MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表达及其与肺癌转移和预后关系的研究

王红民 张小红

MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表达及其与肺癌转移和预后关系的研究

王红民 张小红

目的 探讨基质金属蛋白酶 -2(MMP-2)和基质金属蛋白酶 -9(MMP-9)在肺癌中的表达水平及其与肺癌转移、肺癌预后的相关联系。方法 对 80 例非小细胞肺癌患者和 20 例肺良性病变患者进行 LSAB 法检测其 MMP-2 和 MMP-9 的表达水平 , 并检测其在腺癌、鳞癌和腺鳞混合癌中的表达水平以及在不同分化程度肿瘤中的表达水平 , 将检测的数据进行对比 , 分析 MMP-2 和 MMP-9 的表达水平与肺癌转移和预后的相关联系。结果 MMP-2、MMP-9 在鳞癌中的表达水平最高 , 而表达水平较低的腺癌和腺鳞混合癌之间差异不大 , MMP-2 与 MMP-9 在不同分化程度的肿瘤中表达水平差异不大 , MMP-2、MMP-9 在肺癌预后方面的表达水平差异具有统计学意义 (P＜0.05)。结论 MMP-2 与 MMP-3 在肺癌中的表达水平与肺癌的转移有密切的关系 , 同时可能成为检测肺癌预后的重要指标。

基质金属蛋白酶 -2 ；基质金属蛋白酶 -9 ；肺癌的转移 ；预后

肺癌是常见的恶性肿瘤之一［1］。是具有发病率高和死亡率增长快的癌症疾病 , 严重的威胁着人们的健康和生命［2］。目前对于肺癌的治疗疗效不明显 , 主要原因是肺癌具有癌瘤侵袭和转移等特点 , 同时发病过程中往往有伴随症的发生 ,作者对于发病以及癌瘤转移的根本了解不深刻 , 所以治疗难以起到疗效。本次研究就本院的 80例非小细胞肺癌患者和 20 例肺良性病变患者开展研究 , 通过对其中两种基质金属蛋白酶的表达水平检测及对比来证实研究的正确性 , 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资 料 本院 在 2013年 1月 ~2014年 1月 收治的肺癌患者中 , 选择具有可比性的 80例非小细胞肺癌患者以及 20例肺良性病变患者 , 其中男 52例 , 女 48例 , 平均年龄(54±9)岁 , 所有患者均确诊为肺癌患者 , 其中腺癌患者有 41例 , 鳞癌患者有 44例 , 腺鳞混合癌患者有 15例 ；分化程度方面低分化癌患者有 46例 , 中分化癌患者有 40例 , 高分化癌患者有 14例。

1. 2 主要试剂 基质金属蛋白酶 -2兔抗人多克隆抗体 , 基质金属蛋白酶 -9兔抗人多克隆抗体 , 生物素化羊抗兔抗体 ,过氧化物酶-链亲和素复合物。

1. 3 方法 对肺癌患者采用 LSAB法进行检测 , 先经过 3%的过氧化氢阻断内源性过氧化酶 20 min, 接着在微波炉中行抗原修复 , 时间约为 15 min, 随后依次加入 1:20的正常羊血清 , MMP-2加入 1:100的一抗、1:200的二抗和 1:200的三抗 , MMP-9加 入 1:50的 一 抗、1:200的 二 抗 和 1：200的 三 抗 ,随后在恒温箱中孵育 30 min, 温度调至 37℃ , 最后进行 PBS冲洗在 DAB-H2O2显色和苏木素复染 , 制成切片 , 在 400镜下观察每张切片的 5~10个视野 , 每个视野计数 100~200个肿瘤细胞 , 共计 1000个细胞 , 在计算出每张切片的阳性细胞百分数作为该切片上的表达水平。

1. 4 统计学方法 采用 SPSS15.0统计学软件对数据进行统计学分析。计量资料以均数 ± 标准差 ( x-±s)表示 , 采用 t检验 ；计数资料采用χ2检验 , P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表达水平及其与肺癌转移的关系 MMP-2、MMP-9在鳞癌中的表达水平最高 , 而表达水平较低的腺癌和腺鳞混合癌之间差异不大 , 且 MMP-2与 MMP-9在不同分化程度的肿瘤中表达水平差异无统计学意义 (P＞0.05), 见表1。

2. 2 MMP-2、MMP-9在 肺 癌 中 的 表 达 水 平 与 预 后 的 关 系MMP-2、MMP-9在肺癌预后方面的表达水平差异具有统计学意义 (P＜0.05), 与预后有着密切的相关性。见表2。

表1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表达水平及其与肺癌转移的关系

表1 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表达水平及其与肺癌转移的关系

注 ：两组比较 ,aP<0.05,bP>0.05

MMP-2(%)PMMP-9(%)P非小细胞肺癌 8061.3±16.9a<0.0566.1±19.2a<0.05肺良性病变 2016.8±10.2 17.2±9.6腺癌 4156.2±13.6a<0.0563.5±15.5a<0.05鳞癌 4465.4±18.1 73.7±19.3腺鳞混合癌 1555.8±12.9 62.1±16.6低分化癌 4661.2±14.3b>0.0570.4±15.7b>0.05中分化癌 4056.8±15.4 68.3±16.1高分化癌 1455.3±17.1 67.8±17.4项目 例数

表2 MMP-2、MMP-9在肺癌中的表达水平与预后的关系

3 讨论

恶性肿瘤的侵袭转移是一个及其复杂的过程［3］。肺癌细胞突破细胞处基质和毛细血管基底膜 , 随后侵入到相邻的淋巴系统或者进入血循环 , 随后通过毛细血管在进入其他处的组织或者器官里并着床生成肿瘤血管 , 这就完成了肺癌转移。近些年的研究表明 , 肺癌的转移是一个极其复杂的多基因调控的多阶段、多步骤过程并且基质金属蛋白酶是肺癌转移中最重要的蛋白酶［4］。本次研究通过 MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表达水平检测及其与肺癌转移和预后的关系分析,发现 MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表达水平明显比在肺良性病变中的表达水平高 , 同时 MMP-2、MMP-9 在鳞癌中的表达水平最高 , 而表达水平较低的腺癌和腺鳞混合癌之间差异不大 , 且 MMP-2 与 MMP-9 在不同分化程度的肿瘤中表达水平差异无统计学意义 (P＞0.05), 同时 MMP-2、MMP-9 在肺癌预后方面的表达水平差异具有统计学意义 (P＜0.05)。与薛洋等［5］的 MMP-2、MMP-9 在肺癌中的表达及其与肺癌转移和预后关系的研究结果基本一致。结合以往的研究 , MMP-2与 MMP-3 在肺癌中的表达水平检测肺癌转移和预后都有重要意义。

［1］蔡铭 ,翁鸢 ,王志强 ,等 .基质金属蛋白酶在早期肺癌中的表达 .中华实验外科杂志 , 2010,27(5):612-613.

［2］李莉 ,刘少扬 ,江大琼 .基质金属蛋白酶及其抑制剂在肿瘤发展和治疗中的作用 .肿瘤防治研究 , 2004,31(2):321-323.

［3］李涛 ,曾昭冲 ,王鲁 ,等 .放射后肺癌细胞 MMP-2 表达、活性的变化及其对侵袭性的影响 .中华实验外科杂志 , 2007, 24(12): 1525-1527.

［4］梅 同 华 ,罗 彬 ,马 英 .肺 癌 患 者 肺 组 织 MMP-2、MMP-7 和TIMP-2 表 达 及 意 义 .第 三 军 医 大 学 学 报 , 2004,26(16):1491-1493.

［5］薛 洋 ,周 清 华 ,张 尚 福 ,等 .MMP-2、MMP-9 在 肺 癌 中 的 表达及其与肺癌转移和预后关系的研究 .华西医学 , 2008, 23(2): 225-226.

2014-04-16］

450052 郑州大学第一附属医院呼吸内科 /河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室 (王红民 )；郑州大学附属郑州中心医院 /郑州市中心医院呼吸内科 (张小红 )