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1.中国人民武装警察部队药品仪器检验所,北京 102613; 2.中国中医科学院广安门医院,北京 100053
HPLC法测定甘麦宁心胶囊中梓醇的含量
葛海生1姚红伟1*王晓飞1于玲1柴江平2
1.中国人民武装警察部队药品仪器检验所,北京 102613; 2.中国中医科学院广安门医院,北京 100053
目的建立测定甘麦宁心胶囊中梓醇的含量测定方法。方法采用Aglilent 1200 SHISEIDO C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈:0.1%磷酸水溶液(1:99),检测波长为210nm,流速为1.0ml/min,柱温为30℃。结果梓醇在0.02~0.6μg/μl范围内线性关系良好,平均回收率为99.43%(RSD=1.21%)。结论本法简便,精密度高,重复性好,选择性佳,可用于甘麦宁心胶囊的质量控制。
高效液相色谱法;甘麦宁心胶囊;梓醇;含量测定
甘麦宁心胶囊是由麦冬、桂枝、人参等多味中药制成的胶囊;具有补脾和胃,益气复脉之功效,临床用于脾胃虚弱,倦怠乏力,心动悸脉结代。本实验拟建立测定甘麦宁心胶囊中梓醇含量的方法,用于甘麦宁心胶囊的质量控制。
1.1 仪器 Aglilent 1200高效液相色谱仪;XP205电子分析天平(梅特勒托利多); 超声清洗仪(昆山市超声仪器有限公司)。
1.2 试药 梓醇对照品(批号:110808-201210,中国食品药品检定研究院);乙腈为色谱纯,水为双蒸水,其它试剂为分析纯。甘麦宁心胶囊(自制,批号:20140426、20140428、20140430);阴性对照根据处方及制法自制。
2.1 色谱条件 色谱柱SHISEIDO C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液(1∶99);检测波长:210nm;流速:1.0 ml/min;柱温:30℃;进样量10μl。
2.2 对照品溶液的制备 精密称定梓醇对照品5mg,置于50ml容量瓶中,加流动相溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml至10ml容量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得。
2.3 供试品溶液的制备 精密称取2.0g,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20ml,称定重量,超声处理30min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续虑液2ml,浓缩至近干,残渣用流动相溶解,转移至10ml量瓶中,并用流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm滤膜滤过,即得。
2.4 空白试验 按处方中的比例,自制不含地黄的阴性对照品,按其工艺制成空白制剂,再按供试品溶液的制备方法制备并测定,结果表明空白对照溶液在梓醇出峰处无干扰,方法的选择性符合要求(见图1)。
2.5 线性关系的考察 取梓醇对照品溶液,分别进样1、5、10、15、20、25、30μl。将峰面积(Y)对质量浓度(X)进行线性回归,得到回归方程为Y=5.0924X-0.3141(r=1)。表明梓醇在0.02~0.6μg范围内线性关系良好。
2.6 精密度试验 取梓醇对照品溶液,每次进样10μl,重复进样7次,测定梓醇峰面积,结果梓醇的RSD为0.71%(见表1)。
2.7 重复性试验 取同一批号供试品,按“2.3供试品溶液的制备”项下方法平行制备6分样品后进样,梓醇RSD为1.01%。结果表明重复性良好(见表2)。
表1 精密度试验结果
2.8 稳定性试验 取同一批供试品溶液,每隔2h进样一次,共进样8次,结果表明供试品溶液在16h稳定,梓醇的RSD为1.48%(见表3)。
表2 重复性试验结果
2.9 加样回收率试验 取已知含量的供试品6份(批号:20140428;含量:1.16mg/g),精密称定,分别精密加入已知含量的梓醇对照品溶液(1.868mg/ml),按“2.3供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液,再精密量取制备的供试品溶液5ml,置10ml容量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,用0.45μm滤膜滤过,按“2.1色谱条件”测定梓醇的含量,计算回收率(见表4)。
2.10 含量测定 取3批甘麦宁心胶囊,按上述色谱条件及供试品溶液制备方法进行含量测定,结果见(见表5)。
表3 稳定性试验结果
表4 加样回收试验结果
表5 含量测定试验结果
药典及一些文献中梓醇的提取采取加热回流的方法[1、2],本实验曾采用加热回流方法提取,但分离效果较差,干扰较多,出现肩峰。考虑到梓醇的热稳定性不佳,故采用超声方法处理[3、4],试验结果表明该方法简单快速,峰型对称,分离效果好,阴性对照无干扰,可作为该制剂的含量测定方法。
梓醇是甘麦宁心胶囊中的主要活性成分,方法学考察结果表明,所采用的HPLC方法精密度高,重复性好,稳定性佳,可用于甘麦宁心胶囊的质量控制。
[1]国家药典委员会.中国人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2010:115.
[2]杨仕林,李小刚,谢云.RP-HPLC法测定天王补心丸中梓醇的含量[J].中国药方,2012,23(24):2289-2290.
[3]封宣伊,姜宇,左亚杰.高效液相色谱法测定一贯煎颗粒中梓醇的含量[J].湖南中医杂志,2013,29(2):132-133.
[4]白梓静,齐广才,刘珍叶,等.HPLC测定咽扁宁冲剂中梓醇和肉桂酸含量[J].中国实验方剂学杂质,2011,17(23):71-73.
DeterminationofCatalpolinGanMainingxinCapsulebyHPLC
GE Hai-sheng1,YAO Hong-wei1*,WANG Xiao-fei1,YU Ling1,CHAI Jiang-ping2
1.Institute for Drug Control of People's Armed Police Forces,Beijing 102613,China;2.Guang’anmen Hospital,China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100053,China
ObjectiveTo establish the method for determination of Catalpol in GanMaining capsule.MethodCatalpol were determined by HPLC on C18-Column at 210 nm,with acetonitrile-0.1% phosphoric acid solution(1∶99)as mobile phase, the flow rate were 1.0 ml/min.ResultThe linear range of Catalpol was 0.02~0.6μg/μl.The average recovery was 99.43%,RSD was 1.21%.ConclusionThe method is simple,accurate and repeatable, which can be used for determination of Catalpol in GanMaining capsule.
HPLC;GanMaining capsule;Catalpol;Content determination
葛海生,副主任药师,主要从事中药制剂研究。
姚红伟,主管药师,主要从事药物分析研究。E-mail:yaohw919@163.com
R284.2
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1007-8517(2014)20-0010-02
2014.08.06)