抵抗素基因rs34861192多态性与东北汉族 人群2型糖尿病相关性研究

李劲然，张桂珍，陈 琰,2，丛乐乐﹟，宋 旸，杨期巍，于 衫，张 琳，杜珍武*

(1.吉林大学中日联谊医院 中心研究室,吉林 长春130033;2.吉林大学第二医院 内分泌科)

糖尿病是危害老年人健康的重要疾病之一。近几年的研究发现糖尿病的发病不仅与生活方式有关，也与遗传因素密切相关。一些与糖尿病发生易感基因以及位点先后被发现，这些易感基因的发现有利于进一步阐明生活方式与基因共同作用的糖尿病发生机制，为糖尿病防治提供理论依据。

抵抗素作为一种炎性因子来源于单核-巨噬细胞系统[1]，在小鼠的研究认为抵抗素与2型糖尿病(T2DM)发病过程中胰岛素抵抗有关。而在人类是否是诱发胰岛素抵抗，导致2型糖尿病的发生还存在争议。近几年发现抵抗素基因存在几个单核苷酸多态性(SNP)位点与抵抗素在血清中的含量以及与2型糖尿病有密切的关系。其中抵抗素基因的rs34861192以及rs1862513两个位点被认为是与日本人群2型糖尿病发病密切的两个SNP[2-4]。在我国，抵抗素基因的rs1862513位点与我国2型糖尿病相关性研究较多，但是否与我国的2型糖尿病发病有相关性的研究结果不一致[5-7]；抵抗素基因的rs34861192位点在我国研究较少，特别是东北地区的人群。因此本研究拟进行抵抗素基因的rs34861192位点与我国东北地区糖尿病发病的相关性以及临床表型相关性进行研究，以此阐明该位点是否为糖尿病发病风险基因之一。

1 材料与方法

1.1 研究对象

2型糖尿病患者113例均来自吉林大学第二医院内分泌科，在获取血液样本的同时，跟踪收集这些研究对象的临床资料包括年龄、性别、体重指数、空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数和胰岛素敏感指数等。正常对照组107例来自吉林大学中日联谊医院体检中心健康体检者，明确排除糖尿病。

1.2 血细胞DNA提取

获取研究对象外周抗凝静脉血2 ml，200 g离心10 min，吸取血浆保存。剩余的血细胞应用血液DNA提取试剂盒(北京天恩泽公司，中国)进行血细胞DNA提取。提取的DNA应用分光光度计进行DNA含量与质量的测定。提取DNA置于-80℃保存。

1.3 基因分型

应用连接酶检测反应分型方法进行113例糖尿病患者与107例健康人的抵抗素基因的rs34861192位点基因分型检测。该检测委托上海捷瑞生物技术有限公司完成。

1.4 统计分析

抵抗素基因的rs34861192位点在人群中的基因型等位基因频率以及Hardy-Weinberg equilibrium应用Shesis软件(http://analysis.bio-x.cn/SHEsisMain.htm)进行分析；临床相关指标包括体重指数、空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数和胰岛素敏感指数等与抵抗素基因的rs34861192位点的相关性采用独立T检验统计方法应用SPSS13.0软件进行分析。

2 结果

2.1 抵抗素基因rs34861192多态性与2型糖尿病相关性

抵抗素基因rs34861192基因型在两组人群中分布频率均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。抵抗素基因rs34861192多态性的基因型频率在T2DM组和正常对照组中差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。等位基因频率的分布在两组间差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

2.2 抵抗素基因rs34861192多态性与2型糖尿病患者临床表型相关性分析

病例组中GG基因型的患者空腹胰岛素含量以及胰岛素抵抗指数均明显高于GA基因型患者(P值均<0.05)，患者体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和胰岛素敏感指数在病例组中GG基因型与GA基因型的患者之间没有差异(P值均>0.05 )结果见表3。

表1 rs34861192基因型与2型糖尿病相关性

表2 rs34861192等位基因与2型糖尿病相关性

表3 rs34861192多态性与2型糖尿病患者相关生化指标的关系

*P< 0.05

3 讨论

抵抗素基因多态性位点与T2DM的关系国内外学者进行广泛研究，其中抵抗素基因-420多态位点与+299多态位点研究较多。抵抗素基因rs34861192位点在国外人群中有一定突变率，我国杨冰等对广东地区2型糖尿病患者与抵抗素基因该单核苷酸多态相关性进行初步研究[8]，而东北地区人群该基因位点多态性的相关研究未见文献报道。

本研究应用连接酶检测反应分型方法检测汉族人群113 例2型糖尿病患者，107例正常对照者rs34861192(G/A)多态性。分析该基因位点多态性与2型糖尿病的相关性，并分析该基因多态性与糖尿病患者体重指数、空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数和胰岛素敏感指数的相关性。结果显示2型糖尿病组和对照组抵抗素rs34861192位点的基因型分布分别为AA0.9%、AG35.4%、GG63.7%和AA 1.9%、AG35.5%、GG62.6%；等位基因频率分别为A 18.6%、G 81.4%和A 19.6%、G 80.4%，该位点的基因型分布和等位基因频率在2型糖尿病组和对照组间分布均无统计学意义(P值均>0.05)。病例组中GG基因型的患者空腹胰岛素含量以及胰岛素抵抗指数均明显高于GA基因型患者(P值均<0.05)，患者体重指数、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和胰岛素敏感指数在病例组中GG基因型与GA基因型的患者之间没有差异(P值均>0.05 )。上述研究结果表明抵抗素基因rs34861192多态性与东北汉族人群2型糖尿病无显著相关性，但与临床胰岛素抵抗有关系。我们研究结果与杨冰等研究结论不一致，这种不同结论可能由于(1)各个实验结果之间存在差异，需要进一步进行meta分析，进行数据整合，(2)同一民族同一疾病发生的遗传背景存在一定地域差异性。

作者简介：李劲然(1991-),男，吉林大学白求恩医学部2010级本科在读。

参考文献：

[1]Steppan CM，Bailley ST，Bhats，et al.The hormone resistin links obesity to diabetes[J].Nature，2001，409(6818)：307.

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[3]Osawa H,Tabara Y,Ohashi J,et al.Is rs34861192 or rs1862513 a more promising variant for determining plasma resistin in an aged Japanese population[J]?Diabetologia,2010，53(4):795.

[4]Asano H,Izawa H,Nagata K,et al.Plasma resistin concentration determined by common variants in the resistin gene and associated with metabolic traits in an aged Japanese population[J].Diabetologia,2010，53(2):234.

[5]张 维,毕娅欣.抵抗素基因多态性与2型糖尿病及肥胖相关性研究[J].实用全科医学,2007,06:478.

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[7]孙亚东,马 彦,杨 乐.抵抗素基因多态性与中国东北地区汉族老年人群2型糖尿病患病的相关性[J].中国老年学杂志,2011,23:4515.

[8]杨 冰,刘忠民.抵抗素基因单核苷酸多态性与2型糖尿病的相关性研究[J].中国现代医生，2012，50(21):40.