儿童肾病综合征患者血清视黄醇结合蛋白4水平与氧化低密度脂蛋白的关系研究

牛冬梅， 洪 骏， 吴 嘉， 宋佳希， 于瑞杰， 袁云龙， 汪俊军

(南京军区南京总医院全军临床检验医学研究所，江苏南京210002)

视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein 4，RBP4)属于脂质运载蛋白超家族，主要由肝脏合成，可被肾小球滤过并在肾小管被重吸收和分解［1］。早期研究发现RBP4可灵敏地反映肾功能的早期损伤。一般认为当肾小球滤过功能下降时，血清RBP4水平可明显升高;当肾小管功能受损时，尿液RBP的排泄则会显著增加。近年研究［2］表明，血清 RBP4与小而密低密度脂蛋白(small and dense of low density lipoprotein，sdLDL)明显独立相关，而sdLDL易于氧化，与血清高氧化低密度脂蛋白(oxidized-low density lipoprotein，ox-LDL)水平密切相关，血浆高sdLDL和ox-LDL水平是动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)发生的强危险因素。推测RBP4可能与ox-LDL相关联，参与了AS相关的脂质代谢过程，并已在冠心病和高脂血症患者中进行了证实［3-4］。

肾病综合征(nephrotic syndrome，NS)患儿常伴有明显的脂代谢异常，体内氧化、抗氧化活性失衡，脂蛋白被高度氧化。我们先前的研究已证实在NS患儿中ox-LDL水平明显升高，并与疾病的严重程度密切相关［5］。目前，国内、外关于NS患儿血清RBP4水平与脂质代谢的关系的研究较少，RBP4与ox-LDL之间的关系尚不明确。据此，我们拟探讨NS患儿血清RBP4与ox-LDL的相关性，为进一步阐述NS相关的血脂异常代谢机制提供依据。

材料和方法

一、研究对象

2012年1月至12月在南京军区南京总医院小儿科住院确诊的原发性NS患儿118例，男84例，女34例，年龄1～14岁;以健康体检儿童45名作为正常对照组，男32名，女13名，年龄1～14岁。2组之间性别、年龄差异均无统计学意义(P＞0.05)。

二、方法

所有对象均禁食12 h以上，采集空腹血液样本，自然凝固，1 h内离心留取血清，－70℃保存。人血清RBP4水平采用免疫比浊法测定，试剂盒及配套校准品购自上海北加公司。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清ox-LDL水平［6］，以兔抗人ox-LDL抗体为包被抗体、酶标记羊抗人载脂蛋白B100(apo B100)抗体为检测抗体。血清总胆固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyeride，TG)、尿素(urea)、肌酐(crea，Cr)和白蛋白(albumin，Alb)试剂及配套校准品购自Randox公司。低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoproteincholesterol，LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)试剂及脂蛋白校准品购自日本第一化学株式会社。仪器均为HITACHI 7600全自动生化分析仪(日本日立公司);非高密度脂蛋白胆固醇(non high density lipoprotein-cholesterol，non HDL-C)采用以下公式计算:non HDL-C=TC－HDL-C。

三、统计学方法

采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。正态分布数据以±s表示，偏态分布数据以中位数(P25～P75)表示。2组间比较用成组设计的t检验，偏态分布数据经log转换使其符合正态分布后再进行比较;变量间相关性用Sperman相关检验;多因素分析采用多元线性回归处理。P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、NS组和正常对照组各项目测定结果比较

NS 组血清 RBP4、ox-LDL、TC、TG、HDL-C、LDL-C和Urea水平明显高于正常对照组(P＜0.05)，Alb水平则明显低于正常对照组(P＜0.05)，见表1。

表1 NS组和正常对照组各项目测定结果比较

二、NS患儿血清RBP4与血脂各指标间的相关性

血清 RBP4 与ox-LDL、TC、TG、LDL-C、non HDL-C及Urea均呈正相关，见表2。分别以RBP4、ox-LDL为自变量，以与有相关性的其他指标为应变量进行多元线性回归分析。分析结果显示，NS组血清 TC(β=0.617，P＜0.01)、Urea(β=0.259，P＜0.01)和 ox-LDL(β=0.199，P＜0.05)共同影响了48.4%的RBP4的变化;而血清non HDL-C(β=0.558，P＜0.01)、RBP4(β=0.167，P＜0.05)和 TG(β=0.174，P＜0.05)则共同决定了61.4%的ox-LDL变化。

表2 NS患儿血清RBP、ox-LDL与其他指标的相关性

讨 论

NS是儿童常见的一种肾小球疾病，高脂血症为其主要临床特征之一。高脂血症与进行性肾脏损伤、AS的发生有密切的联系。NS患儿肾小球毛细血管壁通透性损伤使体内氧自由基增加，脂质和脂蛋白在过氧化反应过程中释放大量的活性氧，进一步损伤肾上皮细胞结构的完整性和肾小球的通透性。另外，高浓度的ox-LDL也具有一定的细胞毒性，可直接损害肾小球动脉的内皮细胞及平滑肌细胞。总之，肾脏病变导致脂代谢障碍，脂质代谢异常与肾小球硬化的发生密切相关，是NS病情加重、复发及迁延的重要因素［7-8］。本研究结果显示NS患儿血清ox-LDL水平明显升高，与Urea呈明显正相关，且与Alb呈明显负相关，这与文献［5］报道一致。

儿童NS的病理改变主要为肾小球损伤。因此，本研究发现NS患儿血清RBP4水平明显升高。多项研究还证实RBP4与公认的致AS的脂蛋白类及脂代谢中的酶类存在独立相关性［9-12］，提示RBP4可能参与脂质代谢。RBP4参与脂代谢的机制尚未阐明。由于RBP4是循环中视黄醇的唯一转运体，而视黄醇是形成维甲酸X受体(retinoid X receptor，RXR)的前体。推测RBP4调节脂代谢的可能机制之一是:RBP4可通过RXR，上调载脂蛋白CⅢ(apo CⅢ)表达，apo CⅢ可进一步抑制脂蛋白脂肪酶活性，促进极低密度脂蛋白(VLDL)水平的升高，升高的VLDL促进易于氧化的sdLDL的形成［12］。本研究显示 NS患儿血清 RBP4 水平与ox-LDL、LDL、nonHDL-C、TG、TC、Urea均呈明显正相关，证实NS患儿的发生、发展过程中伴随着血清RBP4水平的改变。进一步多因素分析显示，血清TC、Urea和ox-LDL水平共同影响了 48.4%的 RBP4的变化，且血清 TG、RBP4、nonHDL-C水平共同决定了61.4%的 ox-LDL变化。进一步证实NS患儿的肾脏病变过程伴随着血清RBP4水平的改变，升高的RBP4与ox-LDL的增加有一定的关联。

总之，RBP4可能通过调节脂质代谢，参与了NS的发生、发展。连续监测NS患儿的血清RBP4水平有助于治疗效果的评估以及预后的判断。

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