糖尿病性视网膜病变患者血清抵抗素与血管内皮生长因子的相关性研究＊

陈 萍，李海军

（1.重庆市长寿区人民医院眼科，重庆 401220；2.第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科，重庆 400042）

糖尿病性视网膜病变（DR）是糖尿病最常见的并发症之一，最终会导致双眼不可逆性失明。DR的发病机制一直在探讨之中，血管内皮细胞生长因子（VEGF）在糖尿病视网膜病变发生、发展过程中所起的作用已获得一定的认可［1］，有报道［2］认为抵抗素（Resist）能诱导VEGF产生，也有报道［3］抵抗素水平与糖尿病视网膜病变严重程度具有相关性，本研究通过探讨血清抵抗素Resist与血管内皮生长因子（VEGF）的关系，为阐明糖尿病性视网膜病变的发病机制及治疗提供理论依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2009年12月～20013年6月期间本院眼科就诊且确诊为糖尿病性视网膜病变的患者107例为实验组，男49例，女58例，年龄（65.17±11.48）岁，诊断分期按照糖尿病性视网膜病变新的国际临床分级标准（2002年）进行分级［4］，其中Ⅰ期18例35眼、Ⅱ期20例40眼、Ⅲ期17例34眼，Ⅳ期19例38眼、Ⅴ期17例34眼、Ⅵ期16例32眼，均为Ⅱ型糖尿病；另取20例无视网膜病变的Ⅱ型糖尿病患者为糖尿病组，男12例，女8例，年龄（64.81±12.17）岁；20例健康体检的健康志愿者为对照组，男11例，女9例，年龄（64.02±11.86）岁。三组年龄、性别比无显著差异（均为P＞0.05），具有可比性。所有研究对象均排除糖尿病急性并发症、恶性肿瘤、一个月内使用胰岛素、胰岛素增敏剂、影响糖代谢的药物服用史及严重肝、肾功能不全者。

1.2 研究方法 三组患者均于清晨采集空腹肘静脉血5ml，静置30min，3000转／分离心20min，取血清贮存在一80℃冰箱备检。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清VEGF与抵抗素的水平，抵抗素试剂盒购自上海轩昊科技公司，灵敏度：0.05ng／ml，人VEGF ELISA试剂盒购自深圳晶美生物工程公司，最小可测值为30pg／ml，所有检测步骤严格按照试剂盒说明书操作，采用BIO－RAD550型酶标仪检测，在450nm处读取OD值后按标准曲线换算成血清含量。

1.3 统计学方法 用SPSS 16.0统计软件对数据进行统计分析，计量资料采用均数±标准差（）表示，多组间计量资料比较采用ANOVA方差分析，多个样本均数的两两比较采用LSD－T检验，以Pearson相关分析的方法来分析两组数据间的相关性，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清抵抗素与血清VEGF在各组差异 实验组血清抵抗素与血清VEGF水平显著高于无视网膜病变的糖尿病组和对照组（P＜0.05），糖尿病组高于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 各组血清抵抗素Resist与VEGF水平的比较（）Table 1 The resist and VEGF of the patients

表1 各组血清抵抗素Resist与VEGF水平的比较（）Table 1 The resist and VEGF of the patients

注：与对照组比较①P＜0.05，与糖尿病组比较②P＜0.05

组别 n Resist（ng／ml） VEGF（pg／ml）0.00120 5.76±0.12 47.85±13.71糖尿病组 20 6.51±0.23① 59.85±14.49①实验组 107 9.09±2.56①② 149.43±76.55①②F／p 85.74／0.001 97.61／对照组

2.2 随着视网膜病变的发展，血清抵抗素Resist与VEGF水平逐渐升高，在各期间两两比较，有显著差异（P＜0.05），见表2。

表2 不同分期糖尿病性视网膜病变患者血清抵抗素Resist与VEGF水平的比较（）Table 2 The resist and VEGF of different stage of diabetic retinopathy

表2 不同分期糖尿病性视网膜病变患者血清抵抗素Resist与VEGF水平的比较（）Table 2 The resist and VEGF of different stage of diabetic retinopathy

注：与Ⅰ期比较①P＜0.05，与Ⅱ期比较②P＜0.05，与Ⅲ期比较③P＜0.05，与Ⅳ期比较④P＜0.05，与Ⅴ期比较⑤P＜0.05

分期 n Resist（ng／ml） VEGF（pg／ml）0.00118 6.72±0.34 68.43±17.55Ⅱ期 20 7.49±0.25① 86.91±19.22①Ⅲ期 17 8.21±0.56①② 99.75±20.24①②Ⅳ期 19 9.34±0.78①②③ 131.65±34.49①②③Ⅴ期 17 9.89±1.17①②③④ 160.18±49.43①②③④Ⅵ期 16 10.11±1.53①②③④ 187.46±63.42①②③④⑤F／p 265.1／0.001 140.25／Ⅰ期

2.3 糖尿病性视网膜病变患者血清抵抗素Resist与VEGF水平的相关性 Pearson相关分析显示，糖尿病性视网膜病变患者血清血清抵抗素Resist与VEGF水平呈正相关（r＝0.027，P＝0.001），见图1。

图1 糖尿病性视网膜病变患者血清抵抗素Resist与VEGF水平的相关性分析Figure 1 The relation of resist and VEGF

3 讨论

新生血管形成使视网膜毛细血管功能紊乱、硬化与闭塞导致视网膜血液循环障碍，致使视网膜出血及渗出、神经纤维层微小梗死是糖尿病视网膜病变的主要病理改变。但目前糖尿病视网膜病变的发病机制尚在探讨之中，除了缺血、缺氧及炎症诱导的血管生成因子与抑制因子之间的不平衡是导致眼部新生血管形成外，也有多种细胞因子在糖尿病视网膜病变的发生发展中起作用，其中血管内皮生长因子（VEGF）被认为是眼部最主要的促血管生成因子，有效抑制VEGF的过度分泌可以治疗糖尿病视网膜病变，但仍有许多患者对抗VEGF治疗并无强烈的反应，这提示或许还有其它的因子参与了新生血管形成［5］，荆爱玉等［6］发现：空腹血浆抵抗素水平在糖尿病微血管病的发生、发展中可能起一定作用，抵抗素是一种脂肪内分泌因子，可以引起胰岛素抵抗，与糖尿病和肥胖有关［7］，但关于糖尿病性视网膜病变患者血清抵抗素与血管内皮生长因子（VEGF）的关系尚未见报道。

本研究对Ⅱ型糖尿病视网膜病变患者、无视网膜病变的Ⅱ型糖尿病患者及健康志愿者对比发现：糖尿病视网膜病变患者血清抵抗素与血清VEGF水平显著高于无视网膜病变的Ⅱ型糖尿病患者和健康者，无视网膜病变的Ⅱ型糖尿病患者高于健康者，表明无视网膜病变时糖尿病患者的体内血清抵抗素与血清VEGF已经有了变化，糖尿病视网膜病变发病隐匿而且进展缓慢［8］。Ⅰ期、Ⅱ期和Ⅲ期为单纯型病变，即非增殖性糖尿病性视网膜病变，非增殖性糖尿病性视网膜病变发展到一定程度时由于新生血管过度增殖，在视网膜组织附近逐渐形成纤维条带，视网膜受到牵拉，会进一步发展为形成增殖性糖尿病视网膜病变，即Ⅳ期、Ⅴ期和Ⅵ期为增殖性糖尿病性视网膜病变，本研究发现：随着视网膜病变程度的发展，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期、Ⅴ期和Ⅵ期血清抵抗素与血清VEGF水平逐渐升高，在各期两两之间有显著差异，血清抵抗素与血清VEGF随着糖尿病性视网膜病变程度加重而升高，VEGF的增加主要是由视网膜Muller细胞分泌的［9］。VEGF是一种促新生血管形成的生长因子，且能刺激内皮细胞基底膜，使其上有明显血管样管道形成，VEGF通过两种酪氨酸激酶受体（VEGFR－1和 VEGFR－2）对血管细胞发生作用，这两种受体是视网膜血管和神经的组成成分，VEGFR－2主要存在于星形胶质细胞、Muller细胞、神经节细胞以及视网膜色素上皮细胞中，过量的VEGF促进大量的新生血管形成，导致了糖尿病性视网膜病变。本研究结果一方面验证了糖尿病性视网膜病变患者有过度分泌的VEGF，另一方面提示血清抵抗素与糖尿病性视网膜病变的发展具有某种联系。

本研究在相关性分析中发现：糖尿病视网膜病变患者的血清抵抗素与血清VEGF水平具有正相关性，表明血清抵抗素可能通过参与新生血管形成而促进糖尿病性视网膜病变的进展，有研究［10］认为：抵抗素与Ⅱ型糖尿病患者的并发心血管病变密切相关，也有研究［11］认为：抵抗素可以通过促进内皮细胞增殖和迁移，促进毛细血管样管道形成，上调VEGF受体和MMP以及激活ERK1／2、p38MAPK途径磷酸化作用，促进新生血管形成。由于目前相关文献少，对血清抵抗素与血清VEGF水平在糖尿病性视网膜病变中的作用机制未形成定论，进行需要进一步分析研究非增殖性糖尿病性视网膜病变与增殖性糖尿病性视网膜病变患者血清抵抗素与血清VEGF水平的差异及血清抵抗素与血清VEGF在糖尿病性视网膜病变中的作用机制。

4 结论

血清抵抗素与血清VEGF随着糖尿病性视网膜病变程度加重而升高，血清抵抗素与血清VEGF水平具有正相关性，血清抵抗素可能通过参与新生血管形成而促进糖尿病性视网膜病变的进展。

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