唇香草多糖超声提取工艺研究

吴燕妮， 郭玉婷， 耿 直， 兰 卫

(1新疆名医名方与特色方剂学自治区重点实验室， 2新疆医科大学对口协作办公室， 乌鲁木齐 830011)

维吾尔药唇香草(ZiziphoraclinopodioidesLam.)为唇形科新塔花属多年生半灌木草本植物唇香草的干燥地上部分，维吾尔族名字为苏则[1]。唇香草为维吾尔族民间常用药材，具有提高免疫力的作用。为了更好地使用唇香草，本研究以唇香草多糖含量为检测指标,用苯酚-硫酸法进行含量测定,考察料液比(g/mL) 、提取温度(℃)、超声时间(m)三因素,探讨超声提取条件下提取多糖的最佳工艺条件。

1 仪器与试剂

透析袋(MWCO:500) (上海绿岛科技发展有限公司)，UV-2550紫外光谱仪(日本岛津)、EYELA SB-1000型旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司)等。葡萄糖标准品、蒽酮、硫酸等均为分析纯，蒸馏水。唇香草(购买自新疆医科大学附属中医院中药房)经新疆医科大学药学院王新玲副教授鉴定为唇形科植物唇香草(ZiziphorabungeanaJuz.)的干燥地上部分。

2 方法与结果

2.1葡萄糖对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品101.9 mg置于100 mL的容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，精密吸取1 mL至10 mL容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，即得浓度为0.1 mg/mL的葡萄糖对照品溶液。

2.2蒽酮试剂的制备准确称取0.1 g蒽酮溶于100 mL 72%硫酸中(需当天配制)[2]

2.3标准曲线的制作用微量吸取器分别吸取葡萄糖对照品溶液0.3、0.5、0.7、0.9 、1.1、1.3、1.5 mL分别置于10 mL具塞试管中，均用蒸馏水补充至2.0 mL。空白管加入2.0 mL蒸馏水做对照,各管中加入6 mL硫酸-蒽酮溶液摇匀，沸水浴中加热10 min，后冷却至室温。620 nm处测定吸光值。标准曲线的回归方程为:A=10.783C+0.007 9,r=0.999 8，样品检测量在3.82～19.10 μg/mL 范围内与吸光度线性关系良好。

2.4正交试验参照文献[2-3]，根据单因素预试验结果，选择超声温度、超声时间及料液比为参考因素，以唇香草多糖的提取率为指标，采用L9(33)正交试验设计(表1)，对唇香草中多糖的提取条件进行优化(表2)，方差分析见表3。

表1 因素水平

表2 正交实验设计及数据处理表

以唇香草多糖的提取率为考察指标，由表2的R值可以看出，各因素对试验结果影响的大小顺序为B>C>A；其中，B因素和C因素，各因素之间具有统计学差异(P<0.05)。A因素，各因素间无统计学差异(P>0.05)，从节约溶剂考虑，选择A1，从极差和方差分析的结果可以看出，最佳提取工艺条件为A1B2C2。

表3 方差分析表

2.5常规提取结果取唇香草药材5.0g，粉碎，按料液比1:30，加入蒸馏水，回流提取2次，每次1.0 h，合并提取液，浓缩，经含量测定，唇香草总多糖含量为6.36%。

2.6验证性试验根据2.4的分析结果，依照提取工艺A1B2C2进行提取试验，唇香草样品平行提取5次，试验结果精密度良好(表4)。

表4 重现性试验结果

3 结论

为了更科学合理利用唇香草资源，本研究以唇香草多糖含量为检测指标，考察料液比(g/mL) 、提取温度(℃ )、超声时间( m)三因素, 确定超声提取条件下提取多糖的最佳工艺条件，超声法提取唇香草多糖具有高效、方便特点。唇香草多糖超声提取法与常规提取法相比，提取效率提高了17.9%。

参考文献：

[1] 刘勇民, 沙吾提·伊克木. 维吾尔药志(上册)[M].乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社，1999:446-451.

[2] 勾建刚,刘春红.白茅根多糖超声提取的优化[J].时珍国医国药，2007，18(11)：2749-2750.

[3] 任雪峰，吴冬青，王永生，等.人参果多糖超声提取工艺的研究[J].食品研究与开发，2010,31(1):9-11.