UF-1000i全自动尿细胞分析仪在尿路感染早期筛查的应用价值

毛颖华

·论著·

UF-1000i全自动尿细胞分析仪在尿路感染早期筛查的应用价值

毛颖华

目的探讨Sysmex UF-1000i全自动尿细胞分析仪(简称UF-1000i)在尿路感染(UTI)早期诊断的临床应用价值。方法按照中段尿采集指南操作(按细菌培养要求)收集标本,同时分别做尿细菌培养和UF-1000i细菌数量检测,比较两者结果。结果UF-1000i分析仪测定白细胞、细菌的批内精密度CV为9.1%、9.2%，符合仪器标准。测定细菌的稀释线性范围为23 128个/μl，α=1.0002，r=1.0000，测定白细胞的稀释线性范围为7 690个/μl，α=1.0003，r=1.0000。在74例待测标本中，UF-1000i分析仪分析25例标本提示UTI信息，细菌培养有13例标本培养结果为阳性。其假阳性率21.4%，假阴性率27%，敏感性72.2%，特异性78.5%，阳性预示值52%,阴性预示值89.7%,准确度77.0%。结论UF-1000i仪器检测无菌留尿标本检测尿沉渣中细菌计数结果大部分与培养结果一致,所提示的UTI信息可以作为早期细菌感染的参考指标，起到早发现早诊断的作用。

全自动尿细胞分析仪；细菌培养；尿路感染

尿路感染(urinary tract infection,UTI) 是泌尿系统的常见疾病之一,发病率仅次于上呼吸道感染[1]。尿路感染需要依靠对尿中细菌和白细胞的确认来实现，尿细菌培养是诊断尿路感染的金标准,它能确认尿路病原体的种类。然而,这个方法也有一些问题，比如从尿液的采集、接种、培养到出报告需要1周左右,标本的污染和不恰当的存放导致假阳性结果，不但耗时且费用相对较高，造成人力和医疗资源的大量浪费。目前临床急需一种可靠的筛检方法，筛去大多数细菌培养结果预计为阴性的标本，将结果可能为阳性的标本进一步做定量细菌培。UF-1000i的原理是用红色半导体激光束照射经过核酸荧光染色后在鞘流贯流分析池中形成的鞘流样本，并通过对从各粒子产生的前方散射光、侧向散射光以及侧向萤光信号转换成的光电信号进行分析，从而对各个粒子进行识别。定量检测参数(12项)、五项有机成份结果，如RBC(红细胞)、WBC(白细胞)、EC(上皮细胞)、CAST(管型)和BACT(细菌)，并可定量显示。测定结果按仪器说明及相关资料以细菌≥100/μl和白细胞≥10/μl为阳性，显示UTI信息，报告提示尿路感染可能，以此作为诊断帮助信息。本文通过日本Sysmex公司生产的UF-1000i全自动尿有形成分分析仪对尿中细菌和白细胞的检测，对74份疑似尿路感染标本进行尿液分析仪检测和定量细菌培养，和仪器性能分析并将结果进行比较，探讨Sysmex UF-1000i全自动尿细胞分析仪为尿路感染诊断的应用价值，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2011至2012年我院就诊患者的清洁中段尿标本74例。

1.2 仪器 (1)Sysmex公司的UF-1000i全自动尿有形成分分析仪。(2)法国生物梅里埃公司VITEK2 compact 全自动微生物分析系统。

1.3 试剂 (1)Sysmex公司提供的UF-1000i全自动尿有形成分分析仪原厂配套进口试剂。UF Ⅱ sheath(鞘液)；UF Ⅱ pack-SED，BAC(沉渣用，细菌用稀释液)；UF Ⅱ search-SED，BAC(沉渣用，细菌用染色液)。 储存条件：储藏温度为2～35℃，须存储于干净闭光环境中,请勿冰冻。使用期限:在有效期内使用，开封后有效期为60 d。注意事项:在15～30℃下使用，打开后避免污染及灰尘和细菌进入；浑浊或变色后不能使用。 (2)法国生物梅里埃公司提供的革兰阴性杆菌鉴定卡GN；革兰阳性菌鉴定卡GP；革兰阴性杆菌药敏卡AST-GN13；革兰阳性球菌药敏卡AST-GP61。

1.4 质控物 (1)Sysmex公司提供的质控品:UFII CONTROL-H和 UFⅡ CONTROL-L。(2)标准菌株：金黄色葡萄球菌(ATCC25923)，粪肠球菌(ATCC29212)，大肠埃希菌(ATCC25922)，铜绿假单胞菌(ATCC27853)。

1.5 材料 一次性尿杯、试管、乳胶手套、试管架。

1.6 方法

1.6.1 标本留取：按照中段尿采集指南操作[2]，取可疑患者清洁中段尿10 ml置带盖的无菌试管中(不用防腐剂),立即送检(在收集尿液后1 h内送至实验室检查，超过2 h者应重新送检)。如果不能及时检测，应将标本置于4～8℃冰箱内保存，并于6 h内检测完毕[3]。

1.6.2 尿液细菌定量培养方法：用1μl定量接种环取混匀尿液1环分别划线接种于血培养基和麦糠凯培养基上，至(35±1)℃培养箱内孵育18～24 h，取出做菌落计数，细菌生长且菌落计数革兰阳性球菌≥104cfu/ml或革兰阴性杆菌≥105cfu/ml时为细菌培养阳性(当有两种致病菌生长时,选计数接近或≥104的细菌为阳性统计菌,若有两种以上杂菌生长则视为污染,重新送检)[4]，并对阳性标本进一步鉴定到种。

1.6.3 UF-1000i的检测：开机后，仪器工作前需进行每日质控,质控通过后方可进行标本检测。将每日收集的标本充分混匀,由仪器自动进样，每个标本吸取1 200 μl尿液进行分析，记录分析数据。以细菌≥100/μl和白细胞≥10/μl为阳性，显示UTI信息，报告提示尿路感染可能。测得的结果与尿细菌定量培养的结果进行比较。

1.6.5 尿液分析仪测定白细胞、细菌的稀释线性评价：取富含细胞的尿样以正常尿液样本上清液作1∶1，1∶10，1∶100，1∶1 000，1∶10 000的系列稀释，以稀释计算值作为理论值，各稀释尿样的实测值与理论值进行回归统计。

1.7 统计学分析 用Yerushalmy模式评价尿液分析仪对尿路感染筛检的敏感性、特异性、阳性/阴性预期值、假阳性/假阴性率和准确度。

2 结果

2.1 仪器性能评价 尿液分析仪测定白细胞、细菌的批内精密度CV分别为9.1%、9.2%。见表1。

表1 UF-1000i分析白细胞、细菌的批内精密度

2.2 尿液分析仪测定细菌、白细胞的线性分析 细菌线性范围23 128个/μl，α=1.0002，r=1.0000；白细胞线性范围7 690个/μl,α=1.003，r=1.0000。见表2、3，图1、2。

表2 UF-1000i分析细菌稀释线性

注：细菌线性范围23 128个/μl,α=1.0002,r=1.0000

表3 UF-1000i分析白细胞稀释线性

注：白细胞线性范围7690个/μl,a=1.0003,r=1.0000

图1 UF-1000i分析白细胞稀释线性图 图2 UF-1000i分析细菌稀释线性图

2.3 UF-1000i分析结果与细菌培养比较 UF-1000i测定结果按仪器说明及相关资料以细菌≥100/μl和白细胞≥10 /μl为阳性，显示UTI信息，报告提示尿路感染可能。假阳性率21.4%，假阴性率27%，敏感性72.2%，特异性78.5%，阳性预示值52%,阴性预示值89.7%,准确度77.0%。见表4。

表4 UF-1000i分析结果与细菌培养比较 例

3 讨论

UF-1000i全自动尿细胞分析仪是UF系列的最新产品，使用流式细胞计数法(FCM)技术来获得尿细胞前向散射光及前向荧光的强度参数。在对细胞中的特定物质进行荧光染色并调节到悬浮状后，使用鞘液包围此物质然后通过喷嘴以单柱形式喷出。此时每个尿细胞都将暴露在高度密集的激光束照射之下。单个细胞会按不同角度发出荧光和散射光。系统将对这些电信号进行分析，为各尿细胞按照荧光强度生成一维直方图，并按照荧光强度和散射光强度生成二维散点图。仪器可得研究参数信息(3项)中UTI信息可作尿路感染致病菌初筛。本文表1显示UF-1000i分析仪测定白细胞、细菌的批内精密度CV为9.1%、9.2%。仪器标定CV范围为WBC≤10%,BACT≤20%，符合仪器标准。图1显示UF-1000i尿液分析仪测定细菌的稀释线性范围为23 128个/μl，α=1.0002，r=1.0000。图2显示UF-1000i分析仪测定白细胞的稀释线性范围为7 690个/μl，α=1.0003，r=1.0000。表3显示在74例待测标本中，显示UF-1000i分析仪分析25例标本提示UTI信息，细菌培养有13例标本培养结果为阳性。假阳性率21.4%，假阴性率27%，敏感性72.2%，特异性78.5%，阳性预示值52%,阴性预示值89.7%,准确度77.0%。测定结果按仪器说明及相关资料以细菌≥100/μl和白细胞≥10/μl为阳性，显示UTI信息，报告提示尿路感染可能，所以能够为尿路感染粗筛和UTI药效评定标准的评定提供有用的诊断支持信息，指导临床第一时间经验用药。泌尿系统炎症时均可见到尿中白细胞增多,尤其在细菌感染时尿内细菌数量增加，伴随尿内白细胞数量的增加是诊断尿路感染的主要依据。据报道，UF-1000i在细菌检测方面作了很大的改进，配置专用的细菌分析通道，克服了UF-100对细菌检测的诸多影响因素[5]。操作简便，快捷，在一定范围里对白细胞和细菌的定量连续现象弥补了尿十联之不足,为临床提供更多更确切信息。可高精度检测出约5×103个/ml(5个/μl)以上尿中细菌的能力，当仪器提示为UTI阳性时再做尿液细菌培养还可以减少不必要的培养和时间，达到快速诊断、简便、经济的目的。但鉴于它存在一定的假阳性和假阴性，如要确诊泌尿道是否有细菌感染以及感染细菌的种类及药敏结果则必须作细菌培养。

1 钟雪萍，刘静，黄凤珍，尿常规亚硝酸盐测定与尿沉渣细菌计数对尿路感染的筛查.医学信息，2011,24：206.

2 王羽,张宗久,赵明刚，等主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社,2006.743.

3 丛玉隆.尿液沉渣检查标准化的建议.中华检验医学杂志,2002,25:249-250.

4 汤均.UF-100流式尿沉渣分析仪在筛选老年糖尿病尿路感染中的应用.实用医技杂志,2007,14:4581-4582.

5 秦桂娥，靳岩.UF-100尿沉渣分析仪影响因素探讨.国际检验医学杂志，2006,27：935-937.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.14.027

215009 江苏省苏州市中医医院检验科

R 446.12

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1002-7386(2014)14-2140-03

2013-12-03)