多功能液体菌种培养装置的研制初探

杨舒惠，李德堂，杨建萍

（云南金雨庄生物科技有限责任公司；昆明欣尚科技开发有限公司，云南 昆明 650000）

随着我国食用菌产业的不断壮大，规模化、规范化、标准化的企业和栽培基地不断增多，对低成本、低风险、规模化生产菌种的需求日趋明显。然而，目前常规的液体菌种的生产及培养工艺存在很多的缺陷：常规液体菌种的生产需要培养罐、磁力搅拌器、摇床等设备，设备多，造价高，且不易推广；尤其是菌种从一级种到三级种，要用同样的方法扩繁3 次，菌种感染的风险很大；同时，整个液体菌种的生产周期长，需要40 天，而生产周期长、浪费大量的人力和能源。因此，本文就食用菌液体菌种规模化、低成本、低污染的核心问题进行初步的研究试验，以找到一个能规模化、低成本、低污染培养液体菌种的装置和有效方法。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料及装置

企业自主研制的一种多功能液体菌种培养装置，整套装置由不锈钢恒温培养箱、空气过滤器、空气导管、玻璃培养皿等配件组成。

1.1.1 试验菌株

平菇菌株1 个，香菇菌株1 个，黑木耳菌株1 个，共3 个。

1.1.2 培养基

3 个菌株采用统一配方：用木屑85%、麸皮14%、石膏0.5%、糖0.5%等制成。

1.2 试验方法

以香菇液体菌种的培养方法为例。

1）用优良的香菇一级母种，接种到经过高温灭菌的专用培养基里，环境温度控制在25℃进行菌种培养。28 天后香菇菌丝布满整个培养基，专用菌种制成。专用菌种培养基制作的配方：用木屑85%、麸皮14%、石膏0.5%、糖0.5%等制成。

2）制作液体菌种PDA 培养（营养）液，其做法是先洗净去皮，再称取300g 马铃薯切成小块，加水煮烂（煮沸20～30 分钟，能被玻璃棒戳破即 可），用4 层纱布过滤，加热，再据实际实验需要加琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂融完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000mL，分装到营养液保鲜袋内，121℃灭菌20 分钟后取出，冷却后贮存备用。

3）启用水浴培养箱，在玻璃球型培养罐内放入液体菌种球型培养袋，将液体菌种PDA 培养液与香菇专用菌种注入球型培养袋后，用硅胶瓶塞密封。启动整个玻璃培养罐的供氧系统，保证培养的液体菌种的氧气需求量。同时给水浴培养箱加水，并调节水温自动控制器，使水温保持25℃。经过72 小时（3天）的培养，培养罐里的香菇液体菌种制成。

1.3 试验测定

新型食用菌液体菌种低成本规模化生产工艺及设施包括：

1）采用分体组合方式连接玻璃球型培养罐，并制成一个水浴式培养箱。利用供氧系统的多头供氧软管连接玻璃球型培养罐，每罐设一个接种点，形成一组多点接种装置；

2）多品种的液体菌种在同一个生产工艺中进行培养：使用此设施，一次可以同时培养2 种以上的液体菌种，并且是一次性完成制种工艺。

2 结果与分析

在整个试验过程中，分别按照菌种活力、产量、培养时间、菌种污染率、培养过程5 个指标进行比对试验，结果如下，

从表1 可知，液体菌种培养，最大限度地满足了菌体对营养、温度、氧气、酸碱度等环境的生长需求，而且呼吸作用产生的代谢废气能及时排除，新陈代谢旺盛，菌球密度所有菌球菌龄基本一致，因此菌丝活力强。

从表2 可知，固体菌种从一级种到三级种，要用同样的方法扩繁3 次，整个菌种培养的生产周期长，需要40 天时间。而液体菌种培养的菌领整齐，生理成熟期短，转潮快，生物转化率等指标要优于固体菌种。

从表3 可知，液体菌种的菌种定植时间短，菌棒养菌时间只是固体菌种的2/3，菇潮间隔期短，从接种到采收结束比固体菌种缩短了50 天，最终食用菌的整个生产周期比固体菌种接种的生产周期提前了50 天。

从表4 可知，可以同时培养多品种的液体菌种，一次性完成制种，有效降低液体菌种感染的风险，同时，本实用新型拥有多个接种点，提高接种速度和效率，并且菌种的整体抗杂菌的优势比较强。

通过试验证明，液体菌种的应用在各方面的指标均优于固体菌种使用。

3 结论与讨论

试验结果表明，液体菌种的应用在各方面的指标均优于固体菌种的使用，有着极大的应用前景。而且，新研制的装置一次性完成制种，培养周期短，能有效保证菌种的质量和纯度，可以最大限度地满足菌体对营养、温度、氧气、酸碱度等环境的生长需求，而且呼吸作用产生的代谢废气能及时排除，新陈代谢旺盛，菌球密度所有菌球菌龄基本一致，因此菌丝活力强。装置不用摇床和振荡器，减少了培养次数，缩短了培养时间，降低了污染率，较大的降低了菌种和栽培管理的生产成本，同时，其制作工艺简单、培养效率高，感染率低，可以批量生产，实用性强。装置还可以用于多品种的液体菌种在同一个生产工艺中进行培养，同时，装置拥有多个接种点，可以提高接种速度和效率，装置成本低、风险小，结构简单，操作方便，能有效满足规模化生产菌种的需求。

表1 菌种活力对比情况分析

表2 产量对比情况分析

表3 培养时间对比情况 单位：天

表4 菌种培养污染率对比情况

表5 培养过程对比情况

多功能液体菌种培养装置研制及液体菌种培养工艺，属于菌种培育技术领域，还处于初步的研制阶段，很多方面还需要完善和提升。鉴于液体菌种在食用菌产业的推广应用前景，希望业内人士群策群力进一步深入研究。※