直肠癌组织中CD133的表达及其临床意义※

穆寅东周 飞梁 军刘志新李月珍张际绯

直肠癌组织中CD133的表达及其临床意义※

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目的直肠癌位于直肠内，是人类常见的消化道恶性肿瘤之一。癌干细胞理论的提出，使人们对肿瘤发生发展有了一个全新的认识。根据癌干细胞的理论，直肠癌组织内存在的少量癌干细胞，最终导致了肿瘤治疗后的复发和转移。通过癌干细胞的表面标记物，可帮助确定癌干细胞，并且研究标记物在直肠癌与正常直肠组织表达的不同，以及它的表达与不同临床病理特点之间的关系。在本实验中，对直肠癌患者组织标本中的癌干细胞标记物CD133进行研究。方法采用免疫组织化学法检测 CD133蛋白表达与直肠癌临床病理参数之间的关系，及它在癌组织和正常直肠组织中表达的不同特点。结果与正常直肠组织相比，直肠癌组织中CD133蛋白表达水平明显升高。它的表达还与肿瘤Duke’s分期和TNM分期有明显的相关性。临床分期越高，肿瘤组织表达的CD133染色率越高。而且相对于无淋巴结转移组，在有淋巴结转移的样本组，CD133的表达率明显升高。结论人直肠癌中，癌干细胞标记物CD133可对患者的临床病理特点做出评估，说明它在肿瘤的形成过程中起到一定的作用。

CD133；直肠癌；癌干细胞；干细胞；免疫组织化学

直肠癌位于直肠内，是人类常见的消化道恶性肿瘤之一。因其位于盆腔内，位置低，手术操作难度大，术后局部复发风险大，患者预后较差，而且与结肠癌相比，直肠癌的预后更差[1]。在我国直肠癌还具有着低位直肠癌发病率高、青年人所占比例高的特点[2]。最近癌干细胞的理论提出，认为肿瘤是一小部分存在肿瘤细胞中的癌干细胞（Cancer stem cell,CSC）导致的。无论手术还是化疗，均无法彻底消灭这些少量的癌干细胞。在癌干细胞表面，有一些特殊表达的标记物，通过这些标记物，可把癌干细胞筛选出来。CD133就是癌干细胞的标记物之一。CD133（也称为Prominin-1或AC133）是一个具有865个氨基酸的5跨膜糖蛋白，总分子量为120kDa。通过CD133单克隆抗体，人们在脑瘤[3]、胰腺癌[4]、肺癌[5]、结肠癌[6]组织中分离出癌干细胞。通过把CD133+结肠癌细胞亚群在体外移植到裸鼠身上，可形成与原代同样理化性质的肿瘤[7]。在本实验中，笔者通过对直肠癌患者组织中CD133表达进行研究，以此来探讨它与肿瘤病理特征之间的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 原发性直肠癌的组织标本取自2005年1月至2007年1月在牡丹江医学院附属红旗医院手术的病例。术前，所有患者未接受过如放疗或化疗任何类型的治疗。40例标本中，有10例高分化，15例中分化，15例低分化腺癌。正常黏膜标本从距离直肠肿瘤至少有5cm远处获得。所有肿瘤的组织学和肿瘤临床分期均由病理学专家完成。

1.2 评定标准 镜下随机选择3～7区，查找染色细胞数（×200高倍视野）。出现20%以上的CD133染色的为阳性结果。由两位病理专家分别独立的对CD133染色结果进行评估。

1.3 统计学分析 采用SPSS 19.0软件对所有数据进行分析。用χ2检验对CD133染色率与临床病理参数之间的关系进行评估，以P＜0.05具有统计学意义。

2 结果

2.1 病例特点 40例患者中，男占50.0%（20/40），女占50.0%（20/40），平均年龄59.3岁（范围35～69岁），男女比例为1:1。18例在60岁以上（45.0%），22例60岁以下（55.0%）。所有患者的诊断均为直肠腺癌，10例为高分化（25.0%），15例为中度分化（37.5%），15例为低分化（37.5%）。17例为Duke’s A＋B期（42.5%），23例在Duke’s C＋D期（57.5%）。同样TNMⅠ＋Ⅱ期有17例（42.5%），TNMⅢ＋Ⅳ期有23例（57.5%）。有淋巴结转移为21例（52.5%），无转移的为19例（47.5%）（表1）。

表 1 患者特点[n(%)]

2.2 CD133在正常直肠组织与直肠癌组织中的表达特点 与正常直肠组织相比，CD133蛋白在直肠癌组织中表达明显提高，有统计学意义。本研究发现CD133均在直肠癌组织中的细胞质中表达。在正常直肠组织中有6例出现了CD133的表达。发现染色率均≥20%。因此，规定CD133超过20%的阳性染色细胞为阳性，其余为阴性。CD133在正常直肠组织和直肠癌组织中的表达，结果见表2、图1。

表2 ALDH1阳性表达的直肠癌组织与正常直肠组织的关系[n(%)]

图 1 CD133免疫组化染色在直肠癌组织和正常直肠组织中的表达（a,在直肠癌中的表达；b,在直肠癌旁组织中的表达）

3 讨论

肠癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其中直肠癌又因其预后差，治疗困难引起研究者的重视[8]。癌干细胞理论的提出，使笔者对肿瘤的发生、发展有了全新的认识。通过癌干细胞表面的标记物，可以将癌干细胞区分出来，并进行进一步研究。

在本研究中发现与正常直肠组织相比，直肠癌组织中CD133的表达明显升高，这与O′Brien 等的研究结果一致[9]。而且CD133的表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小、组织学分级无关。但却表现出与肿瘤临床分期：TNM分期和Duke’s 分期有关。临床分期越高，CD133的染色率就越高。同时表达也与有无淋巴结转移有明显的关系，淋巴结转移阳性的患者会表现出更多的CD133染色率。

总之，CD133的表达与直肠癌患者的临床病理特征密切相关。通过对CD133表达的研究，可以更好地了解肿瘤细胞的临床病理特点。只有通过癌干细胞的特异标记物准确的发现这些癌干细胞，才能在未来的治疗中成功的将其消灭，从而从根本上治愈肿瘤。

[1] 李景南,赵莉,苗政,等.结肠癌和直肠癌发病模式和异同分析[J].中国实用内科杂志,2010,10(30):916-918.

[2] 周飞,宁晓婷.直肠癌组织中usp22的表达及其临床意义[J].实用医学杂志,2011,27(18):3281-3283.

[3] Singh SK,Hawkins C,Clarke ID,et al.Identification of human brain tumor initiating cells[J]. Nature,2004,432:396-401.

[4] Hermann PC,Huber SI,Herrler T,et al.Distinct populations of cancer stem cells determine tumor growth and metastatic activity in human pancreatic cancer[J].Cell Stem Cell,2007,1:313-323.

[5] Eramo A,Lotti F,Sette G,et al. Identification and expansion of the tumorigenic lung cancer stem cell population[J].Cell Death Differ, 2008,15:504-514.

[6] Ricci-Vitiani L,Lombardi DG,Pilozzi E,et al.Identification and expansion of human colon-cancer-initiating cells[J].Nature,2007, 445:111-115.

[7] Ieta K,Tanaka F,Haraguchi N,et al.Biological and genetic characteristics of tumor-initiating cells in colon cancer[J].Ann Surg Oncol,2008,15:638-648.

[8] Center MM,Jemal A,Ward E.International trends in colorectal cancer incidence rates [J]. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev,2009, 18(6):1688-1694.

[9] O’Brien C.A.,Pollett A.,Gallinger S.,et al. A human colon cancer cell capable of initiating tumor growth in immunodeficient mice[J]. Nature,2007,445:106-110.

R735.3＋7

A

1673-5846(2014)02-0202-02

1牡丹江医学院基础医学院组胚教研室，黑龙江牡丹江 157000

2黑龙江省齐齐哈尔市第一医院肿瘤外科，黑龙江齐齐哈尔 161000

黑龙江省科技厅基金项目（编号：D201259）

张际绯，博士研究生导师。E-mail：Zhangjifei777@Yahoo.com.cn。