高尔基体糖蛋白73在58例肝癌患者诊断中的应用

王志茹　刘庆波　赵文静

[摘要] 目的 探讨GP73对原发性肝癌的诊断价值。方法 免疫组化法检测肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中高尔基体糖蛋白73（golgiprotein-73，GP73）和甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）的表达，ELISA法检测肝癌患者血清GP73和AFP浓度。结果 GP73蛋白在肝癌组织强表达，癌旁组织细胞浆表达较弱，正常肝脏组织无表达，58例肝癌组织中GP73阳性为55例，AFP阳性为40例，两者诊断肝癌的阳性率差异有统计学意义（P<0.05）；58例PHC患者GP73平均浓度为（238.1±121.6）ng/mL，42例GP73阳性，敏感性为72.4%；AFP平均浓度为（885.6±498.6） ng/mL，30例AFP阳性，敏感性为51.7%，GP73和AFP联合检测能将敏感性提高到85.9%（50/58）；PHC患者肿瘤大小之间、肿瘤个数之间血清GP73浓度无确切关系。结论 GP73是一个诊断PHC良好的血清标志物，其敏感性和特异性均较好，GP73和AFP联合检测可以提高早期肝癌的检出率。

[关键词] 高尔基体糖蛋白73；甲胎蛋白；原发性肝癌

[中图分类号] R735.7 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2014）10-125-04

[Abstract] Objective To evaluate the diagnostic value of golgiprotein 73 for primary liver cancer. Methods The immunohistochemical method was used to detect the expression of golgiprotein 73（GP73） and alpha-fetoprotein（AFP） in liver cancer tissue， para-cancer tissue and normal liver tissue. The ELISA method was used to detect the serum GP73 and AFP concentrations in the patients with liver cancer. Results GP73 had strong expression in liver cancer tissue， weak expression in cytoplasma of para-cancer tissue and no expression in normal liver tissue. Of the 58 cases of liver cancer tissue， 55 cases were positive GP73 expression and 40 cases were positive AFP expression， with statistically significant difference in the positive rate of liver cancer diagnosis between the two indicators（P<0.05）； The average GP73 concentration of 58 PHC patients was （238.1±121.6）ng/mL， of which 42 patients had positive GP73 expression， with the sensibility of 72.4%； The average AFP concentration was （885.6±498.6）ng/mL， of which 30 patients had positive AFP expression， with the sensibility of 51.7%. Combined GP73 and AFP detection can increase the sensibility to 85.9%（50/58）. The serum GP73 concentrations between the PHC patients with different tumor sizes and tumor numbers did not have accurate relationship. Conclusion GP73 is a good serum marker for the diagnosis of PHC and it has good sensibility and specificity. Combined GP73 and AFP detection can improve the detection rate of early liver cancer.

[Key words] Golgiprotein 73；Alpha-fetoprotein；Primary liver cancer

原发性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是临床上常见的恶性肿瘤。2011年《全球癌症统计》显示PHC的发病率居恶性肿瘤第5位，死亡率居第2位[1]。另有报道显示我国为PHC高发区，发病人数和死亡人数约占全球总数的55%以上[2]。PHC具有起病隐匿、恶性度高、进展快、转移早等临床特点，多数患者在病程早期多无临床症状，约70%～80%患者发现时已为肿瘤晚期，无法进行有效的根治治疗，而且PHC患者术后复发率高，预后差，生存期短，因此肝癌的早期诊断尤为重要[3]。1.1 标本来源和处理

肝癌组组、癌旁组织取自2012年1～12月吉林肝胆病医院收治的原发性肝癌手术切除的标本，其中男47例，女11例，年龄32～75岁，平均54岁，患者均经临床、影像学诊断符合《内科学》第12版中原发性肝癌的诊断标准[4]，术前均未接受过任何抗肿瘤治疗，术后病理证实为肝细胞癌。肝癌组织标本取自手术切除的无坏死癌组织，距癌组织标本取自大于2cm处无癌细胞浸润的癌旁组织，采用10%中性福尔马林固定，常规脱水，包埋，制备病理组织切片。

正常肝组织标本由同期住院的肝血管瘤患者活检获得，其中男12例，女8例，年龄21～36岁，平均26岁，均经病理证实。

52例对照组血清来自于吉林大学第一临床医院2012年7月收集的健康体检者，其中男28例，女24例，年龄23～45岁。

1.2 试剂和方法

1.2.1 试剂 GP73蛋白双抗体夹心ELISA检测试剂盒和鼠抗人GP73蛋白单克隆抗体购自北京热景生物技术有限公司；鼠抗人AFP单克隆抗体和SP染色试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司；AFP电化学检测试剂为Cobas601配套试剂盒，瑞士Roche公司。

1.2.2 肝癌组织、癌旁组织和正常肝组织GP73和AFP检测

3 讨论

目前PHC的诊断主要根据影像学、血清AFP浓度和病理学检查。文献报道PHC患者血清AFP检测敏感度仅为40%～65%，特异性为76%～96%，在临床上有近1/3的PHC患者血清AFP阴性[6]，因此寻找一种敏感性更高、特异性更强的肝癌血清标志物一直是研究的热点。GP73是存在于高尔基体的一种跨膜蛋白，是新近发现的与肝癌关系密切的糖蛋白，大量研究表明GP73敏感度和特异度均超过AFP，GP73已成为新的早期诊断肝癌的标志物[7]。本研究首先采用免疫组化方法检测肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中GP73和AFP的表达，研究结果显示：正常肝脏组织中GP73和AFP为阴性，58例PHC患者肝癌组织和癌旁组织GP73阳性率分别为95.4%和89.1%，显著高于AFP的阳性表达率（70.2%和51.8%）。实验结果表明，对于PHC患者，GP73蛋白是一种有意义的组织病理标记蛋白，与文献报道结果一致[8-10]。

本研究采用ELISA法检测PHC患者血清GP73和AFP浓度，研究结果显示GP73具有较好的敏感性和特异性，与本组病例中AFP检测结果比较，GP73的敏感度高达72.4%，明显高于AFP的敏感性。GP73和AFP联合检测可以将敏感性提高到85.9%，特异性仍可保持在87.1%这样一个较高的水平，结果显示GP73和AFP联合检测具有互补性，可以明显提高早期肝癌的检出率。为进一步确认血清GP73蛋白含量与PHC患者肿瘤大小、结节数量的相关性，我们对58例PHC患者进行了统计和观察，研究结果表明血清GP73蛋白含量与PHC患者肿瘤大小、结节数量之间无确切关系，与其他学者研究结果一致[11-12]。

综上所述，GP73是一个诊断PHC良好的血清标志物，其敏感性和特异性均较好。而且GP73和AFP联合检测可以提高早期肝癌的检出率。

[参考文献]

[1] Jemal A，Bray F，Center MM，et al.Global cancer statistics[J].CA Cancer J Clin，2011，61（2）：69-90.

[2] Peipei Song，Xiaobin Feng，Keming Zhang，et al.Screening for and surveillance of high-risk patients with HBV-related chronic liver disease： Promoting the early detection of hepatocellular carcinoma in China[J].BioScience Trends，2013，7（1）：1-6.

[3] Kwong-Ming Kee，Sheng-Nan Lu.Hospital and community-based screenings for hepatocellular carcinomain Taiwan[J].Oncology，2011，81：36-40.

[4] 粱丽，范恒，唐庆，等.慢性乙型病毒性肝炎病毒复制与肝癌的相关性研究[J].中西医结合研究，2011，12（3）：57-61.

[5] 翁彭剑，高国生，鲁姣英.检测血清GP73 对PHC诊断价值的探讨[J].中国卫生检验杂志，2011，21（8）：1971-1973.

[6] 徐海峰，杨华瑜，张宏冰.改变肝癌早期诊断和治疗现状的新肝癌血清标志物[J].基础医学与临床，2008，28：104-108.

[7] Willyard C.Researchers look for “sweet” method to diagnose cancer[J].Nat Med，2007，13（11）：1267.

[8] Mao YL，Yang HY，Xu HF，et al.Significance of Golgi glycoprotein 73，a new tumor marker in diagnosis of hepatocellular carcinoma： a primary study[J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi，2008，88（14）：948-951.

[9] 许桂林，荣光华，王森平，等.肿瘤标志物联合检测对原发性肝癌早期诊断的价值研究[J].人民军医，2013，56 （2）：187-188.

[10] 李文伟，马骢，王珍光，等.肝癌与肝炎标志物及相关肿瘤标志物的相关性分析[J].实用癌症杂志，2010，25（5）：495-496.

[11] 张祖平，张德忠，吴耀震.血清GP73联合AFP对PHC的早期诊断价值探讨[J].放射免疫学杂志，2010，23（2）：205-206.

[12] 王维林，白鑫，屠红.肝癌血清标志物研究的新进展[J].肿瘤，2009，29（4）：390-393.

（收稿日期：2014-03-19）