复方中药DF对高血压大鼠血压的影响及机制

，， ，，(.南华大学附属第一医院药剂科，湖南 衡阳 400；.南华大学药物药理研究所)

复方中药DF对高血压大鼠血压的影响及机制

伍小娟1，蒲智兰2，曹轩2，陈临溪2，唐国涛2
(1.南华大学附属第一医院药剂科，湖南 衡阳 421001；2.南华大学药物药理研究所)

目的初步探讨复方中药DF对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用。方法采用水提和醇提法对复方中药DF进行有效成分的提取，用大鼠无创尾动脉法观察口服复方中药DF后对SHR的降压作用，并用相应试剂盒测定血浆甘油三酯、总胆固醇、血管紧张素Ⅱ、内皮素的水平。结果给药3周后水提各剂量组与相应的醇提各剂量组比较有更强的抗高血压的作用(P<0.05)。与不给药对照组比较，水提组能明显降低甘油三酯、总胆固醇、血管紧张素Ⅱ和内皮素水平(P<0.05)。结论复方中药DF水提部分对SHR有明显降压作用，其作用机制可能与降低体内总胆固醇、甘油三酯及舒张血管平滑肌有关。

中药复方DF； 高血压； 大鼠

研究表明，高血脂、高血压是心脑血管病的主要危险因素之一[1]，近年来高血压病的发病率呈明显上升趋势，国内成人高血压患病率为18.8%[2]。高血压的长期存在会对心、肾、脑等靶器官造成一定的损害，致使其功能受损。但在临床应用中，理想的降压、降脂药物不多，且多为西药，而西药一般具有明显的毒副作用。因此，研究开发安全、高效、作用持久的降压、降脂中药是目前研究的重点课题之一。

复方中药DF是由具有多年临床经验的中医师提供的临床经验方，其主要成分为天麻、罗布麻叶、葛根、地龙等，临床用于治疗高血压病疗效确切。为了进一步探讨复方中药DF的降压作用，本实验采用自发性高血压大鼠(SHR)为实验动物，观察其对SHR血压、血清甘油三酯、总胆固醇、血管紧张素Ⅱ、内皮素的影响，为其临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

自发性高血压大鼠(SHR)72只，9～10周龄，雌雄各半，SPF级，体重240～300 g。血压正常的Wistar Kyoto大鼠(WKY)8只，9～10周龄，雌雄各半，SPF级，体重280～320 g。均购自北京维通利华。

1.2 试剂与仪器

BP-6动物无创血压测定仪(成都泰盟科技有限公司)，旋转蒸发仪R-52A(上海亚荣)。甘油三酯ELISA试剂盒、总胆固醇ELISA试剂盒、血管紧张素ⅡELISA试剂盒、内皮素ELISA试剂盒均购自上海基免实业有限公司，数据由该公司代测。

1.3 药材提取

中药复方DF主要成分为天麻、罗布麻叶、葛根、地龙等。地龙需单独进行特殊方法处理，其余药材一起处理。托谱利片(上海衡山药业有限公司生产，25 mg/100片，批号120317)，复方罗布麻片Ⅰ(山西云鹏制药有限公司生产，批号20121109)。

水提液：按处方组成取药材，加10倍量水，回流提取1 h，过滤。滤渣加8倍量水回流提取1 h。合并滤液，浓缩至相对比重1.05。放冷，加95%乙醇使醇浓度达40%，放置过夜，过滤后滤液浓缩备用。

醇提液：按处方组成取药材，加10倍量70%乙醇，回流提取1 h，过滤。滤渣加8倍量70%乙醇，回流提取1 h。合并滤液，放冷。加水使醇浓度达40%，放置过夜，过滤后滤液浓缩备用。

地龙提取液：按处方组成取相应地龙量，剪碎，加4倍量水，放冰箱冻实，解冻。反复5次，取上清液，同法提取2次，合并上清液，减压浓缩至相对比重1.05，用时按处方比例加入水提或醇提液中混匀(地龙提取液浓缩后放冰箱冻存防腐)。

1.4 分组与给药

SHR大鼠(北京维通利华)72只，随机分为9组，分别为空白对照组、水提液低剂量组、水提液中剂量组、水提液高剂量组、醇提液低剂量组、醇提液中剂量组、醇提液高剂量组、复方罗布麻片Ⅰ对照组、卡托普利片对照组。另取WKY大鼠8只作为对照。

大鼠普通喂养适应1周，每天灌胃给药，按2 mL/200 g灌胃给药，低剂量组为换算后的人日服计量，中剂量组为2倍日服计量，高剂量组为3倍日服计量。

1.5 观察指标

各组于第1、3、5、8、12、16、22天灌胃1 h后用BP-6动物无创血压测定仪测量血压。环境安静、恒温(26 ℃)，在清醒与非激怒状态下测量大鼠收缩压，连续测量3次，取均值。

给药结束3天后，颈动脉取血，分离血清，用相应试剂盒测定甘油三酯、总胆固醇、血管紧张素Ⅱ、内皮素水平，由上海基免实业有限公司代测。

1.6 统计学处理

2 结 果

2.1 复方中药DF对SHR大鼠收缩压的影响

从表1可见，SHR大鼠血压均高于WKY大鼠组，空白对照组SHR大鼠血压随时间不断升高(P<0.05)，说明11周龄SHR大鼠高血压正在逐步形成，并随着时间的延长，高血压程度逐渐加重；与空白对照组比较，从3天起，卡托普利组、中药复方DF水提高、中、低剂量组与空白组相比血压均明显降低(P<0.05)。从5天起，中药复方DF醇提高、中剂量组与空白对照组相比血压明显降低(P<0.05)，而复方罗布麻片Ⅰ对照组、醇提的低剂量组与空白对照组相比并无显著性差异。

尽管复方中药DF给药组中水提高剂量组的抗高血压效果最好，但由于药效学实验过程中，低剂量组的给药剂量为人日服剂量换算而得到大鼠给药剂量，而复方罗布麻片对照组和卡托普利对照组也为人日服剂量换算的大鼠给药剂量，故以低剂量组的抗高血压效果与对照组比较才更有意义。本研究将低剂量组与对照组进行了比较，在实验后期22天时，低剂量水提组与醇提组比较，其抗高血压效果明显(P<0.05)。

2.2 复方中药DF对甘油三酯、总胆固醇、血管紧张素Ⅱ、内皮素水平的影响

各实验组大鼠每天灌胃给药，最后1次给药3天后，取血测定血清中各指标，其结果见表2。SHR大鼠血清中甘油三酯、总胆固醇水平均比WKY大鼠组要高。但经给药后，无论是水提组还是醇提组，其甘油三酯、总胆固醇量的量与空白对照组相比，又有所降低。血管紧张素Ⅱ和内皮素水平的变化趋势与甘油三酯和总胆固醇的变化趋势相似，但变化水平不如前者明显，在醇提低剂量组中，血管紧张素Ⅱ、内皮素水平与空白对照组比较，并无显著性差异，这与高血压的结果较为相似。

表1各组给药1h后血压测定结果(mmHg)

组 别0天1天3天5天8天12天16天22天Wky组119．5±8．1119．7±6．5119．0±5．3119．0±7．8119．4±9．8118．2±6．8115．0±8．9117．6±11．3水提低组133．8±6．0132．3±8．7127．4±6．3a130．5±3．5a135．8±5．3a140．2±10．6a136．8±8．6ab140．9±6．4ab水提中组137．3±5．3130．9±9．8129．7±11．9a129．2±6．5a128．6±10．1a131．0±9．5a143．7±9．7a134．5±19．8ab水提高组134．7±12．2130．6±8．5126．9±2．7a128．0±7．5a126．3±1．9a126．1±5．9a130．3±6．1ab132．5±10．1ab醇提低组138．7±5．5137．2±5．1142．3±6．5138．5±8．3141．4±5．4146．4±9．9142．9±3．2154．2±4．7醇提中组131．6±9．8136．8±11．2149．5±8．4133．6±9．7a136．8±13．1a137．9±4．7a136．0±4．3a145．0±6．3a醇提高组139．2±7．1126．0±6．5151．9±20．3129．7±14．5a129．4±7．4a134．6±6．9a135．3±6．6a142．9±12．9a复方罗布麻片Ⅰ组136．5±7．3135．2±4．6133．4±10．3141．9±10．8146．3±8．3150．2±8．1148．7±7．3152．9±8．1卡托普利片组132．3±4．5126．6±3．0126．4±4．9a128．4±7．2a128．5±3．8a133．3±8．5a124．0±4．4a130．9±5．2a空白组134．7±5．4138．6±5．3145．6±8．5146．1±12．1149．9±12．7156．3±6．7157．2±14．3165．8±6．2

与空白组比较，a:P<0.05，与相应醇提组比较，b:P<0.05

表2各组血浆甘油三酯、总胆固醇、血管紧张素Ⅱ、内皮素含量的比较(n=6)

组 别甘油三酯(nmol/L)总胆固醇(nmol/L)血管紧张素Ⅱ(ng/ml)内皮素(μg/L)Wky组21．30±0．964．56±0．19294．40±6．3172．46±1．75水提低组26．80±4．225．51±0．15327．52±7．0388．23±2．33水提中组24．85±0．345．37±0．17317．72±9．9480．63±3．09水提高组23．62±0．604．98±0．18312．72±10．4180．02±2．17醇提低组27．35±0．585．80±0．14358．71±11．52a92．81±3．68a醇提中组27．76±0．555．78±0．19358．91±7．73a90．07±3．11醇提高组27．44±0．575．68±0．15340．71±9．9086．54±2．41复方罗布麻片Ⅰ组26．55±1．085．62±0．23336．71±6．9086．01±2．20卡托普利片组24．03±1．085．11±0．17324．32±7．7380．42±1．66空白组29．08±0．755．93±0．18362．22±8．1094．76±3．42

与空白组比较，a:P>0.05；其余均P<0.05

3 讨 论

WKY对照组在实验过程中未出现血压的变化，而SHR空白组在实验过程中血压逐渐上升，所购SHR大鼠为9～10周龄大鼠，适应1周后为10～11周龄，共实验3周，结束时为13～14周龄，而这个过程中刚好是高血压形成初期[3]，血压在不断上升，所以对于给药组在血压上的下降可能不是很明显，如果在高血压稳定期，则其降血压的效果可能更明显。

从表1中可以看出本复方具有明显的抗高血压作用。水提组所得成分在SHR大鼠高血压初步形成期能够控制血压的上升，在给药第1天均使血压有所下降，从第3天起，水提组分与空白对照的SHR大鼠组相比具有明显的降低血压的作用。其在高血压稳定期可以促使血压下降，其作用效果虽不如化学药卡托普利作用强，但比市售中药复方罗布麻片Ⅰ的效果好。

甘油三酯、总胆固醇与高血压的发病密切相关[4-5]，常伴随存在。从表2中可以看出，复方中药DF水提组均有一定程度降低甘油三酯、总胆固醇水平，说明其有一定的降血脂作用。血管紧张素Ⅱ是其维持和升高血压的关键因子[6]，也是最强的内源性收缩血管因子之一。内皮素是由内皮细胞合成的具有强大的缩血管功能的活性多肽，内皮素与其受体结合，介导平滑肌细胞依赖的血管收缩效应[7]。中药复方DF提取物可能通过降低血清中内皮素和血管紧张素Ⅱ含量发挥降压效应，但中药复方DF成分复杂，作用机制尚待进一步研究。处方中的成分葛根、地龙等均有一定的抗高血压效果，是否还能通过其他途径达到降压功效尚需作进一步的研究探讨。

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[7] 董武松 李馨欣 杨俊.内皮素-1在心血管系统中的作用国际心血管病杂志[J].2012，39(3):153-156.

AntihypertensiveEffectofCompoundTraditionalChineseMedicine

WU Xiaojuan,PU Zhilan,CAO Xuan,et al
(TheFirstAffiliatedHospital,UniversityofSouthChina,Hengyang,Hunan421001,China)

ObjectiveTo investigate the antihypertensive effect and the mechanism of the Chinese medicine compound DF in spontaneous hypertensive rats (SHR).MethodsEffecctive components were extracted by water or alcohol in the Chinese medicine compound DF.Blood pressures of SHR rats were measured indirectly by tail arteries in awaken rats.The level of triglyceride,total cholesterol,the AngiotensinⅡand the endothelin in blood was measured by the corresponding ELISA kits.ResultsThe blood pressure of water extrations were more decreased than that of alcohol extaction in later days after administration.Compared with the model group，the triglyceride,the total cholesterol,the AngiotensinⅡwere reduced significantly in the Aqueous extract solution low-dose group of Chinese medicine compound DF.ConclusionsThe Chinese compound formula DF has a significant antihypertensive effect in SHR.The mechanism may be related to its actions in reduction of triglyceride,total cholesterol,the AngiotensinⅡand the endothelin level in blood.

traditonal chinese medicine compound； hypertension； rats

2095-1116(2014)05-0472-03

2014-01-08

伍小娟，本科，主管药师，研究方向：药物制剂研究，E-mail:1620489796@qq.com.通讯作者唐国涛，博士，讲师，研究方向：药物制剂研究，E-mail:tqtzq@163.com.

R259.441

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(此文编辑：朱雯霞)