脑脊液tau蛋白和磷酸化tau蛋白测定在阿尔茨海默病诊断中的应用价值

陈兵

（中国人民解放军第309医院神经内科，北京 100091）

阿尔茨海默病（AD）是一种呈进行性发展的神经系统退行性病变，起病较为隐匿，早期不易察觉，患者主要表现为认知和行为功能减退，并伴有不同程度的精神障碍，多见于老年患者。目前，常用的AD诊断检查包括神经心理学测验、血液学检查、脑电图和脑脊液检测，其中特异的AD生化指标检测已成为国内外学者［1－3］研究的重点。Tau蛋白主要在中枢神经系统神经元的轴突表达，它能结合并稳定微管系统，而高度磷酸化tau（p－tau）蛋白与微管的结合力下降，导致微管系统解体，进一步可引起神经轴突退化［4］。同时由p－tau蛋白形成的神经元纤维缠结（NFT）也是AD患者脑病变的基础［5］。由于AD患者神经细胞膜通透性增加，可以通过检测进入脑脊液中的tau蛋白和p－tau蛋白来间接反映患者脑组织中tau蛋白和p－tau蛋白的含量。因此，本研究通过检测AD患者脑脊液tau蛋白和p－tau蛋白的含量，探讨其在AD患者鉴别诊断中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2012年4月～2014年4月在中国人民解放军第309医院和佳木斯大学附属医院接受治疗的AD患者、血管性痴呆（VD）患者及非神经系统疾病患者共150例。其中，AD组患者50例，男27例，女23例，平均（75.3±4.5）岁；VD组患者50例，男30例，女20例，平均（74.5±5.2）岁；非神经系统疾病组患者50例，男24例，女26例，平均（75.9±4.8）岁。3组患者年龄、性别比例等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。入选AD患者均符合世界卫生组织国际疾病分类ICD－10中关于AD的诊断标准。所有患者均接受简易智能精神状态检查量表（MMSE）与缺血指数量表（Hachinski评分）检测，其中AD患者MMSE评分10～23分，Hachinski评分≤4分；VD患者MMSE评分8～21分，Hachinski评分≥7分，且伴有脑中卒病史或出现神经系统定位体征。

1.2 检验方法

所有患者麻醉后行腰椎穿刺术抽取脑脊液2 mL，其中AD患者和VD患者于发病后30～60d内抽取脑脊液。采用人p－tau蛋白检测试剂盒（Innotest hTAUAg，Innogenetics NV 公 司，Belgium），利用双抗体酶联免疫吸附法测定脑积液中总tau蛋白和p－tau蛋白含量。

1.3 统计学方法

应用SPSS 17.0统计学软件对实验数据进行处理，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用方差分析，两两比较采用t检验，计数资料比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 患者脑脊液tau蛋白和p－tau蛋白含量比较

AD组患者脑脊液tau蛋白含量为（488.2±173.3）pg／mL，显著高于 VD组的（306.2±129.2）pg／mL和非神经系统疾病组的（217.3±79.1）pg／mL（P＜0.05）；AD组患者脑脊液中p－tau蛋白含量为（190.3±83.1）pg／mL，显著高于 VD组患者的（73.4±36.2）pg／mL和非神经系统疾病组的（55.4±35.2）pg／mL（P＜0.05）；VD组患者脑脊液中tau蛋白和p－tau蛋白含量与非神经系统疾病组患者比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）（见表1）。

表1 患者脑脊液tau蛋白和p－tau蛋白的含量（pg／mL）

2.2 灵敏度和特异性分析

结合AD组和VD组患者脑脊液tau蛋白和ptau蛋白含量测定值绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线）。结果显示，以脑脊液tau蛋白≥370 pg／mL作为诊断切点，所得的灵敏度为89.6%，特异度为78.8%，检验可靠性和与VD患者鉴别率为82.4%和66.8%；以脑脊液 p－tau蛋白≥120pg／mL作为诊断切点，所得到的灵敏度为93.5%，特异度为89.9%，检验可靠性和与VD患者鉴别率为91.7%和82.6%（见图1）。

图1 tau蛋白和p－tau蛋白含量测定的ROC曲线

3 讨论

人体中枢神经和外周神经富含tau蛋白，其N－末端是联系微血管与膜成分之间的桥梁，能够维持人体微血管的稳定［6］。正常情况下，1mol tau蛋白磷酸化2mol磷，当病变等其他因素引起tau蛋白高度磷酸化时，异常tau蛋白与微血管结合能力下降，还可竞争性与正常微管蛋白结合，进而破坏微血管系统的动态稳定，最终引起AD等神经系统病变［7－9］。AD以老年斑和 NFT为病理特点，多发于老年群体，患者常出现记忆和执行功能障碍、人格或行为改变、失语、失用、失认和视空间技能损害等症状，严重影响生活质量［10，11］。

AD临床治疗方法主要是给予乙酰胆碱酶抑制剂类的药物治疗，可增强中枢神经系统活动，延缓痴呆等病情的进一步恶化。AD患者神经元纤维纠结度明显高于非神经系统疾病人群，而神经元纤维缠结又与tau蛋白异常磷酸化相关，因此，AD患者脑脊液中p－tau蛋白含量可能对于AD患者早期诊断具有潜在意义［12］。Hampel等［13］报道了 AD 患者脑脊液中p－tau蛋白显著增高。本研究中，AD组脑脊液tau蛋白含量显著高于VD组和非神经系统疾病组，差异有统计学意义（P＜0.05）；AD组脑脊液p－tau蛋白含量显著高于VD组和非神经系统疾病组，差异有统计学意义（P＜0.05）。对于AD患者的检测，以tau蛋白含量≥370pg／mL为AD诊断标准时，灵敏度、特异度、检验可靠性和与VD患者鉴别率分别为89.6%、78.8%、82.4%和66.8%；以p－tau蛋白含量≥120pg／mL为AD诊断标准时，灵敏度、特异度、检验可靠性和与VD患者鉴别率分别为93.5%、89.9%、91.7%和82.6%。因而将p－tau蛋白作为AD患者鉴别诊断具有潜在临床价值。然而，由于实验中选取对象具有一定局限性，建议选取正常人作为对照组，以进一步验证p－tau蛋白含量在AD诊断中的价值。

综上所述，脑脊液p－tau蛋白含量的测定作为辅助指标，有助于AD患者的鉴别诊断。同时，应不断完善现有的诊断系统，合理使用不同量表和生化指标，对AD患者做到早诊断、早治疗，从而改善患者的生活质量。

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