不同生长调节剂对康乃馨组织培养的影响

张婷　代容春

摘 要 [目的]利用3种植物生长调节剂6-BA、NAA、2，4-D探究其对植物组织培养的促进作用。[方法]配置不同浓度不同功能的培养基，利用无菌技术接种康乃馨外植体并定期观察植物组织生长情况。[结果]6-BA与NAA对康乃馨丛生芽的生长具有显著促进作用。[结论]植物生长调节剂对康乃馨植物组织培养的生长具有不可或缺的重要作用，可以在生产实践中运用不同植物生长调节剂配比以提高康乃馨花卉产率。

关键词 康乃馨；组织培养；愈伤组织；生长调节剂

中图分类号：S682.19 文献标志码：A 文章编号：

康乃馨别名麝香石竹，香石竹（Dianthuscaryophyllus L），石竹科，多年生草本植物[1]。分为露地栽培种和温室栽培种2大类，为世界5大切花之一。温室栽培可四季开花，切花保存时间长，花直径5～10 cm，花色鲜艳，有白、红、桃红、桔黄、紫及杂色[2]。花瓣如绢，镶边叠褶，匀称地包卷在筒状的花萼之内，香味宜人，在世界各地被人们广泛栽培。但目前，用常规扦插方法繁殖，繁殖系数低，速度慢，难以满足市场需求。同时，因为花长期经过无性繁殖，病毒侵染严重，造成切花的商品品质下降。近年来，人们逐渐开始重视康乃馨的快速繁殖，并有多篇报道现世。为解决康乃馨生产上的问题，采用植物生长调节剂诱导植物组织培养康乃馨优良新品种。最常使用的生长调节剂是生长素和细胞分裂素，这2类生长调节剂在植物生长过程中起到重要作用。生长素包括：1-萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）等；细胞分裂素包括6-苄基腺嘌呤（6-BA）及玉米素等。本次实验使用NAA、6-BA、2，4-D 3种植物生长调节剂对康乃馨进行组织培养，以期为康乃馨组织培养生产提供理论指导。

1 材料与方法

1.1 材料

生长旺盛无病害的康乃馨小型盆栽。

1.2 方法

1.2.1 培养基配制方法

1.2.1.1 植物组织培养培养基的配制

按照比例配置好培养基原液，并将原液均分，往液体中滴加植物生长调节剂，本次实验共配制3种不同浓度的丛生芽诱导培养基3种，分别为：①6-BA 2.0；②6-BA 2.0+NAA 0.5；③6-BA 2.0+NAA 1.0；。均匀搅拌后将各种培养基分装至培养瓶，并贴上对应标签进行灭菌。

1.2.2 无菌操作

1.2.2.1 操作准备

将培养基、无菌水、及各种接种用具放入超净工作台，打开紫外灯，照射消毒20～30 min后，打开无菌风开关，关紫外灯，打开照明日光灯。清洗双手，用棉花吸取75%酒精擦手，自内向外擦拭超净台，点燃酒精灯。

1.2.2.2 外植体消毒

选取康乃馨健康新鲜茎段或叶片为外殖体，用剪刀切取所需组织，将植物组织在70%～75%酒精中浸泡消毒30 s，之后移入0.1%升汞溶液浸泡10 min，在超净台内用无菌水冲洗5～6次后即完成外植体消毒过程。

1.2.2.3 外植体的接种

丛生芽诱导接种：在无菌超净台内将消毒好的康乃馨接种材料在培养皿内用无菌滤纸吸去多余水份，借助剪刀剪取长度约1 cm左右带有茎节茎段，用镊子将茎段一半斜插入培养基中，盖好瓶盖。以上无菌操作均需在酒精灯火焰旁进行。

1.2.3 培养及记录

将接种后培养瓶放入恒温光照箱中培养，温度（28±1）℃ 、光强2 000～2 500 Ix、每天光照14 h，愈伤组织需遮光培养。每周固定时间取出培养瓶查看植物组织生长情况清除染菌培养瓶并记录数据并制成表格。

2 结果与分析

2.1 6-BA和NAA质量浓度配比对康乃馨丛生芽诱导的影响

从生长状态来看，单独添加6-BA时，丛生芽生长状况不佳，芽小而疏松。当培养基中添加的6-BA和NAA质量浓度配比为2：1或4：1时，丛生芽生长状况良好，芽强壮而密集，且接种茎段成活率较高，生长旺盛。从出芽率来看，单独添加6-BA时出芽率为75%，出芽率介于添加6-BA和NAA质量浓度配比为4的培养基与6-BA和NAA质量浓度配比为2的培养基之间；添加6-BA和NAA质量浓度配比为4的培养基出芽率最高，为90%；添加6-BA和NAA质量浓度配比为4的培养基出芽率最低，约为57.1%。因此本实验证明，合适的6-BA和NAA质量浓度配比有助于康乃馨丛生芽的诱导，但添加NAA的培养基不一定有助于康乃馨丛生芽的诱导。

2.2 分析

本次实验结果与孙骏威等和沈宁东等的实验结果有较大出入。他们实验结果表明，6-BA和NAA质量浓度配比为2：1和4：1都有助于康乃馨丛生芽的诱导，从生长状况与出芽率方面考虑，2种实验方案都相差不大。经反思，认为所得结果与他人不同的原因可能为实验材料的限制，如培养瓶数量少要平均分配给11种不同浓度溶液配制丛生芽诱导培养基、生根培养基、愈伤组织诱导培养基和分化培养基，且接种中部分培养基染菌，故培养数量不够大，且只配置了3种不同生长调节剂质量浓度配比的丛生芽诱导培养基，造成结果不够准确，下次实验时需要改进。

3 讨论

本实验分别研究了6-BA和NAA质量浓度配比、NAA质量浓度搭配、6-BA和2，4-D质量浓度配比对康乃馨丛生芽诱导的影响。从结果得知，6-BA和NAA质量浓度配比对康乃馨丛生芽诱导具有明显促进效果，且6-BA和NAA质量浓度配比为4：1的时候具有最佳出芽效果，出芽率约为90%；但因为实验时间以及实验环境限制等问题，对康乃馨出芽率造成了较大的影响，这也提醒在日常的生产生活中，康乃馨需要大量时间以及适宜的环境进行组织培养，并且培养量较大时出芽率应会稍微提高，偏差较小。本次实验成功证明了植物生长调节剂对康乃馨植物组织培养具有显著促进作用，2种植物生长调节剂共同作用能有效提高丛生芽出芽率，可运用在生产变异新种康乃馨植株中，本实验也将继续培养观察康乃馨，能为今后大批利用植物组织培养技术培养观赏康乃馨提供理论及技术上的支持。

参考文献

[1]王莲英，朱秀珍，虞佩珍.中国名贵花卉鉴赏与栽培[M].合肥：安徽科学技术出版社，1997：77-79.

[2]聂庆娟，王进茂，梁海勇，等.康乃馨的繁殖[J].河北林果研究，1997，（1）：50-52.

（责任编辑：赵中正）