穴位注射不同药物对慢性心力衰竭的效应对比研究

赵兴梅，陈华德

（浙江中医药大学，浙江杭州310053）

慢性心力衰竭（CHF）是一种复杂的进展性临床综合症，也是多种疾病的最终归宿。随着人口老龄化进程的加快及高血压、冠心病等心血管病发病率的上升，CHF的发病率及死亡率逐年增高，已经对医学界乃至全社会形成了巨大挑战。目前，治疗CHF主要以减慢心率、强心、利尿、扩血管等手段为主，并取得一定疗效，但也仅能延缓病情的进展，在逆转心肌重构，恢复心脏功能方面仍举步维艰。穴位注射疗法产生于20世纪五六十年代，是根据传统的中医药理论，结合现代医学的注射技术，按照穴位主治功能和药物的药理作用，采用小剂量中西药注入人体的经络穴位以治疗各种疑难病症的一种方法［1］。此种注射疗法简便易行，起效快、效果好，且所需药物的剂量也小，因而很快在全国范围内推广使用［2］。本实验旨在探讨穴位注射对CHF的效应及疗效与所用药物之间的关系，为CHF的治疗提供更好的方法指导和实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 Wistar大鼠45只，雄性，体重为（200±20）g，6 w 龄，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，生产许可证号：SCXK（沪）：2008-0016。

1.1.2 药物与仪器 普萘洛尔（心得安，江苏常州康普药业有限公司生产，批号：1202004）、丹参注射液（正大青春宝药业有限公司生产，批号：1108091）、肌苷注射液（山东方明药业集团股份有限公司生产，批号：1107285）、蒸馏水（浙江中医药大学第三临床医学院实验室提供）。1 mL注射器（4.5号针头），购自浙江中医药大学附属第三医院。

1.2 实验方法

1.2.1 造模与给药 实验前先进行动物游泳适应能力的筛选：雄性Wistar大鼠45只，每天在游泳缸里强迫负重游泳2次，每次游至力竭（翻正反射消失）。连续3 d后淘汰无法适应游泳的大鼠（淘汰率约3%），随机选出8只大鼠作为正常对照组。其余大鼠继续造模，实验20 d后，从剩余大鼠中随机选出32只，第21天起每日灌服普萘洛尔溶液2.4 mg/100 g体重，连续4 d。造模成功后，随机分为丹参组、肌苷组、蒸馏水组、模型对照组4组，每组8只。造模成功后各组分别给予如下处理：①丹参组、肌苷组、蒸馏水组：选穴：双侧穴位足三里（穴位定位参考《实验针灸学》［3］），手法：补法，即顺着经络循行的方向缓慢注射相应药物1 min后迅速拔针。药物：分别为丹参注射液、肌苷注射液、蒸馏水。给药剂量：每穴0.20 mL（通过人与动物的用药剂量换算公式算出）。②模型对照组：造模后不做任何处理。③正常对照组：常规饲料饲养，自由饮水，不予任何处理。各组按上述处理方案进行，1次/d，连续治疗1个疗程（10 d）后，抽血及切取大鼠心肌细胞。

1.2.2 指标检测 通过酶动力学比色法检测不同药物组血清乳酸脱氢酶（LDH）含量，采用酶动力学法检测血清肌酸激酶（CK）含量，通过透射电子显微镜检测不同药物组的心肌细胞超微结构。

1.3 统计学方法

采用SPSS17.0统计软件包对相关数据进行处理。所有数据以均数±标准差（±s）表示，各组组间差异采用单因素方差分析（One-Way ANOVA）。

2 结果

2.1 各组大鼠血清LDH和CK的浓度比较

模型对照组血清LDH和CK浓度与正常对照组比较明显升高（P<0.001），说明造模成功。丹参组、肌苷组血清LDH和CK浓度与模型对照组相比均明显降低（P<0.01，P<0.001），蒸馏水组血清LDH浓度与模型对照组相比显著降低（P<0.05），血清CK浓度虽然降低，但差异无统计学意义（P>0.05）。肌苷组血清CK浓度与丹参组相比明显降低（P<0.01）。说明通过穴位注射不同药物可不同程度地降低血清LDH和CK浓度，其中肌苷注射液作用最强。结果见表1。

表1 治疗后各组大鼠血清LDH和CK浓度对比 （±s）

表1 治疗后各组大鼠血清LDH和CK浓度对比 （±s）

注：与正常对照组比较，1）P<0.001；与模型对照组比较，2）P<0.05，3）P<0.01，4）P<0.001；与丹参组比较，5）P<0.01

组别 n LDH浓度（U/L）CK浓度（U/L）丹参组 81852.143±302.423）753.571±69.9783）肌苷组 81594.857±316.4854）688.571±82.4784）5）蒸馏水组 81947.429±325.5152）879.714±72.394模型对照组 82344.143±301.3271）909.000±106.1671）正常对照组 81306.571±354.550602.143±92.526

2.2 各组大鼠心肌细胞超微结构比较

正常对照组肌丝排列整齐有序，线粒体膜清晰完整。模型对照组肌丝排列紊乱、断裂、溶解，线粒体嵴模糊，线粒体部分溶解，少量线粒体空泡化。肌苷组肌丝排列轻度紊乱，少量线粒体空泡化。丹参组肌丝排列紊乱，线粒体结构紊乱，少量线粒体空泡化。蒸馏水组肌丝断裂，线粒体嵴模糊，线粒体部分溶解，少量线粒体空泡化。结果见图1。

3 讨 论

心力衰竭是由于心脏负荷过重、血栓形成或炎症等原因引起的心肌损伤，造成心肌结构和功能的变化，最后导致心室泵血或充盈功能低下。临床主要表现为呼吸困难、乏力和体液潴留。CHF是指持续存在的心力衰竭状态，一旦恶化或失代偿，严重威胁生命。通过本实验研究，我们发现穴位注射对CHF疗效显著，且疗效与所用药物密切相关，而不只是由单纯的穴位刺激决定。

LDH和CK是参与心肌细胞能量代谢的重要酶类，主要分布于心肌细胞内，正常情况下，不易通过细胞膜。当心肌受损、缺血缺氧、代谢异常时，血清LDH和CK的浓度才会升高，而且浓度的高低与损伤的程度密切相关。心肌细胞超微结构的损伤是心功能不全的结构基础；保护心肌细胞超微结构方可防止和逆转心肌重塑，恢复心功能。

图1 各组大鼠心肌细胞超微结构

本实验结果显示，和正常对照组相比，模型对照组血清LDH和CK浓度均升高（P<0.001）；心肌细胞超微结构示，模型对照组肌丝排列紊乱、断裂、溶解，线粒体嵴模糊，线粒体部分溶解，少量线粒体空泡化，说明造模成功。和模型对照组相比，各治疗组大鼠血清CK和LDH浓度明显降低，心肌细胞超微结构损伤明显减轻，其中蒸馏水组改变最小，肌苷组最接近正常。说明足三里穴位注射丹参注射液、肌苷注射液、蒸馏水都能改善心肌代谢，防止心肌重构。丹参注射液的作用可能与丹参具有强心、扩张冠脉、抗血栓形成、抑制纤维母细胞增生等作用有关［4］。肌苷注射液的作用可能与肌苷能直接通过细胞膜进入心肌细胞活化丙酮酸氧化酶类，从而使处于低能缺氧状态下的心肌细胞能继续顺利进行代谢，并参与能量代谢和蛋白质的合成有关［5］。蒸馏水的作用可能与它的体积和重量对穴位产生的机械刺激有关。

综上所述，穴位注射可从改善心肌代谢，保护心肌细胞超微结构，预防心肌重构等不同层面对CHF起到治疗作用。同时穴位注射对CHF的效应与所用药物直接相关，其效应是穴位刺激和药物作用有机结合的结果。中药丹参注射液和西药肌苷注射液均有效，且二者的疗效明显强于蒸馏水，其中肌苷注射液比丹参注射液更擅长于改善心肌代谢，保护心肌细胞。本研究提示若中西药联用，可能疗效更佳。

［1］林静瑜，许云禄，倪峰.穴位注射作用机制研究进展［J］.辽宁中医药大学学报，2007，9（6）：189.

［2］李镤.穴位注射疗法临床大全［M］.北京：中国中医药出版社，1996：68.

［3］李忠仁.实验针灸学［M］.北京：中国中医药出版社，2007：327-328.

［4］王本祥.现代中药药理与临床［M］.天津：天津科技翻译出版公司，2004：1367-1369.

［5］龙琨.临床药物汇编［M］.北京：金盾出版社，1992：651-652.