B7-H3和B7-H4在鼻咽癌组织中的表达及意义

郑大勇 董少婷 陈锦章 吕成伟 黄振华 黄 娜 何本夫 石 敏

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是我国广东省高发的恶性肿瘤，其发生有明显的地域性和家族集聚现象，是严重威胁我国人民生命健康的恶性肿瘤之一[1]。目前对于其发病原因研究显示其与环境、饮食、EB病毒密切相关，但是上述因素不能完全解释鼻咽癌发病和转移的机制，近年来一些研究发现，恶性肿瘤的发生与免疫逃避有关[2]，其中共刺激分子B7家族的下调或缺失表达是肿瘤发生的重要因素之一。为此本研究对协同共刺激分子 B7-H3和协同共刺激分子 B7-H4在鼻咽癌患者中的表达情况进行了研究，现报告如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

2012年1月-2013年10月，我院收治的并经组织病理学检查确诊的60例鼻咽癌为病例组，均未进行化疗和放疗等治疗；病例资料完整，未合并其他器官肿瘤，其中男性38例，女性22例，年龄45～63岁，平均年龄(53.2±7.5)岁，并且选择同期来我院进行手术治疗的30例为鼻咽部炎症患者的鼻咽部组织作为对照组，对照组患者男性18例，女性12例，年龄42～64岁，平均年龄(53.4±7.5)岁，两组患者年龄、性别比较无明显的统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

所有鼻咽部组织标本均采用免疫组化法测定其中B7-H3和B7-H4的表达情况，并进行相关性分析，用PBS代替一抗作为阴性对照，操作全过程由同一病理技师完成，以避免人为误差。

结果判断按照免疫组化染色阳性肿瘤细胞比例和细胞膜染色强度进行评分，其中无阳性细胞为0分，阳性细胞数<10%为1分，10%～50%为2分，>50%为3分；无着色为0分，轻度着色为1分，中度着色为2分，重度着色为3分；上述两项评分之和<3分为阴性(-)，≥3分为阳性(+)。

1.3 统计学方法

应用SPSS 17.0统计学软件进行分析，计数资料采用卡方检验，以P<0.05认为有统计学差异。

2 结果

2.1 两组B7-H3和B7-H4表达情况比较

B7-H3和B7-H4在鼻咽癌组织中的阳性率均明显高于正常鼻咽组织，差异均有显著统计学意义(P<0.01)，见表1。

表1 两组患者B7-H3和B7-H4表达情况比较(例，%)

2.2 B7-H3表达与鼻咽癌临床病理特征的关系

B7-H3表达与鼻咽癌临床分期和淋巴结转移有关，Ⅲ+Ⅳ期及有淋巴结转移患者B7-H3阳性率分别高于Ⅰ+Ⅱ期及无淋巴结转移者，差异有显著统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 B7-H3表达与鼻咽癌临床病理特征的关系/例

2.3 B7-H4表达与鼻咽癌临床病理特征的关系

B7-H4表达与鼻咽癌临床分期和淋巴结转移有关，Ⅲ+Ⅳ期及有淋巴结转移患者B7-H4阳性率分别高于Ⅰ+Ⅱ期及无淋巴结转移者，差异有显著统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 B7-H4表达与鼻咽癌临床病理特征的关系/例

3 讨论

恶性肿瘤的发生、转移、复发均与肿瘤细胞的免疫逃逸密切相关，肿瘤在其发生、发展过程中常常表达一些新的抗原，这些新的抗原应当被机体的免疫系统所识别，并发生免疫反应清除肿瘤细胞，但是事实上，几乎在所有种类的肿瘤的组织中心及其周边发现有大量免疫细胞浸润，但是免疫系统为什么未发生免疫应答杀灭肿瘤细胞，一直是临床研究的热点问题。

近年来研究显示肿瘤的免疫逃逸可能与协同刺激分子及其调节网络密切相关，协同刺激分子主要分为B7/CD28和TNF/TNFR两个超家族，其中协同刺激分子B7-H3和B7-H4与肿瘤发生密切相关，Luo等[3]对肥大细胞瘤小鼠模型的研究显示.肿瘤细胞表面B7-H3可以增强肿瘤细胞的免疫原性，将转染B7-H3的肿瘤细胞培养后注射到正常小鼠的体内，结果表明大约50%的小鼠产生了抗肿瘤效应，另一个研究显示BT-H3的表达与胃癌患者的生存率密切相关[4]。Lu等[5]对食管癌患者的研究发现B7-H4在食管癌细胞表达明显高于正常组织，并且B7-H4和CD3+和CD8+呈现明显的负相关。Quandt等[6]对黑色素瘤患者中B7-H4的表达及预后相关性进行了研究，结果显示B7-H4不但在黑色素瘤原发灶中高度表达，并且在转移灶中高度表达，并且进一步的研究显示B7-H4的表达水平与患者的生存时间程序明显的负相关。但是目前国内外关B7-H3和B7-H4的表达及其和鼻咽癌转移、预后关系的研究较少。本研究显示Ⅲ期和IV期及有淋巴结转移的患者B7-H3和B7-H4阳性率比例明显高于B7-H3和B7-H4阴性患者，这一结果说明B7-H3和B7-H4与鼻咽癌患者临床分期和淋巴结转移密切相关，免疫逃逸机制在鼻咽癌的发病和淋巴转移中具有发挥重要的临床价值。到目前为止，联合B7-H3和B7-H4 2种分子鼻咽癌癌组织中测定本研究尚属首次开展，并且研究结果显示鼻咽癌发病和转移与B7-H3和B7-H4 2种分子，但是本研究也存在局限性，本研究研究尚属组织病理学水平的一些初步探索，且仅停留于小样本水平，采用的方案为免疫组化激素，阳性结果判断标准不统一，且受到实验条件等客观因素的限制，难免会出现偏差，因此要阐明B7-H3和B7-H4在鼻咽癌癌中的具体作用机制还有待更全面、更深入的研究分析。

[1] Chee Ee Phua V,Loo WH,Yusof MM,et al.Treatment outcome for nasopharyngeal carcinoma in university malaya medical centre from 2004-2008〔J〕.Asian Pac J Cancer Prev，2013，14(8):4567-4570.

[2] Nagaraj S,Gupta K,Pisarev V,et al.Alterd recognition of antigen is a mechanism of CD8+T cell tolerance in cancer 〔J〕.Nat Med,2007,13(4)：828-835.

[3] Luo L，Qiao H，Meng F，et al.Arsenic trioxide synergizes with B7-H3 mediated immunotherapy to eradicate hepatocellular carcinomas〔J〕.Int J Cancer，2006，118(7)：1823-1830.

[4] Wu CP,Jiang JT,Tan M,et al.Relationship between costimulatory molecule B7-H3 expression and gastric carcinoma histology and prognosis〔J〕.World J Gastroenterol，2006，12(3)：457-459.

[5] Lu B,Chen L,Liu L,et.al.T-cell-mediated tumor immune surveillance and expression of B7 co-inhibitory molecules in cancers of the upper gastrointestinal tract〔J〕.Immunol Res,2011，50(2-3):269-275.

[6] Quandt D，Fiedler E，Boettcher D，et al.B7-h4 expression in human melanoma:its association with patients' survival and antitumor immune response〔J〕.Clin Cancer Res，2011，17(10):3100-3111.