HPLC法测定天王补心丸丹参中丹参素钠的含量

孙 雪

HPLC法测定天王补心丸丹参中丹参素钠的含量

孙 雪

目的测定天王补心丸丹参中丹参素钠的含量。方法用HPLC法定量测定天王补心丸中丹参的含量。结果丹参素钠的线性范围为12.8µg·mL-1～128.0µg·mL-1（r=0.9991，n=5）；平均回收率为94.6%。结论该方法准确可靠，可用于天王补心丸丹参中丹参素钠的含量测定。

HPLC法；天王补心丸；丹参素钠

天王补心丸的检验方法现收载于《中国药典》2010年版二部[1]，由丹参等十六味中药组成，其中丹参作为主药，但该版药典未对丹参进行定量检测，本实验采用HPLC法测定天王补心丸丹参中丹参素钠的含量。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent1100高效液相色谱仪；BP110S电子天平。

1.2 试药 甲醇为色谱纯，水为纯化水，其它试剂为分析纯；丹参素钠对照品（批号：11085-201205，中国药品生物制品检定所）；天王补心丸（赤峰丹龙药业有限公司，批准文号：国药准字 Z15021315，生产批号：20120908）。

2 含量测定

2.1 色谱条件[2]C18 200mm×4.65µm；以甲醇-1%冰醋酸（20:80）为流动相；检测波长为281nm；检测器：Agilent1100 DAD检测器；工作站型号：G2170AA G2180AA；柱温35℃。进样量：10µl；流速：1.0ml/min，见图1。

图1 王补心丸HPLC色谱图（a.对照品；b.样品；c阴性对照）

2.2 对照品溶液的制备 精密称定丹参素钠对照品适量，加甲醇配成每1ml含丹参素64µg，即得。

2.3 供试品溶液的制备 取本品大蜜丸1.1g，置锥形瓶中，加50%甲醇加热回流5h，放冷，过滤，至20ml的量瓶中，加 50%甲醇至刻度，进样前就0.45µm滤过。

2.4 阴性对照溶液的制备 按处方比例制成阴性对照品，同供试品的制备方法制成阴性对照溶液。

2.5 线性关系的考查 精密称定丹参素钠对照品0.01288g，置100ml容量瓶中，加50%甲醇溶解至刻度，摇匀，做为贮备溶液，分别吸取1、2、3、5、10ml，置10ml容量瓶中，分别加甲醇稀释至刻度，摇匀。按上述色谱条件测定，得回归方程：Y=1.45 ×104X－9.955×103，r=0.9991。结果表明，丹参素钠在12.8µg·mL-1～128.0µg·mL-1范围内具有良好的线性关系。

2.6 精密度试验 精密吸取上述对照溶液10µl，连续进样5次，记录峰面积，RSD为0.75%（n=5）。结果表明仪器具有良好的精密度。

2.7 重复性试验 取供试品（批号：101102），照2.1方法配制5份供试液，按上述条件测定，每丸含丹参按丹参素钠计，大蜜丸为0.560mg，RSD为0.45%（n=5）。结果表明重复性良好。

2.8 稳定性试验 精密吸取同一批供试品溶液各10µl，分别在0、3、6、9、12、18h测定峰面积值的变化，结果RSD为0.8%。

2.9 加样回收率试验 精密称取已知丹参素钠含量的天王补心丸（批号：120507）6份，每份称重约为 0.55g，分别精密加入丹参素钠对照品溶液（0.28mg/ml）1.0ml，照2.3制备待测溶液，按2.1测定，结果平均回收率为94.6%，RSD为1.9%。测定结果见表1。

表1 天王补心丸中丹参素钠加样回收试验结果

3 讨论

3.1 用紫外分光光度计进行扫描，结果在281nm处该溶液的吸收度最高，将测定波长选定在281nm 波长处，此波长对紫外吸收灵敏。

3.2 在进行含量测定时选用三种流动相进行比较：甲醇-水-冰醋酸（8:91:1）、以甲醇-1%冰醋酸（20:80）、甲醇-1%冰醋酸（12:88），实验证明采用以甲醇-1%冰醋酸（20:80）作为流动相能得到最佳的分离效果，分离度好，保留时间合适，无拖尾现象。

3.3 供试品溶液的制备用分别加热回流2h、3h、5h、6h，结果回流5h、6h有效成份提取更加完全，但是回流5h、6h结果无差别，因此选择用回流5h。实验结果表明所用此方法能更有效地测定天王补心丸丹参中丹参素钠的含量。

[1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典[S].一部.北京:中国医药科技出版社,2010:70,97,313,372.

[2] 傅黎春,李桃英,彭栋梁.HPLC法测定丹枣口服液中丹参素及原儿茶醛的含量[J].中国药师,2009,12(1):72-73.

R927.2

A

1673-5846(2014)02-0035-02

衡水市食品药品检验所，河北衡水 053000

孙雪（1973-），女，本科，副主任药师。