还原型谷胱甘肽对有机磷农药中毒患者血清IL-18水平的影响

朱保月 苏晓阳 李敬 王霞 孙巨勇 高珣 张建军

·论著·

还原型谷胱甘肽对有机磷农药中毒患者血清IL-18水平的影响

朱保月 苏晓阳 李敬 王霞 孙巨勇 高珣 张建军

目的观察还原型谷胱甘肽对有机磷农药患者血清IL-18的影响。方法有机磷农药中毒患者164例随机分为对照组和治疗组，每组82例。2组治疗前和疗程结束后，采用双抗体夹心ELISA 法检测不同时期血清IL-18水平。结果治疗组血清IL-18、ALT水平在治疗后7 d较对照组明显下降(P<0.05)，治疗后7 d血清ALT水平下降，血清IL-18含量随之下降，具有明显相关性(r=22.016)。结论还原型谷胱甘肽治疗后IL-18水平下降，提示还原型谷胱甘肽可清除体内氧自由基及其他自由基，具有保护肝细胞膜、促进肝酶活性、抗氧化、解毒等作用。

有机磷农药中毒；还原型谷胱甘肽；白介素-18

急性有机磷农药中毒(AOPP)是我省最常见的农药中毒之一，毒物进入人体后诱发机体产生炎性反应，造成多脏器的功能损害，有机磷农药中毒导致的烟碱样症状消除后，毒物在肝脏进一步转化代谢，造成肝脏的持续损伤，因此降低毒物对肝脏功能的继发损害可明显改善AOPP患者的预后。白介素-18(IL-18)是近年来新发现的一种细胞因子，Okamura等[1]通过热灭活的丙酸杆菌致敏再注射经脂多糖(LPS)诱发小鼠发生感染性休克，从中毒性休克的小鼠肝脏中第一次发现了IL-18，其诱导产生的多种细胞因子均与肝损害有关[2，3]。AOPP患者机体受毒物的影响产生IL-18，IL-18和IL-12及TNF-α协同产生大量的IFN-γ，进一步损伤肝脏。还原型谷胱甘肽(GSH)是具有多种重要生理功能的活性三肽。GSH具有多种生物学功能，即能清除体内各种氧离子及自由基，可起到稳定肝细胞膜、提高肝脏酶活性、抗氧化、解毒和维持红细胞膜的完整性等作用，还能维持DNA的生物合成、细胞的正常生长和细胞免役等多种生理功能[4]。应用GSH治疗有机磷中毒患者，观察其对患者血清IL-18的影响，探讨GSH对患者肝功能的保护作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 哈励逊国际和平医院急诊科2010年10月至2012年10月住院的急性重度有机磷农药中毒患者164例，男79例，女85例；随机分为GSH治疗组和对照组，每组82例。2组患者性别比、年龄、中毒严重程度差异无统计学意义(P>0.05)。所有病例的诊断均符合符合AOPP诊断和分级诊断标准，并排除肝功能不全患者或病原体阳性者。

1.2 治疗方法 患者入院后均给予清水洗胃至洗出无色、无味液体，用20%甘露醇导泻、清洁毒物污染的皮肤及头发，更换清洁衣物；维持体内酸碱平衡；纠正电解质紊乱；预防应激性溃疡；保持呼吸道通畅，吸氧，重症中毒患者伴呼吸衰竭时给予机械通气治疗；中毒并发脑水肿出现昏迷时应用甘露醇脱水。按中毒轻重程度，分别静脉注射不同剂量的阿托品，并尽快达“阿托品化”，均肌内注射氯解磷定。首次用药0.5 h后，如仍存在中毒症状及体征，且全血胆碱酯酶活力<50%，再次给予首次用药量的1/2，1～2 h后依据病情重复给药，使患者维持“阿托品化”1～3 d，至患者中毒症状、体征基本消失，全血胆碱酯酶活力恢复至正常值的60%。停药观察。治疗组在此治疗基础上给予GSH 2.4 g/d，溶于5%葡萄糖溶液250 ml静脉滴注，连续应用1周。

1.3 血清IL-18检测 中毒患者于治疗前、治疗后第7天采空腹静脉血，血浆IL-18水平测定均采用酶联免疫吸附法，药盒购自法国Diaclcone公司，严格按试剂盒说明书进行操作。

1.4 统计学分析 应用SPSS 17.0统计软件，采用方差分析及直线相关分析处理数据，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者治疗前后血清IL-18、ALT比较 2组患者治疗后7 d的IL-8ALT与治疗前比较，明显降低(P<0.05)，GSH治疗组在治疗后7 d患者血清IL-18、ALT含量较对照组明显下降(P<0.05)。见表1、2。

组别治疗前治疗后7d对照组72±2654±11∗治疗组76±2229±15∗#

注：与治疗前比较，*P<0.05；与对照组比较，#P<0.05

组别治疗前治疗后7d对照组156±38115±29∗治疗组140±33 52±20∗#

注：与治疗前比较，*P<0.05；与对照组比较，#P<0.05

2.2 GSH治疗后1周内血清ALT 水平与IL-18的相关性 治疗后7 d，血清ALT 水平下降，血清IL-18 含量随之下降(r=0.26,P<0.01)，具有明显相关性(r=22.016)。

3 讨论

AOPP患者有机磷农药在肝脏浓度最高，因此对肝脏损伤最重，虽然有机磷是非嗜肝性毒物，但接触较大剂量毒物时，可导致患者发生肝脏损伤，口服药物中毒的患者，毒物经胃肠道吸收，经过肝肠循环，对肝脏的损害更明显，中毒性肝细胞损伤主要机制之一是氧自由基，有机磷毒物在机体内代谢产生大量的氧自由基对肝脏造成损伤，口服吸收的毒物经过肝肠循环，在肝脏分解生成毒性更强的对氧磷，进一步损伤肝脏[4]。转氨酶是由肝脏产生的，肝脏受损时表现为血清转氨酶升高[5]。

GSH主要的合成场所是人体的肝脏，它参与细胞内氨基酸转运、糖代谢和DNA合成调节，具有拮抗外源性毒物、调节机体免疫功能、清除氧自由基、抑制细胞凋亡、维持细胞蛋白质结构和功能等作用，GSH还具有强大的还原作用，可提高肝细胞对氧自由基的耐受性，稳定肝细胞膜，使肝酶水平降低[6]。

AOPP后患者机体GSH明显减少，甚至出现耗竭，明显减弱了肝细胞抵御自由基及其他内外源性有害物质的作用，机体受到毒物刺激后可产生大量的自由基，这些自由基具有强氧化作用，损害肝脏的功能，甚至导致肝细胞坏死，谷胱甘肽不能清除机体产生的大量氧自由基时，氧自由基就会进一步损害肝脏细胞，由肝功能受损引起的GSH耗竭可灭活腺苷蛋氨酸合成酶，使转巯基作用明显降低，进一步减少GSH的生成，如此形成恶性循环[7]。给中毒机体补充外源性GSH可明显提高肝脏的GSH含量，在清除氧自由基、保护肝细胞的同时，还通过γ-谷氨酰胺循环提高肝脏的蛋氨酸含量，使转甲基及转丙氨基反应顺利进行，从而改善肝脏的合成、脂肪代谢、胆红素代谢、解毒及灭活激素等功能，促进胆酸代谢，使机体肝脏功能快速恢复[8]，有利于AOPP患者的治疗，明显改善其预后。

IL-18是近年来人类发现的一个非常重要的多效能促炎性因子，是迄今为止所发现的最强的中性粒细胞趋化因子，并能激活单核巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶，促进IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α以及巨噬细胞炎性蛋白-1、单核细胞趋化因子的产生，诱导T细胞和NK细胞表达Fas配体，亦能诱导机体表达多种黏附分子，在整个细胞因子网络中起着重要作用，是造成机体损伤的重要炎性递质。其诱导产生的多种细胞因子均与肝损害有关[2，9]。

研究结果显示，有机磷中毒患者血清IL-18水平明显升高，说明其有机磷农药所致的机体肝损伤与IL-18密切相关，应用GSH后可使中毒患者血清IL-18水平明显降低,说明GSH能够通过有效降低中毒患者血清IL-18水平，减少相关炎性因子的产生，影响FasL的表达，降低对肝脏功能的损害。

1 Kamura H,Tsutsui H,Komatsu T,et al.Cloning of a new cytokinethat induces IFN-γ production by T cells.Nature,1995,378:88-91.

2 Trautwein C,Rakemann T,Brenner DA,et al.Concanavalin-A in2duced liver damage:action of intracellular pathways triggered by tumornecrosis factor in mice.Gastroenterology,1998,114:1035-1045.

3 Fiorucci S,Santucci L,Antonelli E,et al.NO-aspirin protects fromT cell-mediated liver injury by inhibiting caspase - dependent process2ing of Th1 - like cytokine.Gastroenterology,2000,118:404-421.

4 赵保平,韩全乡,姜祖光,等.FOLFOX6方案治疗晚期胃癌45例临床观察.山东医药,2008,48:138-139.

5 王汉斌,阮金秀.急性有机磷农药中毒致脏器损害与并发症的防治.中华急诊医学志,2001,10:285-287.

6 孟宪镛主编.实用消化病诊疗学.第1版.上海:世界图书出版社,2001.608.

7 钱小明,吴学豪.还原型谷胱甘肽在急危重症中的应用.中国急救学,2003,23:412.

8 Corrales F,Ochoa P,Rivas C,et al.Inhibition of glutathionesynthesis in the liver leads to S-adenosyl-L-methinonine synthetasereduction.Hepatology,1991,14:528.

9 Dec NE,Cacciaglia R.Therapeutic use of glutathione.Clin Ther,1990,132:167.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.05.030

053000 河北省衡水市，哈励逊国际和平医院EICU(朱保月、李敬、王霞、高珣、张建军)；河北省衡水市第三人民医院(苏晓阳)；河北省衡水市第二人民医院(孙巨勇)

R 595.51

A

1002-7386(2014)05-0713-02

2013-12-11)