头颈部鳞状细胞癌组织中有丝分裂阻滞缺陷蛋白2的表达变化

张 峰，王 丹

(聊城市第二人民医院，山东临清252600)

研究［1］发现，几乎在所有人类肿瘤中能发现非整倍体肿瘤细胞，它与大多数肿瘤的发生、进展有密切关系，这种非整倍体状态称为染色体不稳定性。在正常染色体分裂中，有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(MAD2)能确保纺锤体微管与染色体动粒准确连接，是有丝分裂检查点调控的重要基因之一，能确保染色体正常分离，如果MAD2表达异常，会导致染色体异常分离，形成非整数倍体，导致肿瘤的发生或进展［2］。目前在多种肿瘤中研究发现MAD2表达异常下调［3～6］。本研究利用免疫组化SP法对头颈部鳞状细胞癌肿瘤组织中的MAD2进行了检测，观察其表达变化，并探讨其意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2009年1月～2011年1月聊城市第二人民医院收治的头颈部鳞状细胞癌患者101例，男59例，女42例;年龄28～61岁。肿瘤位于颌下区8例、颈前区21例、颈动脉鞘区18例、鼻咽部43例、颈背部11例。病理检查证实为鳞状细胞癌;临床分期为T1期62例、T2期29例、T3期6例、T4期4例;有淋巴结转移者58例。手术切除肿瘤组织、距离肿瘤边界1 cm的正常肌肉组织作为肿瘤旁组织。选择同期头颈部组织活检正常的患者49例(男28例、女21例，年龄26～63岁)，取其头颈部肌肉组织作对照。

1.2 MAD2检测方法 采用免疫组化SP法检测MAD2，检测试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。上述各组织标本用10%甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片，常规HE染色观察(肿瘤组织切片选取实性组织部分制作组织芯片，保证用于免疫组化染色的切片肿瘤细胞数＞70%)，然后常规脱蜡、梯度酒精入水、免疫组化染色。染色完成后24 h内在光镜下阅片，光镜下选取10个视野，MAD2定位于细胞核和(或)细胞质，呈棕黄色均匀细颗粒。阳性细胞百分比＜5%为阴性、≥5%为阳性。

1.3 统计学方法 采用SPSS14.0统计学软件。计数资料比较用χ2检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

肿瘤组织、肿瘤旁肌肉组织、正常头颈部肌肉组织中MAD2的阳性表达率分别为90.1%(91/101)、53.5%(54/101)、46.9%(23/49);前者与后两者相比，P 均 ＜0.05;后两者相比，P ＞0.05。有、无淋巴结转移的头颈部鳞状细胞癌患者肿瘤组织中MAD2阳性表达率分别为 98.3%(57/58)、81.4%(35/43)，两者相比，P ＜0.05。

3 讨论

细胞分裂是活细胞繁殖的基本过程，其中染色体正常分离是其中最重要的一个环节，分离过程是在多个检查点共同监控下完成的，此监控系统能有效识别纺锤体微管与染色体动粒的连接，从而确保整个过程正常有序［7］。MAD2是监控系统中检查点的重要成分，MAD2异常表达会导致酸化和去磷酸化调节机制失常，从而引起细胞有丝分裂的阻滞，最终使细胞形成多倍体，而多倍体细胞往往会导致肿瘤的发生［8］。目前已在卵巢癌、肝癌、鼻咽癌、前列腺癌等肿瘤中发现MAD2呈异常表达［9］。

有学者［10］认为MAD2的表达不同于其他癌症基因或抑癌基因，其表达并非只会高或低，而是在不同肿瘤或肿瘤发展的不同阶段表现为过高或过低，这两种情况均会导致染色体分离异常。本研究结果显示，头颈部鳞状细胞癌患者的肿瘤组织、肿瘤旁组织及正常头颈部肌肉组织中MAD2的阳性表达率逐渐下降，肿瘤组织中MAD2呈异常高表达，未发现有低表达者。有研究［11］发现，MAD2与胃黏膜病变密切相关，随着病情加重MAD2的表达水平增高，其中胃癌组织中MAD2的表达水平明显高于胃不典型增生组织，这一结果与本研究结果类似。

此外，本研究还发现，有淋巴结转移的头颈部鳞状细胞癌患者的肿瘤组织中MAD2阳性表达率明显高于无淋巴结转移者，说明MAD2能在一定程度上反映肿瘤的侵袭情况，对头颈部鳞状细胞癌的进展评估有一定参考价值。有研究［12］发现，在胃癌、卵巢癌组织中MAD2的表达与肿瘤分化也有密切关系。这可能是MAD2异常导致检查点缺损，其异常表达越明显，产生的非整倍体细胞就会越多，周围环境变化使非整倍体细胞逃避了凋亡，从而演变出更具侵袭性的恶性肿瘤细胞［13］，但目前尚无直接证据，需进一步研究证实。

本研究对所有患者随访3年发现，术后生存周期为1 a及2 a者其肿瘤组织中MAD2表达阳性率高于3 a者，说明MAD2与肿瘤治疗预后可能有一定关联，是否可作为预后评估参考指标还有待于进一步研究。

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