血清可溶性粘附分子ICAM-1、VCAM-1与急性冠脉综合征及其预后的关系

杨群芳，严伟玲

(惠州市中医医院检验科，广东 惠州 516001)

急性冠脉综合征(acute coronary syndromes，ACS)是由动脉粥样硬化引起急性心肌缺血的一组临床综合征，它是冠心病发生发展的一种临床阶段，包括急性心肌梗死和不稳定性心绞痛。动脉粥样硬化是动脉血管壁的慢性炎症反应引起，其生理机制是炎性反应导致循环血液中白细胞和单核细胞通过与血管壁特异性受体结合而粘附于血管壁上，随后向血管内皮迁移造成血管动脉粥样硬化样病变[1～4]。细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule，ICAM-1)和血管细胞间粘附分子(vascular cell adhesion molecule，VCAM-1)是免疫球蛋白基因超家族的成员，在介导血液中炎性细胞与血管内皮细胞粘附过程中起着非常重要的作用[5～7]。研究表明循环血液中粘附分子是由于炎性细胞与血管内皮细胞结合后被清除后进入循环血液中，ICAM-1的释放量与体外培养的内皮细胞表面表达量成显著正相关，在人类主动脉粥样硬化中血清VCAM-1表达量与VCAM-1 mRNA也是显著相关的[8，9]。因此本研究检测了ACS患者和健康对照人群循环血清中VCAM-1与ICAM-1的量，同时随访ACS患者心脑血管不良事件的发生情况，探讨循环血清中VCAM-1与ICAM-1与ACS及其预后的关系。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择某医院心内科2009年6月至2011年12月确诊的120例ACS患者作为研究对象，ACS诊断均按照WHO诊断标准执行。选择同期在医院进行健康体检，年龄和性别与ACS患者匹配的健康人群120例作为对照，排除有冠心病、严重肝肾疾病以及血管疾病的人群。在所有对象签署知情同意书后，由经过培训的调查员详细询问研究对象和对照人群年龄、吸烟饮酒史、高血压史、糖尿病史和冠心病家族史，并且测量研究对象身高、体重、腰围、臀围等指标。抽取研究对象空腹外周血5ml，肝素抗凝备用。

1.2 生化指标检测 研究对象空腹外周血于3000g离心10min，分离上层血清，保存于-80℃备用。使用全自动生化分析仪(BS2000M，深圳迈瑞公司)检测研究对象血清中总胆固醇、甘油三酯、血糖和超敏反应蛋白(hsCRP)。使用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒(美国R&D公司)检测研究对象血清中sVCAM-1和sICAM-1，具体操作步骤简要如下：首先将样品稀释液加入已包被抗体的反应孔中，在37℃下孵育1h后用双蒸水洗涤；随后在每个反应孔中加入酶标抗体，37℃下孵育0.5h后再用双蒸水洗涤；最后加入显色液显色，在ELSA检测仪上于450nm处测定各孔的OD值；每个样品进行复孔检测，OD值以两孔OD值得平均值表示；根据已知浓度的标准品和相应的OD值，制定标准曲线计算样品中各指标的浓度。

1.3 临床随访 对纳入研究的120例ACS患者定期每3个月进行1次随访，随访方式为门诊、住院及电话随访，随访的主要内容为心脑血管主要不良事件(MACCE)和发生事件，MACCE主要包括心功能衰竭、心肌梗死、需要住院治疗的不稳定心绞痛、脑卒中、脑缺血和死亡。随访终止日期到2012年6月30日，共随访6～33个月，期间无1例失访，随访率为100%。

1.4 统计学方法 采用SPSS 21.0统计软件进行统计分析。分类资料采用χ2检验，对连续性资料首先采用正态性检验，所有连续性资料为正态分布，使用均数±标准差表示；两组样本间连续性变量采用t检验；采用Cox比例风险回归模型进行生存资料的单因素和多因素分析。所有检验均为双侧概率检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 正常对照组与ACS基本资料比较 由表1可知，ACS组患者体重、BMI、腰围、臀围和腰臀比显著高于正常对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)；ACS组患者吸烟、饮酒比例显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；ACS组患者收缩压显著高于对照组(P<0.05)，而舒张压差异无统计学意义(P>0.05)；ACS组患者高血压史、糖尿病史和关系病家族史比例也均高于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；两组人群性别分布、年龄和身高差异均无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组一般情况比较

2.2 ACS组与正常对照组临床生化指标比较 由表2可知，ACS组患者血清中总胆固醇、甘油三酯、血糖、hsCRP、sVCAM-1和sICAM-1浓度均显著高于对照组，差异均具有统计学意义(P<0.001)，其中ACS组患者血清hsCRP平均水平为对照组平均水平的10.28倍，ACS组血清sVCAM-1平均水平为对照组平均水平的4.08倍。

表2 两组临床生化指标比较

2.3 MACCE组和无MACCE组患者一般情况和临床生化指标比较 由表3可知，MACCE组和无MACCE组患者一般情况如年龄、性别、BMI、腰臀比、吸烟、饮酒比例、血压(收缩压和舒张压)，疾病史(高血压史和糖尿病史)以及冠心病家族史差异均无统计学意义(P>0.05)；两组患者临床生化指标总胆固醇、甘油三酯和血糖水平差异也均无统计学意义(P>0.05)，但是hsCRP、sVCAM-1和sICM-1水平差异均具有统计学意义(P<0.05)，MACCE组患者血清中hsCRP、sVCAM-1和sICM-1水平显著高于无MACCE组患者。

表3 MACCE组和无MACCE组患者一般情况和临床指标比较

2.4 ACS患者MACCE危险因素分析 单因素COX回归模型分析可知，腰臀比、hsCRP、sVCAM-1和sICM-1是ACS患者MACCE的危险因素(P<0.05)；多因素COX回归模型校正其他因素的影响后发现，只有hsCRP和sVCAM-1是ACS患者MACCE的独立危险因素(P<0.05)，ACS患者血清中hsCRP和sVCAM-1水平越高，越容易发生MACCE，见表4。

表4 急性冠脉综合症患者MACCE危险因素分析

3 讨 论

ICAM-1和VCAM-1是免疫球蛋白基因超家族的成员，在介导血液中炎性细胞与血管内皮细胞粘附过程中起着非常重要的作用[5～7]。免疫组化学分析发现动脉粥样硬化斑块中ICAM-1和VCAM-1表达量是显著增加的。循环血液中粘附分子是由于炎性细胞与血管内皮细胞结合被清除后进入循环血液中，有研究发现ICAM-1的释放量与体外培养的内皮细胞表面表达量成显著正相关，同时有研究观察到在人类主动脉粥样硬化中血清VCAM-1表达量与VCAM-1 mRNA也是显著相关的[8，9]。另外一些前瞻性研究观察到炎性反应进程的动脉壁上的ICAM-1和VCAM-1表达量是增加的，因此猜测循环血液中这些粘附分子表达量也会增加，同时循环血液中粘附分子的量反映了内皮细胞上他们的表达量。本研究检测了ACS患者和健康对照人群血清中两种最重要的粘附分子ICAM-1和VCAM-1，结果发现ACS患者血清sVCAM-1和sICAM-1水平显著高于对照组，同时通过对ACS患者进行随访，发现ACS患者中MACCE发生者血清sVCAM-1和sICAM-1水平也均显著高于非MACCE者，单因素及多因素Cox回归模型分析显示sVCAM-1是ACS患者发生MACCE的独立预测因素。

在心肺疾病的前瞻性研究中，循环血液中可溶性粘附分子表达量与疾病及其预后关系的数据是非常稀少的。ARIC和PHS关于健康人群的前瞻性试验中发现循环血液中可溶性粘附分子中仅仅只有ICAM-1与冠心病的发病存在着关联[10-12]。ICAM-1不仅仅只有血管内皮细胞会表达，同样许多其他细胞如造血干细胞、成纤维细胞等都会表达ICAM-1。另外许多研究表明循环血液中ICAM-1的表达量与CRP存在着正相关，ICAM-1与CRP都能够预测冠心病的发病，循环血液中ICAM-1的表达量仅仅反映了血管的促炎状态[13，14]。这与我们的研究结果是一致的，ACS患者循环血液中ICAM-1表达量显著高于对照人群，但是在校正其他相关因素后ICAM-1与ACS患者MACCE预后不存在关联。另外，有研究在动物及人类器官模型中证实VCAM-1表达量在机体促炎等基线状态下是无差异的，但是在促动脉粥样硬化状态下显著增加[5，6]。这同样与我们的研究结果一致，ACS患者循环血液中VCAM-1表达量显著高于对照人群，在校正其他相关因素后VCAM-1与ACS患者MACCE预后存在关联。这表明循环血液中VCAM-1表达量反映了动脉粥样硬化斑块的负荷，从而能作为预测MACCE事件的预后指标，但是却不能在健康人群检测其表达量来预测冠心病发病。

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