与TNM分期有关（P＜0.05）。在腮腺肿瘤中COX-2与cyclinD1的表达呈正相关（r=0.812，P＜0.01）。结论COX-2、cyclinD1随着肿瘤的发生及恶化，其表达均逐渐增高，且两者的表达呈正相关性，提示COX-2、cyclinD1与腮腺肿瘤的发生、发展密切相关。COX-2、cyclinD1的联合检测有助于对肿瘤良恶性的鉴别，可对治疗方案选择提供参考。

腮腺多形性腺瘤；癌在多形性腺瘤中；环氧合酶-2；细胞周期蛋白D1

腮腺多形性腺瘤来源于腮腺上皮组织，是腮腺最常见的良性肿瘤，治疗主要以手术为主，未完整切除的多形性腺瘤常可复发[1]，复发者常沿神经分支分布，手术切除更为困难，且有癌变的可能[2]。因此，了解腮腺肿瘤的发病机制，对肿瘤早期诊断和治疗均有重要的意义。近年来研究表明，环氧合酶-2（COX-2）、细胞周期蛋白D1（cyclinD1）与肿瘤的发生、发展密切相关[1-2]，而COX-2、cyclinD1在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤组织中表达的相关报道较少。本研究分析河北联合大学附属医院曹妃甸区医院（以下简称“我院”）2009年3月～2014年9月收治的腮腺肿瘤患者病理标本中COX-2、cyclinD1在腮腺多形性腺瘤及癌在多形性腺瘤组织中表达及其相关性，为临床的诊断、治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集我院收治的腮腺肿瘤患者67例，其中，腮腺多形性腺瘤25例，癌在多形性腺瘤中42例，诊断均经手术病理结果证实，并选取腺瘤旁组织20例作为对照。67例患者中男30例，女37例，年龄22～75岁。所有患者术前均未进行任何抗肿瘤治疗。本研究经医院伦理委员会通过，患者均知情同意并签署知情同意书。

1.2 主要试剂和仪器

即用型鼠抗人COX-2单克隆抗体，购自北京中杉金桥生物技术有限公司；即用型鼠抗人cyclinD1单克隆抗体和SP试剂盒，购自北京中山生物技术有限公司；高清晰度彩色图文分析系统，购自武汉千屏影像技术有限公司。

1.3 免疫组化

病理样本以10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，4 μm连续切片。对病理标本行免疫组织化学SP法染色。按SP试剂盒说明书进行操作。以PBS代替一抗作为阴性对照，以肺癌组织切片作为阳性对照。

1.4 结果判定标准

免疫组化阳性信号为棕色细小颗粒状，COX-2、cyclinD1染色结果以细胞核或细胞质出现棕色颗粒为阳性反应，在200倍显微镜下取5个视野计算阳性细胞与总细胞数的比值。结果判断：阴性（-）：阳性细胞与总细胞数的比值＜10%；弱阳性（+）：10%≤阳性细胞与总细胞数的比值＜30%；阳性（++）：30%≤阳性细胞与总细胞数的比值＜50%；强阳性（+++）：阳性细胞与总细胞数的比值≥50%。以+～+++为阳性。

1.5 统计学方法

采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验或精确概率法，等级资料的比较采用秩和检验，相关性分析采用Spearman分析；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同腮腺组织COX-2、cyclinD1的阳性表达情况

COX-2阳性反应定位于细胞质或细胞核，均可见棕色颗粒。癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织中COX-2的阳性率分别为83.3%、52.0%、5.0%；腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织的COX-2阳性率与癌在多形性腺瘤中比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；腮腺多形性腺瘤与腺瘤旁组织比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。cyclinD1阳性反应定位于细胞核，可见棕色颗粒。癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织中cyclinD1的阳性率分别为81.0%、44.0%、10.0%；腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织的cyclinD1阳性率与癌在多形性腺瘤中比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤与腺瘤旁组织比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 不同临床特征的癌在多形性腺瘤中组织COX-2、cyclinD1表达情况

在癌在多形性腺瘤中COX-2的表达与年龄、性别、肿瘤直径、淋巴结是否转移无关（P＞0.05），与TNM分期有关（P＜0.05）；cyclinD1的表达与年龄、性别、肿瘤直径无关（P＞0.05），与TNM分期及淋巴结是否转移有关（P＜0.05）。见表2。

2.3 腮腺肿瘤中COX-2与cyclinD1表达的相关性

腮腺肿瘤组织中COX-2与cyclinD1的表达呈正相关（r=0.812，P＜0.01）。

3 讨论

环氧化酶（COX）是花生四烯酸合成前列腺素过程中的重要限速酶，COX-2是其亚型。近年研究表明，COX-2表达与肿瘤的发生发展密切相关[3]。研究表明，胰腺癌、胃癌、结肠癌组织中COX-2表达为89%以上[3]。COX-2可能通过以下机制参与了肿瘤的发生发展[4-7]：①增加促血管生成因子的表达并促进生长因子诱导的血管形成及抑制内皮细胞的凋亡等途径促进肿瘤血管形成；②抑制机体免疫反应；③通过其过氧化酶活性，发生共氧化反应而生成致癌物。李波等[8]对肝癌切除术切取的肝癌组织标本52例采用免疫组织化学方法检测COX-2蛋白的表达，并与正常肝组织进行对照分析，结果表明，正常肝组织中未见COX-2表达，COX-2在中、低分化肝癌组织的阳性率（94.1%）高于高分化肝癌组织（38.9%），两者比较差异有高度统计学意义（P＜0.01），表明COX-2参与了肿瘤的发生、发展过程。COX-2在腮腺肿瘤组织中的表达研究较少，本研究对67例腮腺肿瘤患者的临床资料进行分析，结果显示，癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织中COX-2的阳性率分别为83.3%、52.0%、5.0%，腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织的COX-2阳性率与癌在多形性腺瘤中比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤与腺瘤旁组织比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。因此认为，检测腮腺肿瘤组织中COX-2的表达有助于鉴别肿瘤的良恶性，可对治疗方案选择提供参考。

cyclinD1是调节细胞进入细胞周期中增生期的主要因子，已被证实为原癌基因，其过度表达导致细胞增殖，从而发生肿瘤[9-11]。本研究结果显示，癌在多形性腺瘤中、腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织中cyclinD1的阳性率分别为81.0%、44.0%、10.0%，腮腺多形性腺瘤、腺瘤旁组织的cyclinD1阳性率与癌在多形性腺瘤中比较，差异均有统计学意义（均P＜0.05），腮腺多形性腺瘤与腺瘤旁组织比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。本研究结果与已报道研究结果相符[2，12]。表明cyclinD1与肿瘤的发生发展关系密切。本研究相关性分析结果显示，COX-2、cyclinD1两者的表达呈正相关，提示COX-2、cyclinD1与腮腺肿瘤的发生、发展密切相关。

综上所述，COX-2、cyclinD1随着肿瘤的发生及恶化，其表达均逐渐增高，且两者的表达呈正相关性，提示COX-2、cyclinD1与腮腺肿瘤的发生、发展密切相关，且两者具有协同作用，COX-2、cyclinD1的联合检测有助于对肿瘤良恶性的鉴别，可对治疗方案的选择提供参考。

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Expression and correlation of COX-2 and cyclinD1 in parotid tumor tissues

WANG Xin1LIU Jiang2▲
1.Department of Radiology,the Affiliated Caofeidian Hospital of Hebei United University,Hebei Province,Tangshan 063200,China;2.School of Basic Medical,Hebei United University,Hebei Province,Tangshan063000,China

ObjectiveTo evaluate the expression and correlation of COX-2 and cyclinD1 in parotid tumor tissues.MethodsThe expression of COX-2,cyclinD1 were detected by SP immunohistochemical staining in specimens of 25 cases of parotid pleomorphic adenoma,42 cases of carcinoma in pleomorphic adenoma and 20 cases of tissues beside the adenoma(control).The positive expressions and correlation of COX-2,cyclinD1 were observed.ResultsThe positive expression rate of COX-2 in carcinoma in pleomorphic adenoma,pleomorphic adenoma of parotid gland,tissues beside the adenoma were 83.3%,52.0%,5.0%respectively.The positive expression rate of COX-2 in carcinoma in pleomorphic adenoma was significantly higher than that in pleomorphic adenoma of parotid gland,tissues beside the adenoma(P＜0.05);the positive expression rate of COX-2 in pleomorphic adenoma of parotid gland was significantly higher than that in tissues beside the adenoma(P＜0.05).The positive expression rate of cyclinD1 in carcinoma in pleomorphic adenoma,pleomorphic adenoma of parotid gland,tissues beside the adenoma were 81.0%,44.0%,10.0%, respectively.The positive expression rate of cyclinD1 in carcinoma in pleomorphic adenoma was significantly higher than those in pleomorphic adenoma of parotid gland,tissues beside the adenoma(P＜0.05);the positive expression rate of cyclinD1 in pleomorphic adenoma of parotid gland was significantly higher than that in tissues beside the adenoma(P＜0.05).In carcinoma in pleomorphic adenoma,the expression of COX-2 was only associated with TNM staging (P＜0.05),the expression of cyclinD1 was associated with the lymph node metastasis,TNM staging(P＜0.05);both of the expressions of COX-2 and cyclinD1were not associated with the patient's gender and age,the size of tumor(P＞0.05).There was a positive correlation between the expression of COX-2 and the expression of cyclinD1 in parotid tumor(r=0.812,P＜0.01).ConclusionThe expressions of COX-2,cyclinD1 are gradually increased with occurrence and progression of parotid gland tumor.There is a positive correlation between the expression of COX-2 and cyclinD1.The combined detection of COX-2 and cyclinD1 can help to differentiate benign and malignant tumors and help for antitumor therapy selection.

Parotid pleomorphic adenoma;Carcinoma in pleomorphic adenoma;COX-2;cyclinD1

R739.87

A

1673-7210（2015）04（b）-0015-04

2015-01-05本文编辑：程铭）

河北省科学技术研究与发展计划项目（编号11276135）。

▲通讯作者