核桃青皮提取物通过氧化应激作用抑制Lewis肺癌细胞生长

王 爽 于洪泉 王玮瑶 温 娜 纪鹏艳 金 宏 曹志友

(吉林医药学院医学实验中心,吉林 吉林 132013)

细胞中的主要抗氧化酶有超氧化物歧化酶( SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)和过氧化氢酶(CAT)等〔1〕，这些酶通过氧化还原反应将机体中过多的过氧化物转换为毒害较低或无毒害的物质。现代中药研究表明，很多中药成分都具有抗氧化作用，这对抗肿瘤治疗十分重要。核桃青皮是民间密方白桃汤剂中的主要成分，本实验拟研究核桃青皮提取物通过氧化应激作用抑制Lewis肺癌细胞生长的作用抗制。

1 材料与方法

1.1主要试剂 DMEM培养基(Hyclone公司)，小牛血清和0.25%胰蛋白酶(Gibco公司)，核桃青皮粉剂(吉林医药学院自制)，四甲基偶氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)和顺铂(美国Sigma公司)，GSH 、SOD 和CAT试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2Lewis肺癌细胞的培养 从液氮中取出冻存的小鼠Lewis肺癌细胞，37℃水浴振荡至融解，然后将细胞接种于75 cm2培养瓶中，加入10 ml含10%小牛血清的DMEM细胞培养液，将其置入37℃、5%CO2饱和湿度培养箱中培养，隔日换液。

1.3氧化应激指标检测 将生长状态良好的Lewis肺癌细胞以1×104/孔密度接种于24孔板中，培养过夜后加入不同浓度的核桃青皮提取物，空白对照组只加5%基础培养基，培养48 h后离心取上清用于实验。按各试剂盒说明分别进行测定，根据说明所给公式分别计算GSH 的含量、SOD 和CAT 的活力。

2 结 果

SHG-44细胞在核桃青皮提取物作用48 h后，各给药组细胞培养上清中GSH 含量明显升高；SOD和CAT的活力也明显升高；与空白对照组比较，2、4 μg/L核桃青皮提取物组差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。见表1。

表1 核桃青皮提取物对小鼠Lewis肺癌细胞GSH含量、SOD和CAT活力的影响

3 讨 论

核桃青皮含有多种化学成分，具有多种药理学作用。研究表明，核桃属植物含有萘醌类、黄酮类、二芳基庚烷类、萜类、有机酸类等化合物，这些化合物或多或少都具有一些抗氧化作用〔2〕。核桃青皮乙醇提取物及乙酸乙酯提取物对菜籽油都有一定的抗氧化作用，其抗氧化效果随剂量的增加而增强；并且乙醇提取物与维生素C、维生素E和柠檬酸都有较明显的协同作用，抗氧化效果均好于单独使用〔3〕。

民间秘方白桃汤剂具有一定的抗肿瘤作用，研究表明，白桃汤剂通过上调动物体内肿瘤坏死因子(TNF)-α水平和降低白细胞介素(IL)-6水平，同时提高动物的免疫功能而达到对Lewis肺癌小鼠的明显抑瘤作用；也可以通过抑制小鼠Lewis肺癌的血管生成、生长和转移来发挥其抗肿瘤作用〔4，5〕。在白桃汤剂方中，核桃青皮是主药之一，在体外研究中，青核桃中的多种物质对肿瘤细胞有诱导凋亡或直接杀死作用，其作用呈时间和剂量效应〔6〕。体内研究表明，核桃青皮水提浸膏对小鼠肉瘤180和小鼠实体型肝癌有明显的抑制作用，抑制作用亦呈剂量依赖关系〔7〕，也可降低小鼠体内脂质过氧化程度〔8〕。

在此前的实验中发现，核桃青皮提取物在体内外均可抑制肿瘤的生长〔9〕，结合本文结果认为，这可能是药物通过增加GSH 含量、SOD和CAT的活力，发挥抗氧化作用使肿瘤的生长受到抑制。

4 参考文献

1姜宜成，沈成兴.抗氧化酶基因转染治疗心血管疾病的研究进展〔J〕．中国心血管杂志，2012;17(1)：70-2.

2姚焕英，唐静成，张鞍灵，等.核桃属植物化学成分及生物活性研究〔J〕.西北植物学报，2003;23(9)：1650-5.

3刘 艳，方 晨，曹 凯，等.新疆核桃青皮提取物抗氧化作用研究〔J〕.食品工业，2012;33(9)：114-6.

4曹志友，王 爽，欧阳瑾，等.白桃汤剂治疗Lewis肺癌小鼠的实验研究〔J〕.时珍国医国药，2009;20(4)：914-5.

5欧阳瑾，曹志友，王 爽，等.白桃汤剂抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤的生长及其血管生成的实验研究〔J〕.时珍国医国药，2009;20(10)：2476-7.

6刘瑞梅.青核桃及刺五加抗癌作用的药理研究〔J〕.中草药，1980;11(7)：213-4.

7王绍林，王绍东，刘今方.核桃楸青果皮的生药鉴别和抗肿瘤作用研究〔J〕.药学实践杂志，1995;13(1)：40-2.

8兰 英，赵 锐.核桃楸青果皮水提物对降低小鼠体内丙二醛质量浓度的研究〔J〕.北华大学学报，2000;6(1)：476-7.

9欧阳瑾，曹志友，王 爽，等.核桃青皮提取物抑制小鼠Lewis肺癌生长的实验研究〔J〕.时珍国医国药，2009;20(11)：2749-50.