TNF-α-308位点多态性与肺癌易感性关系的Meta分析

何 杰 李小燕 曹 源 杨 黎 周夏飞

TNF-α-308位点多态性与肺癌易感性关系的Meta分析

何 杰 李小燕 曹 源 杨 黎 周夏飞

目的系统评价TNF-α-308多态性与肺癌发病风险的相关性。方法计算机检索PubMed、EMbase、WanFang、CNKI，查找国内外关于TNF-α-308多态性与肺癌易感性关系的病例对照研究，检索时限为建库至2014年2月20日。由2名评价者根据纳入与排除标准筛选文献，提取并评价资料后，采用RevMan 4.2软件及Stata 10.0软件进行Mete分析。结果最终纳入13个研究，其中包括病例组患者1904例，对照组正常人1699例，经异质性检验，各研究间无统计学异质性(P>0.1)固定效应模型Meta分析结果显示：对于总体人群而言，TNF-α-308与肺癌易感性关联有统计学意义(OR=1.74, 95%CI：1.17～2.57，P=0.006)。在研究人群种族基础上进行亚组分析显示：在高加索人群中，TNF-α-308与肺癌易感性关联无统计学意义(OR=0.97，95%CI：0.56～1.66，P=0.91)；在亚洲人群中，TNF-α-308与肺癌易感性关联有统计学意义(OR=3.08，95%CI：1.51～6.26，P=0.002)。结论在亚洲人群中，TNF-α-308位点可能是增加肺癌患病风险的危险因素，在高加索人群中，TNF-α-308多态性与肺癌的发病风险不存在相关性。

支气管肺癌； 肿瘤坏死因子-α； 基因多态性； Meta分析

肺癌是当今临床上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和病死率位居恶性肿瘤之首，也是癌症相关死亡的首要原因, 其5年生存率仅在15%左右，约2/3患者在就诊时处于中晚期[1]。据报道全世界新发病例数以每年大约3%速率增长，对人类健康和生命造成了巨大的威胁[2-3]。肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)是由巨噬细胞β单核细胞活化产生的一种具有多种生物学效应的细胞因子，在细胞免疫、炎症反应以及肿瘤免疫等众多生理、病理过程中起着重要作用[4]。TNF-α基因多态性可影响TNF的分泌，并可调节转录水平[5]。TNF-α基因多态性与肺癌、肝癌等恶性肿瘤的发生有着密切关系，且对其预后有重要影响[6-8]。TNF-α-308(G>A)曾在以往的研究报道中被提示这个位点可能与肺癌的易感性有关，但TNF-α基因与肺癌关系的研究在不同人群种族、性别、年龄等因素下得到的结论不尽一致。Colakogullari等[9]认为TNF-α-308AA基因型的人群肺癌的易感性高于TNF-α-308GG基因型人群，TNF-α-308位点可能是增加肺癌患病风险的危险因素。但Flego等[10]认为TNF-α-308位点多态性与高加索人群肺癌易感性无明确统计学关联。TNF-α-308位点多态性有AA基因型、AG基因型、GG基因型，为了更好地评价TNF-α-308位点多态性与肺癌易感性的关系，本研究采用Meta分析法，综合评价TNF-α-308位点是否与肺癌的发病风险相关。

资料与方法

一、检索策略

计算机检索Pubmed、CNKI 、维普、万方和CBM数据库，检索年限从1990至2014年2月，并追查了所有纳入搜索文献的参考文献。对纳入研究的参考文献作进一步检索以补充相关资料。全面收集有关TNF-α在治疗肺癌方面的相关病例对照研究文献，文献检索策略采用主题词和自由词结合的原则，中文检索词包括：肺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肿瘤坏死基因、TNF-α、多态性等，英文检索词包括： lung caner、non-small cell lung cancer、small cell lung cancer、tumor necrosis factor-alpha、TNF-α、polymorphism等。

二、纳入与排除标准

1. 文献纳入标准：①文献要求：有关TNF-α治疗肺癌的相关病例-对照研究并有具体的基因类型；②研究对象：经临床以及病理组织学均证实为肺癌的患者；③纳入研究样本量大于30例；④纳入所有研究TNF-α与其它细胞因子的对照及治疗效果资料。

2. 文献排除标准：①非病例对照研究；②文摘、综述、会议论文、学位论文、述评及讲座；③重复发表的文献。

三、文献筛选、数据提取与质量评价

由二位研究者分别独立提取文献信息，如遇分歧讨论解决，提取内容包括：作者、发表时间、国家、研究机构、病例数、实验方法、病例组和对照组各基因型的数量等。对每个纳入研究按照STERGA原则对纳入文献进行评价[11]。评价内容如下：①样本量是否充分；②诊断标准是否清楚；③对照组是否与病例组具有可比性，对照组基因分布是否符合遗传平衡定律；④分组匹配情况；⑤基因检测方法合理性；⑥数据是否充分。以上6条，每满足1条计1分，总分大于3分视为质量可靠性好。

四、统计学方法

采用Cochrane 协助网RevMan 4.2版本软件进行统计学分析，采用OR值与95%CI为效应量评价TNF-α-308多态性与肺癌易感性的关系。因TNF-α-308AA基因型基因频率相对较少，为比较AA基因型个体肺癌易感性，故对AAvs. AG+GG进行合并分析，采取Q检验进行异质性分析，若P>0.1且I2<50%，采用固定效应模型进行Meta分析；反之，采用随机效应模型进行Meta分析。发表偏移的检验采用Stata10.0软件进行分析。

结 果

一、文献检索结果

初步检索到相关文献288篇，经过逐步筛选删除，最后纳入13篇病例-对照研究[8-9,11-21]。其中关于高加索人种报道6篇，亚洲人种报道6篇，非洲人种报道1篇。所有研究中肺癌患者1904例，健康对照1699例。依据STERGA原则对纳入文献质量进行评价，所有纳入文献总分均大于3分，质量可靠性较好，各纳入研究的基本情况特征，见表1；各纳入研究的基因频率分布情况及质量评分，见表2。

二、 Meta分析结果

1. 总体人群中TNF-α-308多态性与肺癌关系的Meta分析: 本组纳入的13项研究中，经异质性检验，各个研究间无统计学异质性(χ2=15.7，P=0.11，I2=36.3%)，固定效应模型分析结果显示，对于总体人群而言，TNF-α-308与肺癌易感性关联有统计学意义(AAvs. AG+GG：OR=1.74，95%CI：1.17～2.57，P=0.006),携带等位基因A的个体可能增加肺癌的危险性，见图1。各个基因组比较结果详，见表3。

表1 纳入研究的基本特征

注：AA：AA基因型；AG：AG基因型；GG：GG基因型

表2 纳入研究基因型频率分布及质量评分

表3 各种遗传模型的Meta分析结果

注：Pa<0.00001；AA：AA基因型；AG：AG基因型；GG：GG基因型

2. TNF-α-308多态性与不同人群肺癌关系的Meta分析结果: 对13项研究分为亚洲人群、高加索人群、非洲人群3个亚组分布进行分析，检测其异质性。在高加索人群的6项研究中，经异质性检验，各个研究间不存在统计学异质性(χ2=6.17，P=0.29，I2=18.9%)，固定效应模型分析结果显示，对于高加索人群而言，TNF-α-308与肺癌易感性关联无统计学意义(AAvs. AG+GG：OR=0.97，95%CI：0.56～1.66，P=0.91)，见图1。

在亚洲人群的6项研究中，经异质性检验，各个研究间不存在统计学异质性(χ2=3.87，P=0.28，I2=22.4%)，固定效应模型分析结果显示，对于亚洲人群而言，TNF-α-308与肺癌易感性关联有统计学意义(AAvs. AG+GG：OR=3.08，95%CI：1.51～6.26，P=0.002)，见图1。在亚洲人群中，携带等位基因A的个体可能增加肺癌的危险性。关于非洲人群的研究只有一篇报道，无法进行比较，故未纳入亚组分析。

图1 TNF-α-308位点多态性与肺癌易感性关系的总体及亚组分析结果(AA vs. AG+GG)

三、发表偏倚分析及敏感性分析

发表偏倚是指有统计学意义的研究结果比较容易发表，若存在发表偏倚，则需要进一步收集相关资料进行分析。本研究采用Egger′s线性回归法分析，结果提示，研究结果不存在发表偏倚(t=-0.38，P=0.718)，见图2。将各项研究报道逐一删除进行敏感性分析，其结果表明纳入的各项研究权重均对总体分析结果及亚组分析结果无明显影响。

图2 纳入文献的发表偏倚分析

讨 论

TNF-α基因位于人染色体的6p21.3上，其编码的蛋白在调节体内免疫、炎症反应中发挥着重要作用，与肺癌的预后有着密切关系[10]。已有研究表明TNF-α的含量在肺癌患者体内明显升高，但是TNF-α对于肿瘤的发生、转移等是有促进作用还是抑制作用，目前尚无定论[12]。多数研究表明，TNF-α-308多态性位点参与了TNF-α的表达调控，A等位基因型TNF-α的表达高于G等位基因型[13-16]。Kaabachi等[17]研究表明，在其所研究的人群中，TNF-α-308AA基因型的人群对肺癌的易感性高于TNF-α-308GG基因型人群，说明携带A等位基因可能是肺癌的高发性因素。为获得更加可靠地循证医学证据，本研究采用Meta分析的方法对已有的研究进行了综合分析。

本研究系统评价了TNF-α-308多态性与肺癌易感性的相关病例对照研究。最终，共有13篇研究被纳入，其中包括1904例肺癌患者和1699例健康正常人。Meta分析结果显示，对于总体人群而言，TNF-α-308与肺癌易感性关联有统计学意义。在研究人群种族基础上进行亚组分析显示：在高加索人群中，TNF-α-308与肺癌易感性关联无统计学意义；在亚洲人群中，TNF-α-308与肺癌易感性关联有统计学意义，因研究非洲人群文献数目较少，未纳入亚组分析。造成这种原因可能为：①TNF-α-308位点的等位基因和基因型的分布在不同人群中是不同的，AA基因型在高加索人群中基因频率较低；②不同的人群有着不同的连锁不平衡模式；③与临床异质性，如：年龄、环境、性别、吸烟情况、肿瘤类型、肿瘤分期等因素相关。将各项研究报道逐一剃除进行敏感性分析，其结果表明纳入的各项研究权重均对总体分析结果及亚组分析结果无明显影响。

目前已有大量关于肺癌发生、发展的基础和临床研究，均表明肺癌的发病风险和遗传紧密相关。已有大量肺癌的候选基因被发现，如IL-10，TNF-β等[18-22]。在本研究中，由于纳入文献中未提及基因与基因相互作用及关系，因此，本研究未对基因与基因相关性进行深入研究。

本研究具有一定局限性，首先，虽然通过全面收集和评价各个研究数据，部分有价值的指标仍无法得到进一步计算以阐明TNF-α-308多态性与肺癌易感性的具体关联；其次由于原始数据不完整或样本量太小，部分研究不符合纳入标准，无法纳入本研究；再次，由于部分研究数据不完整，未根据年龄、性别、吸烟情况等将数据进行亚组分析。

在中国人群中TNF-α-308多态性与肺癌的发病风险存在相关性，在高加索人群中TNF-α-308多态性与肺癌的发病风险不存在相关性。为了达到更确切的结论，还需要开展大样本量、多中心、多基因、以及同质性较好(如同地域、种族等)的病例对照研究，并希望更多研究关注其他种族如非洲、拉丁美洲等人群。

1 李 羲, 钱桂生. 肺癌临床的罕见表现[J/CD]. 中华肺部疾病杂志： 电子版, 2013, 6(1): 4-7.

2 Jemal A, Sieg el R, Xu J, et al. Cancer statistics, 2010[J]. CA Cancer J Clin, 2010, 60(5): 277-300.

3 王冬梅, 李万民, 李 静,等. 吸烟与肺癌关系的Meta分析[J]. 中国呼吸与危重监护杂志, 2009, 8(3): 229-233.

4 Ghavami S, Eshraghi M, Kadkhoda K, et al. Role of BNIP3 in TNF-induced cell death-TNF upregulates BNIP3 expression [J]. Biochim Biophys Acta, 2009, 1793(3): 546-560.

5 Kroeger KM, Carville KS, Abraham LJ. The -308 tumor necrosis factor-alpha promoter polymorphism effects transcription [J]. Mol Immunol, 1997, 34(5): 391-399.

6 Gadducci A, Ferdeghini M, Castellani C, et al. Serum levels of tumor necrosis factor (TNF), soluble receptors for TNF (55- and 75-kDa sTNFr), and soluble CD14 (sCD14) in epithelial ovarian cancer[J].Gynecol Oncol, 1995, 58(2): 184-188.

7 Partanen R, Koskinen H, Hemminki K. Tumer necrosis factor-α in patients who have asbestosis and develop cancer [J]. Occup Environ Med, 1995, 52(5): 316-319.

8 Xu QX, Xu FZ, Liu C. significance of detection tumor necrosis factor alpha in patients with lung cancer[J]. Chin J Clin Oncol Rehabilit, 2002, 9: 38-39.

9 Colakogullari M, Ulukaya E, Yilmaztepe Oral A, et al. The involvement of IL-10, IL-6, IFN-gamma, TNF-alpha and TGF-beta gene polymorphisms among Turkish lung cancer patients [J]. Cell Biochem Funct, 2008, 26(3): 283-290.

10 Flego V, Radojci Badovinac A, Bulat-Kardum L, et al. Primary lung cancer and TNF-alpha gene polymorphisms: a case-control study in a Croatian population[J]. Med Sci Monit, 2009, 15(7): CR361-365.

11 陈晓雯, 李 玲, 杨声杰. PC-1 基因外显子4多态性与中国人2型糖尿病相关性的系统[J]. 中国循证医学杂志, 2013, 13(3): 308-312.

12 郭宇玲, 陈 丽, 刘 佳, 等. 肿瘤坏死因子基因多态性与非小细胞肺癌易感性的相关性研究[J]. 实用临床医学, 2013, 14(10): 1-3.

13 Flego V, Risti S, Devi Pavli S, et al. Tumor necrosis factor-alpha gene promoter-308 and-238 polymorphisms in patients with lung cancer as a second primary tumor[J]. Med Sci Monit, 2013, 19: 846-851.

14 郝旻罡, 王文静, 陆 晔, 等. TNF-α、IL-1β和IL-10启动子区基因多态性与肺癌发病易感性的关系研究[J]. 环境与职业医学, 2009, 26(1): 24-27.

15 Helmig S, Aliahmadi N, Schneider J. Tumour necrosis factor-alpha gene polymorphisms in asbestos-induced diseases[J]. Biomarkers, 2010, 15(5): 400-409.

16 黄韻祝, 毕 莹, 罗 鸣, 等. 肺鳞癌与肿瘤坏死因子α基因多态性的相关性研究[J]. 中华医学杂志, 2005, 85(15): 1064-1065.

17 Kaabachi S, Kaabachi W, Rafrafi A, et al. Tumor necrosis factor gene polymorphisms in Tunisian patients with non-small cell lung cancer[J]. Clin Lab, 2013, 59(11-12): 1389-1395.

18 李伟辉. 肿瘤坏死因子-α-308、-238和β+252基因多态性与肺癌遗传易感性[D]. 河南: 郑州大学, 2010.

19 Seifart C, Plagens A, Dempfle A, et al. TNF-alpha, TNF-beta, IL-6, and IL-10 polymorphisms in patients with lung cancer[J]. Dis Markers, 2005, 21(3): 157-165.

20 Shih CM, Lee YL, Chiou HL, et al. Association of TNF-alpha polymorphism with susceptibility to and severity of non-small cell lung cancer[J]. Lung Cancer, 2006, 52(1): 15-20.

21 Stankovic MM, Nestorovic AR, Tomovic AM, et al. TNF-alpha-308 promotor polymorphism in patients with chronic obstructive pulmonary disease and lung cancer[J]. Neoplasma, 2009, 56(4): 348-352.

22 汪长平, 马志明. TNF-α基因多态性与肺癌易感性相关性的研究[J]. 临床肺科杂志, 2009, 14(8): 1000-1002.

(本文编辑：王亚南)

何 杰，李小燕，曹 源，等. TNF-α-308位点多态性与肺癌易感性关系的Meta分析[J/CD]. 中华肺部疾病杂志： 电子版， 2014， 7(5)： 522-526.

TNF-α-308 polymorphism and risk of lung cancer : A Meta-analysis

HeJie,LiXiaoyan,CaoYuan,YangLi,ZhouXiafei

(DepartmentofRespiratoryMedicine，TheFirstAffiliatedHospitalofChengduMedicalCollege,Chengdu610500,China)

ZhouXiafei,Email:hejieli1987@sina.com

Objective To investigate the association between TNF-α-308 and the risk of lung cancer by meta-analysis. Methods The Embase, PubMed, CNKI, Wanfang databases were searched to identify domestic and foreign case-control studies concerning the association between TNF-α-308 polymorphism and risk of lung cancer (last updated to February 20th 2014). Two independent reviewers collected the data and reached a consensus on all items according to the inclusion and exclusion criteria, extracted data and assessed quality. Statistical analysis was performed by using Revman 4.2 software and Stata10.0 software. Results A total of 1904 cases and 1699 controls in thirteen case-control studies concerning TNF-α-308 polymorphism were included. According to the result if the heterogeneity test, we carried on the analysis by the fixed effect model or rondom effect model .The results suggested that TNF-α-308 polymorphism might be associated with risk of lung cancer (AA versus AG+GG:OR=1.74，95%CI：1.17～2.57,P=0.006) in total analysis. In the subgroup analysis by ethnicity, no statistically significant association was found in Caucasians (OR=0.97，95%CI：0.56～1.66，P=0.91 for AA versus AG+GG). However, there was a significant association between this polymorphism and lung cancer risk in Asians (OR=3.08, 95%CI：1.51～6.26,P=0.002 for AA versus AG+GG). Conclusion The current meta-analysis indicates the polymorphism of TNF-α-308 locus might be a risk factor for lung cancer in Asians.

Bronchogenic carcinoma; Tumor necrosis factor-α; Polymorphism; Meta-analysis

10.3877/cma.j.issn.1674-6902.2014.05.011

610500 四川，成都医学院第一附属医院呼吸内科

周夏飞，Email: hejieli1987@sina.com

R734.2，R563

A

2014-04-24)