紫苏籽提取物对蛋鸡产蛋高峰后期血液生理生化指标的影响

时艺霖，赵胤博，王占彬，黄 勇，毛 薇，顾宪红

（1.河南科技大学动物科技学院河南省饲草饲料资源开发与畜禽健康养殖院士工作站，河南洛阳471003；2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室，北京100193；3.郑州铁路职业技术学院，河南郑州450000）

动物性产品的安全性越来越受到消费者的关注。长期以来，抗生素等化学合成类饲料添加剂的滥用，使细菌产生耐药性，药物残留于动物性产品中，给消费者的健康带来严重的隐患，因此利用天然植物开发无污染、无药物残留的绿色饲料添加剂替代抗生素已经成为目前动物营养学探究的热点之一。研究发现，天然植物饲料添加剂兼有药用和营养的双重作用，其含有的多糖、甙类、酚酸等多种活性成分具有增强机体免疫力、提高动物抗疾病能力和生产性能等作用［1－4］。紫苏籽（PerillaFrutescensSeed）为唇形科一年生草本植物紫苏（Perillafrutescens（L）Britt）的干燥成熟果实，无毒，是我国传统的药、食两用类中药材［5］，资源丰富。紫苏籽提取物主要成分为α－亚麻酸、黄酮、咖啡酸、迷迭香酸、齐墩果酸、乌索酸等［6－10］，药理学研究发现紫苏籽提取物有护肝、抗衰老、清除体内自由基、抑菌、降血脂、降低胆固醇、提高机体免疫力等功效［11］。目前以紫苏籽提取物作为饲料添加剂对动物生产性能、动物性产品品质、免疫功能及血脂水平影响的报道为数不多［12］，有关其对蛋鸡产蛋高峰后期血液理化指标影响的研究尚未见报道。本试验在产蛋高峰后期蛋鸡日粮中添加紫苏籽提取物，研究其对蛋鸡血液理化指标的影响，旨在为紫苏籽资源的开发利用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

紫苏籽提取物由河南科技大学动物科技学院动物营养实验室制备，提取方法参照文献［10，13］，有效成分为α－亚麻酸53.25mg／g、黄酮30.41mg／g、迷迭香酸10.18mg／g。

1.2 试验动物与饲养管理

选择480只健康状况良好、产蛋率和体重相近的48周龄海兰褐蛋鸡，随机分为4个处理组，每个处理组6个重复，每个重复20只鸡。预试期7d，试验期30d。4个处理组蛋鸡分别为空白对照组饲喂基础日粮，处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在基础日粮中分别添加0.01%、0.02%、0.03%的紫苏籽提取物。所有试验鸡只采用常规三层阶梯式笼养，每笼3只，自由采食和饮水，每天观察鸡只的饮食情况和精神状态，定期清理粪污。参照NRC（1994）蛋鸡营养需要配置基础饲粮，其日粮组成及营养水平见表1。

表1 试验日粮组成及营养水平（风干基础）Table 1 Composition and nutrient levels of experiment diets（air－dried basis）

1.3 样品采集

分别于试验期的第15天和30天，每个重复抽取5只鸡，翅下静脉采血7mL，2mL置于肝素钠抗凝管中，用于血液常规指标检测；5mL 静置后3000 r／min离心10min，制备血清后置于－20℃冰箱保存，用于测定血清生化指标。

1.4 测定指标及方法

1.4.1 血常规指标 检测的血常规指标有全血中红细胞数（RBC，×1012／L）、血红蛋白（HGB，g／L）、红细胞压积（HCT，%）、平均红细胞体积（MCV，fL）、平均血红蛋白量（MCH，pg）、平均血红蛋白浓度（MCHC，g／L）、红细胞分布宽度（RDW－CV，%）、血小板（109／L）含量，检测仪器为希森美康医用电子有限公司的XS系列自动血液分析仪进行分析。

1.4.2 血液生化指标 使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司的全自动生化分析仪检测总蛋白（TP，g／L）、白蛋白（ALB，g／L）、球蛋白（GLB，g／L）、尿酸（UA，umol／L）、直接胆红素（DBIL，μmol／L）、总胆红素（TBIL，μmol／L）、甘油三酯（TG，mmol／L）、总胆固醇（TC，mmol／L）、高密度脂蛋白（HDL，mmol／L）、低密度脂蛋白（LDL，mmol／L）、葡萄糖（GLU，mmol／L）等物质含量，所用试剂盒购自南京建成生物科技有限公司。

1.5 数据统计与处理

试验数据通过Excel 2003 整理后，采用SPSS 20.0统计软件进行单因素方差分析（ANOVA），组间差异采用LSD 进行多重比较，试验数据用平均值±标准差表示，以P＜0.05作为差异显著性判断标准。

2 结果与分析

2.1 紫苏籽提取物对蛋鸡产蛋高峰后期血液常规指标的影响

由表2可知，试验第15天，与对照组相比，三个试验组的红细胞数、血红蛋白含量、平均红细胞体积、平均血红蛋白量、平均血红蛋白浓度、红细胞分布宽度、血小板含量都略高于对照组，但差异不显著（P＞0.05）；试验第30天，试验Ⅱ组血红蛋白量、红细胞压积显著高于对照组（P＜0.05），其他所测指标各组间差异不显著（P＞0.05）。

2.2 紫苏籽提取物对蛋鸡产蛋高峰后期血液生化指标和脂肪代谢指标的影响

2.2.1 紫苏籽提取物对蛋鸡产蛋高峰后期血液生化指标的影响 由表3可知，试验第15天，3个试验组与对照组之间所测血液生化指标没有显著差异（P＞0.05）；试验第30天，试验Ⅱ组白蛋白含量显著高于对照组（P＜0.05），试验Ⅲ组葡萄糖水平显著高于对照组和试验Ⅰ组（P＜0.05），除此之外，其它所测各项指标各组间差异不显著（P＞0.05）。

表2 紫苏籽提取物对蛋鸡产蛋高峰后期血液常规指标的影响Table 2 Effect of Perilla Frutescens seed extracts on blood routine parameters of layers during the late laying peak period

2.2.2 紫苏籽提取物对蛋鸡产蛋高峰后期血液脂肪代谢指标的影响 由表4可知，试验第15天，试验Ⅰ组总胆固醇的含量显著低于对照组（P＜0.05），其他各组间所测指标均无显著差异（P＞0.05）；试验第30天，三个试验组甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白含量与对照组相比差异不显著（P＞0.05）。

表3 紫苏籽提取物对蛋鸡产蛋高峰后期血液生化指标的影响Table 3 Effect of Perilla Frutescens seed extracts on blood routine parameters of layer during the late laying peak period

表4 紫苏籽提取物对蛋鸡产蛋高峰后期血液脂肪代谢指标的影响Table 4 Effect of Perilla Frutescens seed extracts on blood fat metabolism parameters of layer during the late laying peak period

3 讨论

3.1 紫苏籽提取物对蛋鸡血液常规指标的影响

血液常规指标可反映动物健康状况，常用来预测疾病的发生［14］。红细胞和血红蛋白是血液的重要组成部分，能反映动物机体造血功能，红细胞压积、平均红细胞体积（MCV）、平均血红蛋白量（MCH）、平均血红蛋白浓度（MCHC）、红细胞分布宽度（RDW－CV）是鉴别贫血的重要指标，血小板具有护肝、凝血、止血、促进纤维蛋白溶解以及维持血管壁的完整性等作用［15］。本试验结果表明，在蛋鸡日粮中添加适量的紫苏籽提取物有增加蛋鸡血液中红细胞、血红蛋白、平均血红蛋白量、平均血红蛋白浓度、血小板等成分的趋势，添加0.02%紫苏籽提取物可显著提高第30天血样中血红蛋白和红细胞压积浓度，添加0.03%紫苏籽提取物有降低血液细胞趋势，因此本试验结果说明紫苏籽提取物有改善蛋鸡产蛋高峰后期机体造血机能，但其添加量不宜过高，过高则可能引起细胞数量下降，表现出了天然提取物的双向调节作用。

3.2 紫苏籽提取物对蛋鸡血液生化指标的影响

血清所含成分与组织间液相接近，代表动物机体内环境的物理化学状况，比全血更能反映机体的状态，故血清生化指标可以作为反映动物体内某些组织器官机能状态变化和物质代谢的重要指标［16］。禽类血清中总蛋白、白蛋白及尿酸含量的高低能反映动物机体内蛋白质代谢能力强弱，总蛋白含量升高说明组织蛋白质沉淀作用和机体肝脏的蛋白质合成代谢加强，白蛋白含量升高说明机体免疫力提高、消化吸收蛋白质能力加强，而尿酸则反映机体蛋白质分解代谢水平，尿酸含量降低，表明机体内蛋白质合成代谢加强、分解代谢减弱，促进了机体对营养物质的转化率。血清球蛋白又称抗体，主要由B 细胞转化为浆细胞后分泌产生的，能反映机体的免疫力［17－18］。高士争等［19］报道，在育肥猪日粮中添加中草药饲料添加剂可显著提高育肥猪不同生长阶段血液中总蛋白、白蛋白、球蛋白的含量。本试验结果显示，日粮中添加紫苏籽提取物30d可不同程度提高蛋鸡血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白含量，降低尿酸含量，说明紫苏籽提取物有促进蛋白质消化吸收、提高机体免疫力的作用。

葡萄糖是动物体内各组织细胞活动的能量来源，其浓度高低反映动物体内葡萄糖代谢情况，因此葡萄糖浓度只有保持在一定水平才能维持机体正常需要［20］。本试验中，在蛋鸡饲粮中添加紫苏籽提取物，饲喂30d可显著提高蛋鸡血清中葡萄糖浓度（在血糖正常范围之内），原因可能是紫苏籽提取物中的活性成分，使动物体内消化酶的活性提高，促进了碳水化合物的消化，进而使血糖含量升高。

血清中胆红素水平的高低可直接反映出肝脏是否病变或胆管是否阻塞。近年来有研究报道，胆红素是一种生理抗氧化剂，具有比维生素C、维生素E等更强的抗氧化性，适量的胆红素对心、脑、肝等组织和器官具有良好的保护作用［21］。本试验结果表明，在蛋鸡日粮中适量添加紫苏籽提取物30d后蛋鸡血清中总胆红素和直接胆红素的含量有升高的趋势，表明紫苏籽提取物可能具有护肝抗氧化的作用，但是紫苏籽提取物中具体影响血清中胆红素含量变化的成分还不确定，有待于进一步的研究。

3.3 紫苏籽提取物对蛋鸡血脂水平的影响

胆固醇是动物细胞膜及神经髓鞘的重要组成成分，是VD3、类固醇激素和胆酸盐的前体，对于维持机体正常的生理活动及脂类代谢具有重要的作用。但是，如果血液中胆固醇水平过高则会引起动脉粥样硬化及心脑血管疾病。高密度脂蛋白可代表机体内胆固醇的清除情况［22］。甘油三酯是脂类物质代谢过程中的一种重要中间产物，主要作用是为细胞提供能量。血清中甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的含量可反映动物体内脂肪的合成与分解情况［23－24］。有研究报道，给大鼠饲喂高脂饲粮同时添加不同剂量紫苏籽油，饲喂28d后，可显著降低饲喂1 000mg／kg紫苏籽油组大鼠血清中总胆固醇含量，说明紫苏籽具有降血脂的作用［25］。Tan等［26］研究表明，日粮中添加紫苏籽提取物能显著降低鹌鹑血清中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白含量，升高血清中高密度脂蛋白含量。本试验中，在蛋鸡日粮中添加紫苏籽提取物15d后血清中甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白浓度有显著降低或降低趋势，高密度脂蛋白浓度则有升高趋势，说明紫苏籽提取物具有调节机体内脂类物质代谢的作用。降低蛋鸡血清中总胆固醇、甘油三酯等浓度的原因可能是，1）紫苏籽体取物中α－亚麻酸系ω－3多不饱和脂肪酸，其代谢产物二十碳五烯酸（EPA）有抑制脂肪酶合成及促进脂肪氧化分解和抑制肝细胞中甘油二脂转酰基酶活性，从而降低血清中总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白浓度，增加高密度脂蛋白浓度［27－28］；2）植物类黄酮可通过影响与脂类代谢有关的基因表达，对机体脂质代谢起调节作用。Kirk等［29］报道，大豆类黄酮可通过增加LDLR 的活性来降低机体血液中胆固醇含量。

4 小结

综上所述，与对照组相比，添加0.01% ～0.03%紫苏籽提取物对蛋鸡部分血常规、血液生化和脂肪代谢指标均有不同程度改善，提示紫苏籽提取物可能具有提高蛋鸡产蛋高峰后期机体蛋白质、脂肪代谢水平、改善机体免疫功能的作用。

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