郭 立
丹参提取物中酚酸类含量的快速检测方法分析
郭 立
目的对丹参提取物中酚酸类含量的快速检测方法进行分析探讨,为今后的药学研究工作提供可靠的参考依据。方法将丹酚酸B作为对照,经分光光度法在482nm处对丹参提取物中的酚酸类物质的含量进行测定。结果经统计,所建立的方法中,丹酚酸B在0.0782~1.0166mg内存在良好的线性关系,r=0.9997,回收率为100.93%,RSD为0.79%。丹参提取物中酚酸类物质的含量为19.58%。结论经分光光度法对丹参提取物中酚酸类含量进行测定时具有操作简单、迅速、结果准确可靠,在丹参中总酚酸含量测定中可发挥重要作用,值得关注。
丹参提取物;丹酚酸;分光光度法;检测
随着现代药理研究的不断发展与完善,人们对丹参有效成分的研究逐渐深入,曾有文献报道,丹参提取物中酚酸类成分可产生良好的缩小心肌梗死范围的效果[1]。本文对丹参提取物中酚酸类含量的快速检测方法进行分析探讨,采取分光光度法,以丹酚酸B作为对照展开丹参提取物中酚酸类成分进行了检测,现汇报如下。
1.1 实验仪器 所用仪器包括UV-1601紫外-可见分光光度计、BUG25-12 超声波清洗机、数显恒温水浴锅、AEG-45SM 电子天平、BP121S 电子天平。
1.2 试药 所需试药包括丹参药材提取物,丹酚酸B对照品,所需试剂均为分析纯。
2.1 溶液制备
2.1.1 对照品溶液的制备 精称1.6mg丹酚酸B对照品,将其放置在10ml的容量瓶中,经浓度为75%的甲醇进行溶解,而后定容至刻度,所得溶液为每1ml中含有0.16mg丹酚酸B对照品。
2.1.2 供试品溶液制备 精称0.02g丹参提取物粉末,经沸水溶解,而后冷却至室温,在 25ml的容量瓶中定容,摇匀后备用[2]。
2.2 线性关系考察 精密移取上述配制好的对照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、6.5ml,放置于25ml容量瓶中,分别按照顺序加入浓度为5%的NaNO23ml、浓度为10%的Al(NO3)30.5ml以及15ml的NaOH试液。经水定容,摇匀后放置5min,而后在482nm的波长下对各溶液的吸光度进行检测。将丹酚酸B浓度作为横坐标,吸光度作为纵坐标,展开线性回归。最终得到回归方程为:Y=0.8121X+ 0.0325,r=0.9997。证实丹酚酸 B浓度在0.0782~1.0166mg内存在良好的线性关系。
2.3 精密度实验 精密吸取2.1项配制的丹酚酸B对照品溶液5ml,放置于25ml的容量瓶中,以2.2所示显色条件进行供试品溶液制备,并在482nm波长下展开吸光度检测,连续测定6次,计算RSD值,结果发现,本次实验的RSD值为0.008%,证实仪器具有良好的精密度。
2.4 稳定性实验 精称丹参提取物粉末0.02g,以2.1所示条件配制成供试品溶液,取 5ml,以 2.2所示显色条件进行溶液配制,而后分别在0.0、0.5、1.0、1.5、3.0、4.0、8.0、12.0、24.0h后在482nm条件下进行吸光度测定。结果发现,该组样品在24h内酚酸含量平均为19.541%,RSD值为3.24%;在12h内丹酚酸含量平均值为19.721%,RSD值为1.65%。证实样品供试品溶液在显色12h内稳定性良好。
2.5 重现性实验 精密称定丹参提取物粉末0.025g,共5份,将其按照2.1所示条件配制成供试品溶液,取供试品 5ml,经 2.2所示条件进行显色后在 482nm波长下对吸光度进行检测。经统计发现。5份样品中丹酚酸的含量平均为19.421%,RSD为1.19%,证实该实验具有良好的重现性。
2.6 加样回收实验 精密称定6份已知含量的丹参提取物,分别加入已知含量的对照品,而后经 2.1所示条件制成供试品溶液,移取5ml后以2.2所示条件进行显色,而后经482nm波长下展开吸光度测定,计算加样回收率,结果详见表1。
2.7 样品含量测定 取3批丹参提取物样品,经2.1所示条件配制成供试品,取5ml,经2.2所示条件显色后在482nm波长下对吸光度进行检测,计算样品中丹酚酸含量。结果发现,3批次样品中丹酚酸含量分别为19.981%、19.523%、19.521%,平均值为19.675%。
表1 加样回收实验结果统计
中药材丹参为唇形科植物丹参的干燥块茎,主要功效为活血祛瘀、清心除烦、通经止痛、凉血消痈等,在胸痹心痛、癥瘕积聚、脘腹胁痛、热痹疼痛、月经不调、心烦不眠、痛经经闭以及疮疡肿痛等症状中具有良好的治疗效果[3]。现代药理研究表明,丹参中酚酸类有效成分在疾病治疗中发挥了重要作用,本次实验中,经分光光度法对丹参提取物中酚酸类成分进行测定,结果发现,本次试验所选择的条件具有良好的精密度、重现性,线性关系理想,样品在12h内具有良好稳定性,在今后的药学研究中值得关注与推广。
[1] 程忠洲,屈英格,李华,等.光度法研究姜黄素与铁(Ⅲ)的络合反应[J].西北大学学报(自然科学版),2010,40(04):627-630.
[2] 邓瑞,张静,罗维早,等.RRLC-UV同时测定川白芷中6种香豆素类成分的含量[J].中国中药杂志,2010,17(23):3184-3187.
[3] 王伟,李焱,谢晓梅,等.高效液相色谱法同时测定丹参中4种酚酸类成分的含量[J].安徽医药,2010,14(11):1276-1278.
R927.1
A
1673-5846(2014)02-0025-02
吉林省集安益盛药业,吉林通化 134200