健脾和胃颗粒提取工艺研究

★ 吴德强

(南昌大学第二附属医院药剂科 江西 南昌 330006)

健脾和胃颗粒由党参，麦冬，肉桂，厚朴，远志，五味子等十余味中药材组成。具有疏肝理气、健脾和胃功效，临床常用于治疗消化不良，不思饮食，腹胀肠鸣，大便溏泻，胁肋胀痛，头昏乏力等证，且取得有良好的临床疗效。本研究对乙醇浓度、溶剂量、提取时间、提取次数等因素进行了考察。为了提高药品质量,确保药物的安全有效,采用高效液相色谱法测定该品中橙皮苷的含量。

1 仪器与材料

健脾和胃颗粒(院内制剂，批号：20131201，20131202，20131203)；橙皮苷对照品(中国药品生物制品鉴定所，批号：781-9404)；高效液相色谱仪Prominence LC-20A(日本岛津)。

2 实验方法

2.1 含量测定

2.1.1 方法系统适用性 色谱柱：十八烷基键合硅胶柱，流动相：乙腈-水(32∶68)，流速：1.0mL/min。

2.1.2 对照品溶液制备 精称称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成0.526mg/mL的溶液即得。

2.1.3 供试品溶液制备 取样品10g，研细，精密称取1g，置索氏提取器中，加甲醇40mL加热回流4h，滤过，转移至蒸发皿中浓缩至干。残渣加水10mL使溶解，水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40mL，合并正丁醇液。再用氨试液充分洗涤2次，每次40mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂粒(内径1.5cm,长12cm)的色谱柱。用水50mL洗涤，弃去水液。再分别用40%、70%乙醇各40mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解，并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.1.4 标准曲线绘制 分别精密量取对照品溶液5，7.5，12.5，15，17.5，20μL溶液注入色谱仪，以对照品进样量为横坐标，色谱峰面积为纵坐标，得回归方程Y=2×106X-6.63×105(r=0.9998)，说明橙皮苷进样量在2.63～10.52μg范围内线性关系良好。

2.1.5 精密度考察 分别精密吸取对照品溶液10μL，连续进样6次，记录色谱峰面积，测定结果RSD分别0.73%，说明仪器精密度良好。

2.1.6 稳定性考察 精密量取同一供试品溶液及对照品各10mL，分别于供试品溶液制备后的0,2,4,6,8,10h进样，记录色谱峰面积，供试品溶液和对照品溶液连续测定结果的RSD分别为1.12%、1.67%，表明样品的稳定性良好。

2.1.7 重复性考察 取样品6份，每份10g，按供试品制备方法制成供试品溶液。取10μL,注入液相色谱仪中，结果表明，方法重复性试验良好。

2.1.8 加样回收率考察 取样品6份，每份10g，分别研细，精密称取1g，精密加入橙皮苷对照品适量，按样品“含量测定”相下方法，测定，结果显示：橙皮苷的回收率在95.03～101.55%之间，RSD为1.48%，符合有关规定。

2.2 正交试验方法

2.2.1 因素水平确定 依据中药提取经验,确定醇浓度(A)、溶剂量(B)、提取时间(C)、提取次数(D)、为提取效果的主要因素,每个因素选取3个水平。选用L9(34)正交表安排实验,取浸膏的收膏率与橙皮苷含量二项为考察指标,并用直观法和方差分析法分析，结果见表1～3。

表1 正交试验因素水平表

分别以干浸膏的收膏率与橙皮苷含量为指标,对测定结果进行方差分析,结果见表2和表3。

表2 正交实验设计及结果分析表

表3 方差分析表

从干膏收率和橙皮苷含量结果分析表明, 各因素对橙皮苷含量的影响情况为A3>A2>A1,B1>B2>B3, C1>C2>C3, D2> D1>D3。方差分析结果表明,A、B,两因素对干膏收率和橙皮苷含量均有显著性的差异,故A3,B选B1,根据工业化大生产省时、降耗、降低成本角度考虑,故因素A选择水平2，即A2；C、D因素无显著的影响,因此C选C1,D选D2。因此,其优选工艺条件应为A2B1C1D2。

3 讨论

本论文通过对健脾和胃颗粒制备工艺的研究，进一步优化了制备工艺的方法，利用高效液相色谱仪对原药材提取液中有效成分的含量进行测定，对各因素的水平选择，依据已有的文献资料报道，对处方中原药材有效成分的提取溶剂，用量，提取时间等进行优选，通过方差分析及单因素分析对醇提工艺中各因素进行优化、筛选，确定最优醇提工艺为：取黄芪、陈皮、厚朴、枳实、远志、五味子，加75%乙醇回流提取2次,第一次加入10倍量75%乙醇,加热回流提取3h;第二次加8倍量75%乙醇,加热回流提取2h。此方法提高了有效成分的转移率，确保药物的疗效，为药物在临床上的应用提供了保障。此外，方中肉桂、川芎所含成分为挥发性成分，工艺上应采用挥发油提取，但由于挥发油提取工艺较成熟[3,4]，本研究对其提取工艺未作考察。同时将醇提后的药物残渣与肉桂川芎残渣及白芍、麦冬等方中其他药物共同水煎，并确定了最终水煎工艺。

[1]何文江，陈向东，王文涛,等.肉桂提取工艺及其挥发油包合制备工艺的研究[J].中药材,2012，35(9)：1 511-1 515.

[2]夏苗芬,史志超.酸枣仁颗粒中酸枣仁醇提工艺条件的优选[J].中国中医药信息杂志,2010，12(6)：305-307.

[3]白晓朝.正交试验法优选宁夏产秦艽醇提工艺[J].中华中医药杂志,2010,6(1)：156-158.