临床标本的微生物检验方式研究

徐卫珍

临床标本的微生物检验方式研究

徐卫珍

目的 对临床标本的微生物检验方式进行总结分析。方法 以靖州县人民医院在2013年搜集的180株临床分离标本为例，其均为酵母样真菌，采用Rosco扩散法对其耐药性实施检测。结果 其中在以上各酵母样真菌检测其阳性率中，最高的为白色念珠菌为42.78%，其耐药性最高的为克霉唑。结论 在临床标本微生物检验中，其所采用的方法均为标本分离、菌种检定以及最后的药敏试验。

微生物；临床标本；检验方式

一般对临床标本的微生物检验方法程序即标本分离,菌种鉴定,药敏试验。特采取酵母样真菌来进行微生物的检验方法。近来年在临床和院内感染一般广泛使用广谱抗生素,皮质类固醇激素,免疫剂等药物[1],而酵母样真菌对临床危重患者感染概率明显上升,抗真菌药物治疗的准确和有效已经显得尤为重要。所以本文抽取了2013年临床分离的180株真菌采用Rosco纸片法来进行试验,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择靖州县人民医院2013年临床分离标本180株,送检标本中有着住院患者的不同检测标本。如,粪便,痰,血液等。患者都是以慢性感染疾病为主。

1.2 方法 在沙保弱琼脂培养基将细菌分离,用API20 CAUX鉴定到种[2]。药敏测试采用6种株菌：两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、酮康唑、制霉菌素和克霉唑都来自丹麦Rosco公司。采用Rosco纸片法,在生理盐水中放入单个菌落,将菌悬液调整到0.5左右,在改良的Shadomy平板上将菌悬液涂抹均与,等平板上的水分都晒干后,再将Rosco药敏纸片贴上,这时不要将平板翻转,直接把Rosco的药敏纸片放入35°培养箱孵育18～20h。

1.3 鉴定标准 药敏标准参照相关规定测试标准[3]。

1.4 统计学方法 采用统计学软件包SPSS20.0分析处理本研究的所有数据及资料,计量资料用构成比表示,组间比较采用χ2检验,P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 在临床送检的180株标本中,白色念珠菌检出率最高42.78%,克柔念珠菌5.56%,热带念珠菌20.56%,星形念珠菌14.44%,光滑念珠菌7.22%,近平滑念珠菌6.67%,其他念珠菌2.78%,其之间检出率比较差异具有统计学意义（P＜0.05,见表1）。

表1 180株念珠菌分布构成

2.2 酵母样真菌药敏实验（见表2）。

2.3 氟康唑,对49株临床分离酵母样真菌进行药敏实验用Rosco纸片法,符合率为88.9%,敏感性为82%。

3 讨论

临床标本微生物检验阳性率低,使得医生对疾病的诊断和治疗水平也在降低。其主要原因如下：随着近年来医院临床检验技术的发展,临床检验的自动化使得临床疗效降低,其中临床标本微生物的阳性率降低。临床中标本微生物检验也大都是运用微机、微量化、自动化以及分子生物学的方式来进行检验工作的,同时检验的结果也将成为疾病的临床诊断和治疗的重要依据和方法。对临床中标本微生物检验结果的阳性率研究中,微生物检查结果在临床治疗中具有重要的意义。微生物标本检查可以使医生准确诊断出患者的疾病,并且医生还可以根据微生物检验结果来及时的制定相应的治疗对策,并结合患者临床的症状变化,合理的使用抗菌药物,减少因为抗菌药物使用不当而造成患者病情的加重,从而为患者制定合理的治疗方案,提高患者的疾病治愈率,因此可以说临床标本微生物检验在患者疾病治疗中,具有重要意义。

酵母样真菌外观似酵母型菌落,但在菌落表面除有生芽细胞外还有伸长的生芽细胞所形成的假菌丝伸入培养基内,如念珠菌。对它常规的鉴定方法有三种：(1)首先种玉米培养基和沙保若氏,观察菌落特点在沙保若氏,观察生长特点在玉米培养基上。(2)鉴定常见的4种酵母样真菌在培植科玛嘉上,根据显色不同来鉴定。(3)鉴别常见的酵母样真菌使用简单的发酵试验。而在临床上,酵母样真菌对引起全身性多脏器,多系统感染,严重会引发死亡[4]。医院感染一般都是由真菌引起,它最大的表现就在于感染率增多。不再局限感染的菌种,耐药性也有不同程度的提高。根据国内外的报告,白色念珠菌感染情况已经有所下降,较往常相比,有所提高的则是热带念珠菌和近平滑念珠菌等[5]。

酵母样真菌由于不同特性,它的耐药性也有所不同,对49株临床分离酵母样真菌进行药敏实验其中氟康唑用Rosco纸片法,符合率为88.9%,敏感性为82%。很高的耐药性也存在于其他酵母样真菌中。不同的抗真菌药物在临床上有不同的耐药性,为了使抗真菌药物运用更加合理,特采用了Rosco纸片法,它的经济,便于观察,结果重复性好[6]。不需特殊的培训是Rosco纸片法检验方法最大的优点。它适用各个微生物实验室。

综上所述：在临床中对微生物标本进行阳性率检验,不仅能提高临床中对患者的诊断率,还可以将此信息作为诊断的依据,减少临床治疗中的误诊、漏诊的发生。还可以通过临床中不同微生物标本的阳性率检验,寻找患者病菌感染的原因,为疾病在临床的诊断中提供客观依据[7]。因此,应该认真分析临床中不同年度的微生物标本检验的阳性率,不仅为医院中临床微生物检测提供有价值的信息,还能提高医生检验和诊断感染性疾病的水平,也对患者疾病的治疗提供有效的帮助[8]。其中在不同临床标本微生物检验中,虽然其不同的生长与生化特点是不同病原菌的存在方式,尽管各种微生物的有千差万别的特性,但它们之间的检测方法是一致的,都要经过三个步骤,即标本分离,菌种鉴定,药敏试验,而本文中的Rosco纸片法可作为真菌药敏的常规方法推行使用。

表2 6种临床临床常见酵母样真菌的耐药率

[1] 刁菁,杨秀生,李天保,等.病原微生物药敏检测方法的研究进展[J].中国农学通报,2013,29(8):1-5.

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[3] 杨安芳.微生物检验泌尿系统的病原菌结果研究[J].中国医药导刊,2014,1(2):325-327.

[4] 段晓丹.常见临床标本的微生物检验程序[J].按摩与康复医学（下旬刊），2012，3（10）：151-152.

[5] 于路妹.临床常用微生物学检查标本常见细菌、真菌及其临床意义[J].健康之路,2013,12(2):249-250.

[6] 杨柳,郭清莲,申及,等.回顾性分析比较不同临床标本微生物检验的阳性率[J].国际检验医学杂志,2011,32(14):1573-1574.

[7] 张新秀.微生物检验在临床应用中的质量控制[J].临床和实验医学杂志,2011,10(5):396-397.

[8] 张卓然,高鹏,李琳,等.微生物非培养鉴定技术在临床标本检查中的应用研究[J].微生物学杂志,2009,29(3):18-24.

10.3969/j.issn.1009-4393.2014.25.008

湖南 418400 靖州县人民医院检验科（徐卫珍）