血清TK1对肺癌患者的诊断和复发评估价值的研究

朱 明 韩卫卫 齐秋锋 包燕青 张亚平 刘永萍

苏州大学附属常州市肿瘤医院 1 肿瘤科 2 胸外科，江苏省常州市 213002

细胞质胸苷激酶1（TK1）是一种嘧啶补救途径的激酶，与DNA的合成和细胞周期密切相关，而癌症正是由于正常细胞中某些基因突变而造成与细胞生长相关的酶和蛋白质调节失控，从而导致细胞无限增殖的一种恶性肿瘤。因此，健康人血清TK1含量极微或检测不到，但恶性肿瘤患者血清TK1水平伴随着细胞的急剧增殖而升高。近年来，血清TK1作为一种新的肿瘤标志物，在肿瘤的早期筛查、治疗监控以及预后与复发评估中显示着越来越重要的作用［1～3］。为探讨血清TK1在肺癌诊断、术后监测及预后评估中的作用，本文采用免疫印迹增强化学发光法检测了28例肺癌患者手术前、后血清TK1水平的变化情况，现分析报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源 收集2011年5月－2012年5月份在常州市第四人民医院行肺叶切除术的非小细胞肺癌患者28例（所有患者术前未经放化疗，术后1个月开始行辅助性化疗），其中男16例，女12例，年龄48～77岁，中位年龄66岁。所有患者均收集术前、术后1周、术后1个月各3份血清，共计114份血清样本，进行血清TK1含量测定。同时选取30例本院体检健康者（无心、肝、肺、肾等重要脏器疾患，无肿瘤家族史）的血清作为正常对照。上述标本收集均经医学伦理委员会同意。

1.2 血清TK－1检测 于清晨空腹采集静脉血2ml，3h内以4 000rpm／min离心8～10min分离血清，分装于2个Eppendorf管（1管用于检测、另1管用于复检）中，－80℃冰箱保存，备用。标本收集完成后进行血清TK1值测定。TK1细胞周期检测试剂盒和CIS－1型化学发光数字成像分析仪由深圳市华瑞同康生物技术有限公司提供。全过程实行严格的双盲法操作，测定步骤参照试剂盒说明书。检测结果以TK1测定值2.0pM／L为标准域值，＞2.0pM／L为异常。

1.3 血清TK1的临床评估标准 参考文献［4］，当血清TK1值达到以下标准，评估为治疗有效或部分缓解（PR）：（1）术后1个月，TK1水平下降为术前水平的50%；（2）术前及术后1个月均维持在正常水平（＜2.0pM）。稳定（SD）：治疗后 TK1水平下降不足50%。进展（PD）：血清TK1水平升高。

2 结果

2.1 肺癌组患者与正常对照组血清TK1浓度比较

28例肺癌患者中有21例（75%）血清TK1高于参考值（2.0pM），平均浓度为（2.916±0.192）pM，显著高于正常对照组（1.063±0.163）pM（P＜0.001），详见表1。

表1 肺癌组、正常对照组血清TK1浓度比较（±s）

表1 肺癌组、正常对照组血清TK1浓度比较（±s）

组别 例数 TK1浓度（pM）P值肺癌组 28 2.954±0.176 ＜1.063±0.163 0.001正常对照组 30

2.2 肺癌患者手术前、后血清TK1水平比较 肺癌患者术后1周复查血清TK1水平较术前有所上升（3.588±0.341 7）pM，但差异不显著，而术后1个月的TK1浓度较术前显著下降（1.801±0.176）pM（P＜0.001），详见图1。

图1 肺癌患者手术前、后血清TK1水平变化

2.3 血清TK1水平变化与患者预后的关系 Kaplan－Meier生存分析显示，血清TK1水平的动态变化与患者的无复发生存率显著相关，且术后TK1水平评估为PR组的患者中位无复发生存率（RFS）为16个月，而SD＋PD组为8个月，差异具有统计学意义（图2，P＜0.05）。

图2 TK1水平与肺癌患者无复发生存率（RFS）的关系

3 讨论

肺癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，28个发达国家公布的调查统计资料显示肺癌已成为恶性肿瘤中最常见的死亡原因。在我国，肺癌粗死亡率为40.98%，在城市肿瘤死因顺位中排第1位，占城市全部恶性肿瘤死亡的27.29%，并呈逐年上升的趋势［5］。目前，虽然治疗方案不断改进，但疗效仍不甚理想。合理使用肿瘤标记物在肺癌的早期诊断、早期治疗、预后和转归及治疗疗效的监测等方面具有重要的临床意义。

TK1是DNA合成的关键酶，与细胞的增殖分裂密切相关。伴随恶性肿瘤的细胞异常增殖，细胞内TK1合成显著增加，并随着肿瘤的快速生长、坏死，TK1可释放至外周血。因此肿瘤组织中或患者外周血中TK1浓度与肿瘤的生长、增殖程度密切相关［6］。本研究对28例非小细胞肺癌患者、30例健康体检者的血清测定发现，21例（75%）患者的血清TK1水平呈阳性，显著高于正常对照组（P＜0.001）。提示TK1可作为肺癌早期诊断的一项新的生物指标。有文献报道［7］，TK1水平与炎症呈正相关。本研究发现，肺癌患者术后1周复查血清TK1水平较术前有所上升，而术后1个月TK1浓度显著下降（P＜0.001），这可能由于术后1周手术并发感染未完全恢复所致，提示选择术后1个月TK1值作为复查指标更为合理。大量文献指出［8，9］，TK1水平的高低可作为预测肿瘤患者预后的一项重要指标。本研究生存分析显示，术后TK1水平与患者的无复发生存率（RFS）显著相关，且评估为PR组的患者无复发生存率明显高于SD＋PD组（P＜0.05），证实了TK1还可作为复发评估的一项新的生物指标。

综上所述，TK1作为一项新的生物学检测指标，在肿瘤的早期诊断、疗效评价以及复发评估中有着潜在的应用价值。

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