大肠埃希菌产ESBLs进展及耐药性调查

刘淑芬 张敏

·药物研究·

大肠埃希菌产ESBLs进展及耐药性调查

刘淑芬 张敏

目的了解大肠埃希菌临床感染及其耐药性变化。方法收集2000至2009年所有从临床标本中分离的大肠埃希菌1 631株，观察其检出率及耐药性变化。用全自动微生物分析系统及其对应的鉴定卡进行鉴定；体外药物敏感性试验用最低抑菌浓度法；超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测用表型确证方法进行。结果2000至2009年其分离率维持在12%～20%。产ESBL菌株由2000年18%提高到2009年61%。2000至2005年是产ESBL菌株迅速增长期。药物敏感性趋势氨苄西林13%以下，一代头孢菌素从35%降到15%，三代头孢从78%降到40%，其他变化不明显，碳青霉烯类没有耐药。结论大肠埃希菌在感染中的分离率变化不大，产ESBL菌株比率增长明显，ESBLS检测应常规进行，头孢类抗菌药物耐药性提高明显，其他抗菌药物耐药性变化不明显。

大肠埃希菌；超广谱β-内酰胺酶；感染；耐药性

随着广谱抗生素的广泛使用和不合理应用，细菌耐药性日趋严峻。产超广谱β-内酰脑酶(ESBLs)是目前革兰阴性菌耐药的主要原因之一,革兰阴性菌株往往具有多重耐药性,常给临床抗感染治疗带来很大困难。ESBLs主要由肠杆菌科细菌产生，临床最常见的为大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌。为了解ESBLs的感染情况和耐药性，本文收集迁西县人民医院2000至2009年所有从临床标本中分离的大肠埃希菌1 631株，进行ESBLs的检测及耐药分析，为临床合理使用抗生素提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料 所有标本为临床送检标本，分离到的大肠埃希菌进入本次调查，1周内同一患者同样标本中分离的不重复记入。

1.2 标本接种 血培养以血液增菌方法增菌，阳性后分离培养；各类无污染的穿刺液标本接种血/中国兰琼脂平板并同时增菌，增菌按血培养进行；可能存在污染的标本或其他的标本接种血/中国兰琼脂。

1.3 培养 血培养以血液增菌培养仪及对应的增菌培养瓶进行；接种后的血/中国兰琼脂平板35℃，空气，培养。

1.4 细菌鉴定 用全自动微生物分析系统及对应的鉴定卡片对分离的细菌进行鉴定。

1.5 药敏实验 用最低抑菌浓度(MIC)法进行；判断标准执行美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)和名称更改后的CLSI标准。ESBLs检测用表型确正方法。

2 结果

2.1 10年中大肠埃希菌感染中的分离率及各年产ESBLS 菌株比率 2000至2009年10年中大肠埃希菌在感染中的分离率维持在12%～20%。期间变化没有规律。产ESBLS 菌株比率从2000年的18%[1]到2005年快速升高到68%。2005年之后维持在高水平。见表1。

表1 10年中大肠埃希菌感染中分离率及各年产ESBLS 菌株比率

2.2 10年中大肠埃希菌体外药物敏感性结果 2000至2009年10年中青霉素类和一代头孢敏感性差，三代头孢敏感性与产ESBL相反。庆大霉素、环丙沙星和复方新诺明敏感性也很差。啊米卡星、呋喃妥因始终维持较高的敏感性。大肠埃希菌对亚胺培南一直保持敏感。见表2。

表2 10年中大肠埃希菌体外药物敏感性结果

3 讨论

大肠埃希菌是临床最常见的感染菌之一，关注其感染中的分离率和耐药性变化对治疗和预防有极大的现实意义。感染中某一细菌分离率主要与感染类型和其耐药性有关。从本资料看出尽管大肠埃希菌产ESBL增长迅速，但其分离率并没有虽之提高，说明其他细菌耐药性也有了一定的提高 。在阴性细菌感染中，大肠埃希菌的分离率由原来的第一位被铜绿假单胞菌取代之后一直保持第二的位置，说明10年中感染的类型变化不大。

大肠埃希菌对氨苄西林的敏感性10年中一直很低，氨苄西林又是其他广谱青霉素类的代表药物，所以在没有敏感证据且常由大肠埃希菌引起的感染治疗时应避免使用。头孢噻吩是一代头孢菌素体外药敏试验的指示药物，他低的敏感性说明多数一代头孢也不适合其感染的治疗。头孢唑林是一代头孢菌素中抗菌活性最好的之一，但敏感性也很低。大肠埃希菌对青霉素类和一代头孢菌素耐药多由细菌产传统的广谱β-内酰胺酶TEM-1，TEM-2和SHV引起[2]，说明传统β-内酰胺酶在大肠埃希菌中相当普遍。

三代头孢菌素中头孢哌酮敏感性低于头孢曲松和头孢他啶。头孢曲松和头孢他啶敏感性在200至2005年中迅速降低，且2005至2009年一直维持在较低水平。肠杆菌科细菌特别是大肠埃希菌、克雷伯菌属和奇异变形杆菌对三代头孢菌素耐药最主要原因就是产ESBLs[2]。ESBLs是由传统的广谱β-内酰胺酶TEM-1，TEM-2和SHV某一基因位点突变后表达所致[3]，但其水解β-内酰胺环能力却有了极大提高，其所表达的ESBLs不仅可以分解青霉素类、一、二代头孢菌素，对三代头孢菌素也有很强的分解能力。所以，NCCLs和更名后的CLSI规定，产ESBLs菌株感染临床以上述药物治疗无效。我们的结果中只有及个别耐药不是由于产ESBLs引起，证明了大肠埃希菌对三代头孢耐药主要其产ESBLs引起。值得注意的是产ESBLs的大肠埃希菌约80%对头孢他啶体外药物敏感检测结果为敏感，这与基因型种类有关[4]。如果对大肠埃希菌不检测ESBL，则其体外药敏试验结果很容易误导临床治疗。

其他类抗菌药物敏感性变化不明显。但庆大霉素、复方新诺明、环丙沙星敏感性很低。啊米卡星和呋喃妥因还维持较高敏感性。我们的结果中还没有发现亚胺培南不敏感的菌株。

大肠埃希菌在感染中的分离率10年间变化不大。大肠埃希菌产ESBL菌株比率增长明显，ESBLS检测必须常规进行；其他抗菌药物耐药性变化不明显但敏感性很低。啊米卡星、呋喃妥因和亚胺培南敏感性高。

1 张敏，张迎春 我院产ESBL E.coli药敏特点分析.承德医学院学报,2002,19:16-17.

2 陈民均.细菌对β-内酰胺药的耐药性及检测方法.中华医学检验杂志，2001，24：197.

3 应春妹，陆丽，汪雅萍，等.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及其耐药基因分析.检验医学2007，22:272-275.

4 孙景勇，倪语星.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的基因分型.中国抗感染化疗杂志,2002,4:211-214.

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10.3969/j.issn.1002-7386.2014.05.063

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