双歧三联活菌胶囊对溃疡性结肠炎患者CD4+CD24+调节T细胞及IL-10水平的影响研究

姜利佳++蒋益

[摘要] 目的 研究双歧三联活菌胶囊对溃疡性结肠炎患者CD4+、CD24+调节T细胞及IL-10水平的影响。 方法 选取134例溃疡性结肠炎患者作为临床研究资料，按照随机对照原则将入组患者分为观察组和对照组，各67例，对照组患者采用常规基础治疗，观察组在对照组治疗基础上采用双歧三联活菌胶囊治疗。比较两组患者的疗效及血清CD4+、CD24+调节T细胞及IL-10水平。结果 观察组患者的临床症状评分下降百分比显著高于对照组，两组患者治疗后的结肠炎症评分均显著低于治疗前，而组间比较显示观察组患者治疗后的结肠炎症评分均显著低于对照组。两组患者治疗后的血清CD4+、CD24+调节T细胞占CD4+T细胞的百分比及IL-10水平均较治疗前显著升高，组间比较发现观察组患者治疗后的血清CD4+、CD24+调节T细胞占CD4+T细胞的百分比及IL-10水平均显著高于对照组。结论 双歧三联活菌胶囊辅助治疗溃疡性结肠炎患者可以通过调节CD4+、CD24+调节T细胞及IL-10水平。

[关键词] 双歧三联活菌胶囊；溃疡性结肠炎；CD4+、CD24+调节T细胞；白介素-10

[中图分类号] R574.62[文献标识码] B[文章编号] 1673-9701（2014）18-0039-03

The study of bifidobacteria triple capsule on the levels of CD4 +, CD24 + regulatory T cells and IL-10 for patients with ulcerative colitis

JIANG Lijia1 JIANG Yi2

1.Department of Gastroenterology, Wenzhou Central Hospital in Zhejiang Province, Wenzhou 325000, China; 2.Department of Gastroenterology, the Second Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000, China

[Abstract] Objective To observe bifidobacteria triple capsule on the levels of CD4+, CD24+ regulatory T cells and IL-10 for patients with ulcerative colitis. Methods Selected 134 cases of patients with ulcerative colitis clinical research data beds, in accordance with the principles of the randomized patients were divided into observation group and control group, with 67 cases in each. Control patients received conventional basic therapy, observation group received probiotics in capsule treatment on the basis of the control group. The efficacy of the two groups of patients and levels of serum CD4+, CD24+ T cells and IL-10 were compared. Results The patients in clinical symptom scores decreased significantly higher percentage, two groups of patients after treatment colitis disease scores were significantly lower than before treatment, and display observed between the two groups of patients after treatment colitis disease scores were significantly lower than the control group. Two groups of patients after treatment serum CD4 +, CD24 + regulatory T cells was significantly higher in CD4+T cells and the percentage of IL-10 levels than before treatment. Conclusion Probiotics capsules adjuvant treatment of ulcerative colitis patients can be adjusted by CD4 +, CD24 + regulatory T cells and IL-10 levels.

[Key words] Probiotics capsules; Ulcerative colitis; CD4+, CD24+ regulatory T cells; Interleukin-10

双歧三联活菌胶囊属微生态制剂，在溃疡性结肠炎患者的治疗中具有重要地位，且经过长期的临床应用，其疗效受到了广泛认可[1]。而对双歧三联活菌胶囊治疗溃疡性结肠炎的机制研究开始成为热点，明确机制可以更好地把握适应证，应用针对性更强，可在一定程度上提高疗效，溃疡性结肠炎患者的免疫系统病因已经达成共识[2]，双歧三联活菌胶囊是否可以通过改善肠道菌群微生态状态而调节溃疡性结肠炎患者的免疫功能，从而起到促进治疗的效果值得研究，本研究通过评估临床症状评分、结肠炎症评分，并检测患者血清CD4+、CD24+调节T细胞及IL-10水平研究双歧三联活菌胶囊对溃疡性结肠炎患者免疫和炎症反应的影响，现报道如下。

1资料与方法

1.1 临床资料

本研究选取2010年2月～2013年1月间本院收治的134例溃疡性结肠炎患者作为研究资料，所有患者均经辅助检查并结合病史确诊为溃疡性结肠炎，其中男73例，女61例，年龄23～63岁，平均（45.61±5.82）岁，其中轻度69例，中度65例，病程0.5～4年，平均（1.41±0.33）年。本组患者入组前均未接受可能影响本研究观察指标的治疗和药物，所有患者均无重要脏器功能损害及血液系统、免疫系统疾病。按照随机对照原则将所有患者分为两组各67例，两组患者在年龄、性别、病变程度以及病程方面无显著差异，具有可比性。见表1。

表1 两组患者一般资料比较

1.2 治疗方法

观察组患者采用抗生素+5-氨基水杨酸制剂奥沙拉嗪钠胶囊（浙江众益药业有限公司，国药准字H20010061）的常规治疗方案，对照组患者在观察组常规治疗方案的基础上加用双歧三联活菌胶囊（上海信谊药厂有限公司，国药准字S10950032）0.21 g 口服，2次/d，两组患者均接受6个月的完整规律治疗。

1.3 观察指标

1.3.1 临床症状评分两组患者均于治疗前及治疗后6个月时进行临床症状评分，具体评估标准[3]为：每天大便1～2次记0分，3次记1分，4～5次记2分，6次及以上记3分；大便成形记0分，软便记1分，稀糊状便记2分，稀水样便记3分，无血便记0分，便中带血丝记1分，便中带血块记2分，便血记3分；无腹痛记0分，轻度腹痛记1分，中度腹痛记2分，重度腹痛记3分；无里急后重记0分，有里急后重记1分；无腹胀记0分，有腹胀记1分。

1.3.2 结肠炎症评分[4]所有患者均在治疗前及治疗6个月后接受肠镜检查，术中于病变最活跃处取活检6块，取3个高倍视野的观察指标平均值为最终结果，按照以下分级进行评分，正常评0分，轻微黏膜及上皮下炎性渗出、水肿，片状黏膜糜烂及毛细血管扩装，黏膜肌层正常记1分，标本的50%以上具有1分评级特征者评为2分，以中性粒细胞渗出为主伴溃疡深达黏膜肌层或黏膜下层评为3分，标本的50%以上具有3分评级特征者评为4分。临床症状评分下降百分比=（治疗前评分-治疗后评分）/治疗前评分×100%。

1.3.3 血清CD4+、CD24+调节T细胞及IL-10水平所有患者均于治疗前及治疗6个月后接受CD4+、CD24+调节T细胞及IL-10水平测定，采用流式细胞仪测定CD4+、CD24+调节T细胞水平，采用ELISA法测定IL-10水平，所有操作均严格按照规范进行。

1.4统计学方法

采用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析，临床症状评分下降百分比、结肠炎症评分、血清CD4+、CD24+调节T细胞及IL-10水平用（x±s）表示，采用t检验， P<0.05表示差异具有统计学意义。

2结果

2.1 临床症状评分及结肠炎症评分

本研究结果显示，观察组患者的临床症状评分下降百分比显著高于对照组（P=0.000），两组患者治疗后的结肠炎症评分均显著低于治疗前（t=36.6060，P=0.000；t=7.0189，P=0.000），而组间比较显示观察组患者治疗后的结肠炎症评分均显著低于对照组（P=0.000），见表2。

表2 临床症状评分及结肠炎症评分（x±s）

注：与治疗前相比，*P<0.05；与对照组相比，#P<0.05

2.2血清CD4+、CD24+调节T细胞占CD4+T细胞的百分比及IL-10水平

本研究结果显示，两组患者治疗后的血清CD4+、CD24+调节T细胞占CD4+T细胞的百分比及IL-10水平均较治疗前显著升高（t=23.7768、8.4307，P=0.000、0.000；t=10.2217，2.0285，P=0.000，0.031），组间比较发现观察组患者治疗后的血清CD4+、CD24+调节T细胞占CD4+T细胞的百分比及IL-10水平均显著高于对照组（P=0.000、0.000），见表3。

表3 血清CD4+、CD24+调节T细胞及IL-10水平

注：与治疗前相比，*P<0.05；与对照组相比，#P<0.05

3 讨论

溃疡性结肠炎患者的发病机制尚未完全明确，但肠道菌群功能以及免疫功能失调均与溃疡性结肠炎的发生和发展存在密切的联系[4]，微生态制剂在调节肠道正常菌群功能方面的作用已经被验证[6]，双歧三联活菌胶囊主要包括长型双歧杆菌、保加利亚乳杆菌以及嗜热链球菌3种细菌，此三种细菌均是肠道重要的益生菌，在维持肠道微生态平衡、防御致病菌和病毒入侵、促进肠道正常菌群生长繁殖方面作用显著[7]。既往溃疡性结肠炎以抗生素抗感染，5-氨基水杨酸制剂等对症治疗为主[8]，但疗效差强人意，已有研究[9]证实应用微生态制剂联合治疗溃疡性结肠炎疗效显著，但对于其起效机制的研究尚不多见。

患者机体免疫功能失调是溃疡性结肠炎发病的重要因素，且与其病情发展密切相关[10]，而微生态制剂在调节肠道正常菌群功能的同时，对于患者的免疫功能是否也能起到有效的调节作用值得研究。调节性T细胞在调节功能性T细胞亚群功能方面具有重要作用，在多种免疫系统相关疾病的发生发展中均具有重要意义。有研究提出CD4+、CD24+调节T细胞具有免疫无能性与抑制性两大功能特征，主要通过抑制自身反应性T细胞的免疫反应，从而减少TGF-β、IL-10等细胞因子的分泌，在自身免疫性疾病中具有重要意义[11]。CD4+、CD24+调节T细胞的产生可能与肠道菌群存在一定的关系，有研究[12]认为肠道长期暴露在正常菌群的外源性抗原中，可以在一定程度上诱导CD4+、CD24+调节T细胞的产生，也有研究[13]认为肠道菌群可以抑制非成熟树突状细胞的成熟，侧面促进CD4+、CD24+调节T细胞的发育和增殖，以维持正常菌群的免疫功能，因此推测微生态制剂调节肠道正常菌群功能可能通过以上机制改善患者的免疫功能从而达到辅助治疗溃疡性结肠炎患者的作用。IL-10是重要的炎症因子，主要由Th2细胞、单核巨噬细胞以及活化的B细胞产生，其可以通过抑制单核细胞的活性，抑制肠道炎症反应[14]。双歧三联活菌胶囊所含益生菌在肠道增殖后的代谢产物也是调节肠道内环境的重要物质，可以在一定程度上调节肠道黏膜的免疫功能，促进IL-10的表达水平，这也是双歧三联活菌胶囊辅助治疗溃疡性结肠炎的可能机制。

本研究结果显示采用双歧三联活菌胶囊辅助治疗的溃疡性结肠炎患者，治疗6个月后临床症状评分下降百分比以及显著高于对照组，结肠炎症评分显著低于对照组。外周血CD4+、CD24+调节T细胞占CD4+T细胞的百分比及IL-10水平均显著高于对照组。由此总结，CD4+、CD24+调节T细胞和IL-10在溃疡性结肠炎患者的发病和发展中存在重要作用和意义，双歧三联活菌胶囊辅助治疗的溃疡性结肠炎患者可以调节肠道菌群功能，提高CD4+、CD24+调节T细胞和IL-10水平的表达，提高疗效。

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（收稿日期：2014-01-21）

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（收稿日期：2014-01-21）