猪李氏杆菌病药敏试验

潘永娜 宋世杰　钱丽莉

猪李氏杆菌病发病率低，病死率高，常给养猪业造成经济损失。药物防治是控制本病的重要手段，但李氏杆菌是细胞内寄生菌，易产生耐药性，给临床治疗带来很大困难，所以，治疗本病时，应通过药敏试验选择敏感抗生素，才能达到满意的治疗效果。

2013年2月，普兰店市某养猪场饲养80头30～40日龄仔猪突然发病，精神沉郁、食欲减少或废绝、腹泻、呼吸困难、运动失调、转圈、角弓反张，并出现死亡。剖检见皮肤有紫斑，黏膜、浆膜有轻微出血，腹水增多，胃底部有出血斑，小肠充血，心肌有针尖大小灰白色坏死灶，肺肿大，在心叶、尖叶、膈叶切面均有散在的灰红色、灰白色点状病灶，肝脏肿大，颜色变浅，表面有灰白色坏死灶。本次发病仔猪9头，死亡5头。经细菌分离鉴定，确定为产单核细胞李氏杆菌感染。

一、药敏试验方法

1.病原分离培养 无菌取心、肝、肺、脾、淋巴结和脑等组织，分别接种于普通琼脂、鲜血琼脂、麦康凯琼脂平板培养基上，37℃需氧培养24小时，观察病菌生长情况。在鲜血平板上菌落呈淡灰色、细小、透明、光滑、边缘整齐；在普通培养基上培养24小时后，可形成直径为0.15～1毫米、圆形、灰色、透明、边缘整齐的菌落，菌落较小，生长缓慢，呈乳白色、圆点状；在麦康凯琼脂培养基上，形成针尖大小、无色、透明菌落。钩取单个菌落再进行纯培养。

2.生化试验 分离菌经24小时血清平板纯培养后，进行生化试验。该细菌能分解葡萄糖、麦芽糖、鼠李糖、果糖且产酸不产气；不能分解甘露醇、木糖和乳糖；靛基质及硫化氢试验阴性；不液化明胶；甲基红试验和V-P（二乙酰试验）反应阳性；不还原硝酸盐。

3.药敏试验 采用纸片法，取纯化菌种，用生理盐水适当稀释后，吸取0.1毫升接种于琼脂平板表面，用涂抹棒涂布均匀，将药敏片贴于培养基表面，各片距离相等，37℃培养24小时，观察结果。

二、结论

本次试验该菌对氨苄青霉素、庆大霉素、链霉素、环丙沙星、卡那霉素高度敏感；对磺胺嘧啶钠、氟苯尼考、强力霉素、复方新诺明、氧氟沙星、克林霉素、诺氟沙星中度敏感；对新霉素、土霉素、红霉素、头孢唑啉不敏感。

通过以上的药敏试验，用青霉素克钾对发病猪场内发病的9头猪，按每公斤体重1万～1.5万单位，肌肉注射，每日1次，连注3日。3日后发病猪体温下降，且有饮欲、食欲，1周后不再死亡猪只，且全部康复。对其他未发病的66头猪用链霉素，每头猪50万～100万单位，肌肉注射，每日2次，连注2日，进行预防治疗，1周后未发现有发病猪只。