替米考星肠溶微丸的制备及其评价

韩萌萌，李沙沙，孙朋超，梁 倩，李敏营，张娜娜，赵永星

（郑州大学药学院，郑州450001）

替米考星是由泰乐菌素的水解产物半合成的一种大环内酯类抗生素，对防治畜禽由胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌、支原体等感染引起的肺炎、禽支原体病及泌乳动物的乳腺炎有良好的效果［1］。由于替米考星在酸性环境中不稳定，目前国内外上市的替米考星剂型仅有替米考星预混剂、注射液等［2］，这些剂型不仅成本高，而且给药不方便。微丸属于口服多剂量剂型，不仅给药方便，而且药物的体内吸收速度均匀且个体间生物利用度差异较小［3］。为了解决替米考星在酸性环境中不稳定［4］，口服在胃中易被破坏以及药物味苦［1］的问题，本实验将替米考星制备成肠溶微丸制剂，并对其进行了表征和初步评价。

1 材料与方法

1.1 材料 替米考星和花生壳粉（河南官渡兽药制造有限公司）、微晶纤维素（安徽山河药辅料股份有限公司）、药用淀粉和药用糊精（曲阜市药用辅料有限公司）、十二烷基硫酸钠（山东聊城安信药用辅料有限公司）、欧巴代®肠溶薄膜包衣预混剂（上海卡乐康包衣技术有限公司）。

1.2 仪器设备 E-50挤出滚圆设备（重庆英格造粒包衣技术有限公司）、Mini DPL 0.2型流化床（重庆精工机械）、RCZ-8B溶出仪（天大天发科技有限公司）、Nikon Eclipse 80i型荧光显微镜（日本Nikon公司）、UV-2450紫外分光光度计（日本岛津）、Nicolet 380-红外分光光度计（美国赛默飞世尔科技）、DSC-200F3差示扫描量热仪（德国耐驰科学仪器贸易上海有限公司）。

1.3 制备方法

1.3.1 微丸的制备 按处方量称取药物与辅料，过100目筛，混合均匀，以1%羟丙基甲基纤维素为粘合剂制软材，用孔径1.0 mm的筛网以30 r／min的挤出速度挤出，挤出后在滚圆机内以800 r／min的速度滚转1.5 min，微丸于60℃流化床干燥1 h，筛分后取16～24目的微丸作为合格的微丸。

1.3.2 微丸的包衣 用80%的乙醇配制浓度为10%的肠溶包衣液，磁力搅拌1 h，使其充分溶解，过100目筛备用。将合格的微丸置于流化床中，设置进风温度为70℃，物料温度为60℃。风机频率25 Hz，雾化压力0.06 MPa，蠕动泵流速2 mL／min，包衣结束后，固化 30 min［5］，得替米考星肠溶微丸。

1.4 替米考星含量测定 紫外分光光度计扫描替米考星溶液，结果显示其在292 nm波长处有最大吸收。在此波长下测系列浓度的供试品溶液和各供试品溶液的吸光度［6］。以样品吸光度（A）对浓度（C）进行线性回归，得直线方程 A＝0.0559C－0.0045 （R2＝ 0.9999） 。 结果显示替米考星浓度在6～45 μg／mL范围内与吸光度有良好的线性关系，可用于替米考星的含量测定。

取替米考星微丸适量，研细，精密称取适量（约相当于替米考星25 mg），置于100 mL容量瓶中，加水至使其完全溶解，定容至刻度。量取10 mL稀释至100 mL，作为供试品溶液。同法称取原料药适量，制得25 μg／mL的替米考星作为对照品溶液，在292 nm的波长下，分别测定吸光度，计算得到替米考星微丸相对含药量为103.00%。

1.5 替米考星微丸释放度的测定 参照2010版《中国药典》附录 XD释放度测定法第二法［7］，以900 mL 0.l mol／L盐酸溶液作为溶出介质，设置温度（37士0.5）℃，各取1 g微丸投入溶出杯中，采用桨法，转速 100 r／min，分别于 20、40、60、80、100、120 min取样，取样量2 mL，10 mL容量瓶定容。结束后，弃去酸液，立即加入pH 6.8的磷酸钠缓冲溶液继续运转，分别于 130、140、150、160 min 取样，取1 mL溶出液至10 mL容量瓶定容，紫外测定吸光度，计算药物的累积释放量［8］。

1.6 替米考星微丸的确证 将药物、药物与辅料的物理混合物和替米考星肠溶微丸进行红外扫描，比较其红外光谱图，可以判断药物在微丸中的变化，由替米考星主要官能团的特征峰的变化，进一步确定药物在制剂中的存在状态。另外，差示扫描量热仪分别测3组物质的熔点，根据其熔点的变化，可以推断药物在制备的过程中药物存在形式的变化。

2 结果

根据预实验结果和文献报道［9］，影响微丸成型的因素主要是微晶纤维素的处方量，而包衣增重对微丸释放度影响较大。因此，本文就这两个因素进行考察，结果如下。

2.1 不同处方量的微晶纤维素对微丸成型性的影响 保持其他因素不变，通过改变填充剂花生壳粉和微晶纤维素的量来制备微丸。结果如图1所示，微晶纤维素的处方量分别是15%、25%、30%时，在电子显微镜下观察，4倍镜下微丸的形状分别如图1中A、B、C所示；40倍镜下微丸的表面分别如图1中 D、E、F 所示。

2.2 包衣增重量对微丸释放度的影响 肠溶微丸的溶出度主要受到肠溶包衣材料性质的影响，肠溶包衣材料的厚度在一定程度上决定着微丸的释放速率［10］。固定处方中原辅料的量，考察不同包衣增重（5%、10%、15%）对药物释放的影响。由图2可知，在酸性介质中，包衣增重不同的微丸2 h后释放度分别达到67.46%、9.98%、5.97%。在pH 6.8的磷酸缓冲盐介质中，最终累积释放量分别达到94.00%、90.78%、69.60%。

图2 包衣增重量对微丸释放度的影响

2.3 替米考星微丸的确证

2.3.1 红外分析 替米考星、替米考星与辅料的物理混合物、替米考星微丸红外光谱见图3所示。根据参考文献［11］其中在特征区 3450 cm-1，指纹区1200 cm-1是叔醇羟基的特征峰，2960 cm-1、2920 cm-1是甲基、亚甲基的伸缩振动峰，1650 cm-1是叔胺中碳氮键的伸缩振动峰，1050～1100 cm-1是六元单氧环中碳氧单键伸缩振动峰。

2.3.2 差示扫描量热分析 替米考星、替米考星与辅料的物理混合物、替米考星微丸DSC图谱见图4所示。替米考星为单峰，熔点为101.2℃；替米考星和辅料物理混合物的熔点在105.1℃；替米考星微丸在100℃没有固定的熔点。

图4 替米考星（A）、替米考星与辅料的物理混合物（B）和替米考星微丸（C）的DSC图谱

3 讨论

本实验考察微晶纤维素用量与替米考星微丸成型性的关系，15%的微晶纤维素成型性最差，滚圆后成不规则状，表面粗糙；30%的微晶纤维素成型性相对较好，微丸粒径也比较均匀，表面光滑。结果表明微晶纤维素用量越大，微丸越圆整、成型性越好、收率也越高。包衣膜增重对替米考星释放的影响显著，且随着包衣增重的增加，药物在酸性释放介质中的释放度逐渐降低，随着时间的延长，在缓冲盐释放介质中包衣膜出现不同程度的溶解，导致释放速率增大。包衣增重5%的处方在酸中释放较快，2 h内药物释放量达到60%以上，140 min后在磷酸盐中释放量达到90%以上；包衣增重15%的处方在酸中释放缓慢，在磷酸盐中释放不足70%；包衣增重10%的处方在酸中2 h内释放不超过10%，在缓冲盐介质释放实验中，药物达到肠溶的效果，160 min后药物释放达到90%以上。按照肠溶制剂的要求［7］，肠溶制剂在酸中释放量不超过10%，在磷酸盐中释放不低于70%。因此包衣增重10%的微丸在肠道中溶解释放的效果最好。

挤出滚圆法是制备球形微丸一种比较理想的方法，其设备操作简单，生产能力强、成本低，制得的含药微丸载药量高［12］。红外图谱结果显示：A、B在3450 cm-1的位置出现强的-OH伸缩振动峰，但C中此特征峰消失，说明药物中的-OH被掩盖起来，同时在1050～1100 cm-1处，A、B中有明显的药物中六元单氧环的特征峰，但在C中此官能团的特征峰消失，初步证明了替米考星制成微丸后是以固体分散体的形成存在［13］。结合差示扫描量热分析实验结果，替米考星微丸图C与物理混合物图B相比，峰形发生比较大的变化，其中100℃左右的峰完全消失，也没有形成新峰，进一步证实替米考星以无定型固体共沉淀物的形式形成固体分散体。可能是在制备微丸过程中，药物经混合、制软材、挤出滚圆等一系列处方工艺后，药物高度分散在微丸中，以无定型固体共沉淀物的形式得到稳定的固体分散体，有利于药物的溶出［14］。结合释放度实验，在缓冲盐中药物释放量明显增大，可以达到肠溶释放的效果且有利于增加药物的吸收，提高药物的生物利用度。因此，本实验制备替米考星肠溶微丸的方法具有可行性。

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